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文档简介

1、DNS法测还原糖方法一原理DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下， 二硝基水杨酸（DNS ）与还原糖发生氧化还原 反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，540nm处有吸收，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。:3一抽成一5ti存成水 扬粉）枯红色OH NO2HOOC-<S>+还原糖NOz(DNS)黄色二试剂及方法2.1 试齐IJ1. 1 mg/ml的葡萄糖溶液2. 3,5 二硝基水杨酸用400mL蒸储水溶解6.3g3 , 5一二硝基水杨酸，逐步加入21g氢氧化钠，再加入182g四水合酒石酸钾钠、5.0g苯酚、5

2、.0g无水亚硫酸钠，温水浴（不超过48 C ）,不断搅 拌，直至溶液清澈透明。用蒸储水定容至 1000mL，保存在棕色瓶中，与二氧化碳隔绝， _ 静置57天后使用，贮存期为6个月。2.2 葡萄糖标曲的绘制表1葡萄糖标曲的绘制方法试齐012345葡锢糖标准液（ml）00.10.20.30.40.5蒸储水（ml）0.50.40.30.20.103,5-二硝基水杨酸（ml）0.50.50.50.50.50.5糖含量（mg）00.10.20.30.40.5混合均匀，沸水浴5min,冷却后加入4mL蒸储水，混匀，在540nm下测O2.3 发酵液样品测定将发酵液稀释一定倍数后，取3只比色管标号1,2,3,加入稀释和的发酵液 0.5 ml,加入DNS试剂0.5 ml混匀，沸水浴5min,冷却后加入4 ml蒸储水混匀，测 OD540表2样品的测定方法管号012还原糖待测样品 （mL）0.00.50.5蒸储水 （mL）0.50.00.0DNS试齐1J ( mL)0.50.50.5蒸储水 （mL）444A 540 nm计算所得还原糖含量 （mg）结果计算3.1标曲糖含量（mg）y = 3.1599x-0.0337 RM = 0.99540寸y_03.2样品的还原糖含量还

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