第二章-紫外可见分光光度法-2

1、第二节朗伯比尔定律第二节朗伯比尔定律一、朗伯比尔（一、朗伯比尔（Lambert-Beer）定律）定律1 1、几个基本概念、几个基本概念第四节紫外分光光度计第四节紫外分光光度计2、紫外紫外-可见分光光度计类型可见分光光度计类型光源光源单色器单色器样品室样品室检测器检测器显示器显示器二、分光光度计的类型二、分光光度计的类型1.1.单光束单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。2.2.双光束双光束 自动记录，快速全波段

2、自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。仪器复杂，价格较高。3.3.双波长双波长 将不同波长的两束单色光将不同波长的两束单色光, ,快束交替通过同一吸收池而后快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。到达检测器。产生交流信号。无需参比池。(2)(2)单色器与色散元件单色器与色散元件 组成组成:进口狭缝进口狭缝 准直镜准直镜 色散元件出口狭缝色散元件出口狭缝 色散元件色散元件 ：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；将复合光分解成单

3、色光；棱镜或光栅； 准直镜准直镜 ：聚光镜：聚光镜 狭缝狭缝 ：宽度为：宽度为0 02mm,or 3mm2mm,or 3mm，可调节，可调节BackBack棱镜：玻璃、石英棱镜：玻璃、石英光栅：高度抛光的表面上刻出大量平行等距离槽。光栅：高度抛光的表面上刻出大量平行等距离槽。 600 - 1200600 - 1200条槽条槽/1mm/1mm。( () )吸收池与检测器吸收池与检测器吸收池吸收池（比色皿）光学玻璃用于可见光，石英用于紫外光，（比色皿）光学玻璃用于可见光，石英用于紫外光，厚度：厚度：0.5cm、1cm、2cm （4） 结果显示记录系统结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器

4、自动控制和结果处理检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 光信号光信号-可测的电信号可测的电信号 常用的有光电池、光电管或光电倍增管。常用的有光电池、光电管或光电倍增管。(1) (1) 光光 源源 对光源的要求对光源的要求 发射强度足够而且稳定发射强度足够而且稳定 具有连续光谱且发光面积小具有连续光谱且发光面积小5、目前紫外可见光分光光度计UV8500UV8500双光束紫外可见光分光光度计双光束紫外可见光分光光度计生产厂家：上海天美科学仪器有限公司生产厂家：上海天美科学仪器有限公司75型 Back72型 Back第六节第六节 定量分析定量分析定量分析的概述定量分析的概述一、目视比色法：一、目视比色法：二、光电比色法：二、光电比色法：三、分光光度法：三、分光光度法： 单一组分定量分析单一组分定量分析 混合物的定量分析混合物的定量分析定量分析的概述定量分析的概述 波长范围 目视比色法、光电比色法及可见分光光度法测定的波长范围为400-760nm。紫外分光光度法测定的波长范围为200