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文档简介

1、如何看流式细胞术结果中的图FCM散据的存贮的方式是 FCS2.0 (flow cytometry standard ),采用列表排队(List Mode)方式。易于加工处理分析，但缺乏直观性，数据的显示通常有一维直方图、二维点图、等高线图、密度图等几种；由数据还可以做出标准曲线进行定量分析。Q1:坐标轴的意义?1、单参数直方图每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布，以直方图的方式来显示。在图中，横坐标表 示荧光信号或散射光信号相对强度的值，其单位是道数( channel ),可以是线形(line )或者对数 (log )。纵坐标一般是相对细胞/粒子数(count) !书Mlie ，岫 Q

2、”个 54Amount of DhJA in each Cell (DNAContent!2、 二维图在二维图的中，横坐标/纵坐标都表示荧光信号或散射光信号相对强度的值，可以是线形（ line ） 或者对数（log ）。双参数图可以将样品细胞群分开，从而方便对感兴趣的细胞进行分析。Q2 “Gate” 和 “Regin” ? 设门是流式细胞分析中一种重要的技术，只有通过最佳的设门方式，才能准确地获取和分析数据，从而得到临床诊断和科研中有价值的信息。 On-line gating(threshold gating)监测/获取数据 Off-line gating :分析实验数据散射光设门/荧光设门散

3、射光/荧光联合设门多重逻辑门(组合门)多重逻辑门 G3=R1 and R2 (G3=R1X R2)其它： G=R1 or R2 G=R1 not R2曲5GGOflTC 441 01Q3:流式图中的颜色与荧光颜色？流式图中的颜色为区分不同细胞群而人为指定，与荧光颜色无关!Q4:流式图中的阴/阳（N/P）如何划分？如何做M1阴性界限？实际上，这个 M1的划分完全是根据阴性（同型）对照来的！如下图：左图为 同型对照，即：您所检测的物质在阴性组中的基础表达量，可以理解为背景、静息状态下、基础水平、 未受刺激时等。右图即阳性组，也就是接受刺激后，功能状态下、药物作用后等。z -i 一Q5:这么巧，阴性正好在10划分？ ？其实，我们可以人为地将电压，放大倍数调到相应的大小，使阴性的右边界在某一个值上，（通 常划在101附近）这样后期做sample时好看！当然也可以调到102, 103次方。Q6:为什么要进行荧光补偿？流式细胞分析中经常要用到 2种以上的荧光标记抗体进行染色，而目前所使用的多种荧光染料发

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