x1-1 无菌操作技术实践

1、一、单项选择题1下列对灭菌和消毒的理解不正确的是()A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是完全相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。答案B2用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D接种了的选择培养基解析将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目

2、应明显多于选择培养基上的数目，因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵循的原则之一是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。答案C3有关稀释涂布平板法，叙述错误的是()A首先将菌液进行一系列的梯度稀释B系列稀释后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C适宜条件下培养D结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。用不同稀释度的菌液接种，只有在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，才能够在培养基表面形成单个菌落，而不是所有培养基上均可出现单个菌落。故选D。答案D

3、4用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌A B C D解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故错误。答案C5在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是()A作为碳源，为酵母菌提供能源物质B作为碳源，用于酵母菌合成代谢产物C作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸D作为氮源，用于酵母菌合成代谢产物解析在酿

4、酒生产上，向发酵罐中加入少量尿素是为酵母菌提供氮源，用于酵母菌繁殖过程中合成蛋白质和核酸。酿酒生产上所得到的酵母菌的代谢产物是酒精，酒精的产生不需要氮。答案C6在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是()A分解尿素的细菌 B硝化细菌C分解纤维素的细菌 D乳酸菌解析分解纤维素的细菌能将纤维素分解，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。答案C7通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中

5、分别分离出()大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌A B C D解析缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，霉菌能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌，放线菌能生长。答案A8现有两种固体培养基，已知其配制时所加的成分和含量如下表，用这两种培养基分别去分离土壤中的两种微生物，你认为它们适于分离()成分KH2PO4MgSO47H2ONaClCaSO42H2OCaCO3葡萄糖纯淀粉甲培养基0.02 %0.02%0.02%0.01%0.5%0.5%2%乙培养基0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%A.甲培养基适于分离自养型自生固氮

6、菌；乙培养基适于分离异养型自生固氮菌B甲培养基适于分离异养型自生固氮菌；乙培养基适于分离自养型自生固氮菌C甲培养基适于分离酵母菌；乙培养基适于分离真菌D甲培养基适于分离自养型共生细菌；乙培养基适于分离异养型共生固氮菌解析固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌， 甲培养基中含有的葡萄糖和淀粉是有机物，由此推出该培养基适于分离异养型的自生固氮菌；乙培养基中不含有机碳源，所以可用来分离培养自养型的自生固氮菌。答案B9分离纤维素分解菌的实验过程中，下列操作有误的是()A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B富集培养这一步可省略，但培养的纤维素分解菌少C经稀释培养后，用刚果红染色D对照组可用同样

7、量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上解析经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；经稀释培养后，用刚果红染色；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。答案A10下列关于影响植物组织培养的因素的叙述不正确的是()A幼嫩组织较成熟组织易培养成功B给外植体消毒用70%的酒精C接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照D生长素与细胞分裂素含量之比较高时有利于芽的分化解析生长素与细胞分裂素含量之比较高时，有利于根的分化；较低时，有利于芽的分化；二者相当时，促进愈伤组织的生长。答案D11关于植物组织培养的内容，以下说法错误的是()A一般来说

8、容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养B对菊花茎段进行组织培养，不加植物激素也能成功C接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照即可D移栽生根的试管苗之前，先打开瓶口，让试管苗在培养间生长几日解析在植物组织培养过程中，接种后的锥形瓶放入无菌箱中，给予适宜的温度和光照进行培养，培养期间应定期消毒，防止细菌等微生物污染。答案C12下面为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是()A上述过程中脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用B再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程C从叶组织块到种苗形成的过程说明植物叶片细胞具有全能性D人工种子可

9、以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题解析从流程图可知，植物组织培养包括脱分化和再分化两个阶段，即b和c步骤，再分化发生在c步骤。答案B二、多项选择题13某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是 ()A污染主要不是培养基灭菌时间短造成的B污染主要来源于组织培养所用的离体组织C调节培养基pH不能解决污染问题D调节培养温度不能解决污染问题解析本题考查对知识点的理解和应用能力，所需的知识点包括植物组织培养的过程、培养基的灭菌等相关的知识。抓住图中单一变量对污染率的影响，随着离体组织

10、灭菌时间的延长，污染率在下降，而培养基的灭菌时间的长短对污染率影响不大，同样调节培养基的pH和培养温度对污染率影响也很小，所以A、B、C、D都正确。如果考生不去细心分析图中的变量，对污染率的影响，那么很容易做错。答案ABCD二、非选择题14科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。(1)分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的_、大小及形状不同，在电场中的_不同而实现分离。(2)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_和_。(3)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液

11、。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的_，确定该蛋白质的抗菌效果。(4)细菌培养常用的接种方法有_和_。实验结束后，对使用过的培养基应进行_处理。解析(1)电泳法是常用的蛋白质分离技术。电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。因为多肽具有可解离的基团，在一定的pH下基团会带上电荷。因此，在电场的作用下会向与所带电荷相反的电极移动。因为待分离样品中各种分子的所带电荷的性质以及本身分子大小不同 ，使得带电分子产生不同的迁移速度，从而达到分离的目的。(2)(4)牛肉膏和蛋白胨具有丰富的碳和氮，所以为培养基中的细菌提供碳源和氮源。检验抗菌蛋白的抗菌效果，可以设置对照实验，实验组中加入抗菌蛋白，

12、对照组不加入抗菌蛋白，通过比较菌落多少可以确定抗菌效果：如果实验组的菌落数量明显少于对照组或者实验组没有菌落，则确定该蛋白抗菌效果良好；如果两组菌落数量相当，说明该蛋白抗菌效果不好。答案(1)电荷(带电情况)迁移速度(2)碳源氮源(3)数量(4)平板划线法稀释涂布平板法灭菌15炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。(1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。(2)细菌鉴定：实验流程如图所示对配制的液体培养基等需采取_方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为_(填“无机碳”或

13、“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后，用_观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后，35培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是_。对照组试管中应加入_，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有_。解析(2)微生物的培养基配制后常用高压蒸汽法灭菌；由于炭疽杆菌是异养型微生物，培养基中应加有机碳作碳源。炭疽杆菌呈竹节状排列，需借助显微镜观察。接种培养后，液体培养基由澄清变浑浊，应是炭疽杆菌大量繁殖的

14、结果；实验组与对照组的设置应遵循单一变量原则和等量原则，实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液，对照组应加入等量的生理盐水；若疑似患者被炭疽杆菌感染，则培养6小时后，实验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡，浑浊度会明显低于对照组。接种疫苗后，机体通过体液免疫产生抗体，与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞和效应B细胞。答案(2)高压蒸汽(98 kPa蒸汽)有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、效应B细胞16通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等。据图甲、表乙回答问题：愈伤组织胚状体植物体图甲植物组织培养过程表乙：植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂

15、素的培养基中的生长状况A组B组C组D组E组吲哚乙酸03 ppm3 ppm0.03 ppm0细胞分裂素00.2 ppm0.002 ppm1.0 ppm0.2 ppm花芽生长状况仍是组织切块形成愈伤组织愈伤组织分化出根愈伤组织分化出嫩芽稍生长(1)离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是_。(2)用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构，若包上人造种皮，制成人工种子，可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。胚状体来源于离体的植物体细胞，其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中_和_过程，在此过程中被培养的细胞始终受_的调节(内填序号)。(3)应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株，其原因是_。(4)从表乙的实验结果可看出：吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的两种重要物质。其中，新芽形成必需的条件是_；而在培养形成完整新个体的过程中，对它们的调控关键是_。解析植物组织培养利用细胞全能性的原理，在离体状态下