氯霉素类药残留提取方法——液液萃取

1、氯霉素类药残留提取方法液液萃取 1)液液萃取(liquid liquid extraction， lle) 动物基质中caps的检测，其提取溶剂分为有机溶剂和水溶液两类。 a.有机溶剂提取 常用的有机溶剂有、和等，也可以举行不同比例混合后提取。提取溶剂中常加入、等，除去样品中水分的同时，盐析蛋白质，提高提取效率。乙酸乙酯既能有效提取caps，又能削减等水溶性杂质被萃取到溶剂中，是采纳最多的提取溶剂。 rodziewicz等建立了奶粉中cap的残留分析办法。用乙酸乙酯实行lle办法提取，脂肪用正己烷除去，lc-ms/ms测定。办法回收率为90.2%96.3%，日内rsd小于12%，日间rsd小于

2、15%；cca为0.09ug/kg，cc为011ug/kg、xia等用乙酸乙酯提取鸡肝、猪肝中cap，除脂后，oasis hlb固相萃取柱净化，超高效液相色谱-串联质谱(uplc-ms/ms)检测。办法回收率为95.5%106.7%，rsd小于12.2%，办法lod小于0.02ug/kg。chou等用乙酸乙酯提取猪肉、猪肝、猪肾、牛肉、牛肝、鱼和鸡肉中的tap和ff，正己烷除脂后，lc-ms/ms检测。办法回收率为72.5%97.6%，定量限(loq)均为1.0ng/g。蒋定国等用含有1%高氯酸的乙酸乙酯提取牛奶中的cap，提取液浓缩干后用0.5mol/l高氯酸溶液溶解，正己烷去除脂溶性杂质，

3、高效液相色谱(hplc)测定。高氯酸可以很好的去除蛋白。办法lod为11ug/kg，平均回收率为88.0%97.7%，rsd为5.3%6.4%。 wang等以建立了牛奶中cap的迅速分析办法。用乙腈提取后，lc-ms/ms测定。办法lod为0.05ug/kg，loq为0.2ug/kg；回收率在88.8%100.6%之间，rsd小于15%。tian采纳乙腈提取牛奶中包括cap在内的29种药物，c18固相萃取柱净化后，采纳lc-ms/ms检测。办法回收率为71%107%，rsd小于13.7%；cap的loq为0.03ug/kg、lu等用乙腈提取鸡蛋、牛奶、蜂蜜中的cap，固相萃取柱净化后，lc-m

4、s/ms检测。平均回收率在95.8%102.3%之间，日内和日间rsd分离小于7.13%和8.89%。cronly等开发了牛奶和蜂蜜中cap的检测办法。牛奶中加入naci后挺直用乙腈提取，蜂蜜先加水稀释后，再用乙腈提取，提取液用正己烷除脂，lc-ms/ms测定。牛奶中的cca和cc分离为0.07ug/l和0.11ug/l，蜂蜜中分离为0.08g/kg和0.13g/kg。 vargas mamani等采纳甲醇提取牛奶中的cap等药物，经固相萃取净化后，hplc测定。办法回收率和敏捷度均满足残留分析要求。 van de riet等采纳丙酮提取水产品中的cap、tap、ff和ffa，提取液再用二氯甲

5、烷反萃取，蒸干后，用稀酸溶解，正己烷除脂，液相色谱-质谱(lc-ms)测定。办法回收率在71%107%之间，rsd小于10%；cap和ff的cca为0.1ng/g，tap为0.3ng/g，ffa为1.0ng/g。 大部分caps是中等极性化合物，在乙酸乙酯、乙腈等有机溶剂中均有较高的溶解度，但ff代谢物ffa分子中含有碱性的氨基，常在碱性条件下提取。xie等建立了鸡蛋中tap、ff、ffa的hplc分析办法。样品用乙酸乙酯-乙腈-氨水(49+49+2，v/v)提取，正己烷除脂后，hplc-荧光检测器(fld)测定。办法lod为1.5ugkg(tap、ff)，0.5ug/kg(ffa)，loq为

6、5ug/kg(tap、ff)，2ug/kg(ffa)：回收率为86.4%93.8% (tap)、87.4%92.3%(ff)、89.0%95.2%(ffa)，日内和日间rsd分离小于6.7%和10.8%。zhang等用2%氨水-乙酸乙酯提取鸡肉中cap、tap、ff、ffa，蒸干提取液后，5%乙酸水溶液复溶，正己烷脱脂，mcx固相萃取柱净化，lc-ms/ms检测。办法lod：cap为0.1ug/kg，tap、ffa为1ug/kg，ff为0.2ug/kg，回收率在95.1%107.3%之间，日内和日间rsd分离小于10.9%和10.6%。彭涛等用lc-ms/ms同时测定虾中的cap、tap和ff

7、。均质后的样品采纳碱化乙酸乙酯提取，浓缩提取物经去除脂肪、c18固相萃取柱净化后，采纳lc-ms/ms检测。办法lod为：cap和ffo.01ng/g，tap 0.05ng/g；在添加浓度0.12.0ng/g范围内，cap回收率为73.9%96.0%，tap为78.6%99.5%，ff为74.9%103.7%，rsd均小于6.4%。 b.水溶液提取 纯水可以用来提取动物基质中的caps。aerts等报道了多个试验室检测cap的协同讨论。动物肌肉经匀浆后加适量水提取后，再过c8或c18固相萃取柱净化，hplc-紫外检测器(uvd)在278nm检测。办法lod为1.5ug/kg；在添加浓度为10u

8、g/kg时，不同试验室的平均回收率为55.1%，变异系数(cv)为18.0%，满足不同试验室分析cap残留的要求。但该法回收率不高，可能是水不适合于提取组织里的caps药物。fernandez-torres等在水中采纳酶探针结合超声波辅助提取(uae)鱼肉和蚌中包括cap、tap在内的11种抗生素及其5种代谢物。对影响提取效率的因素，如酶种类、提取溶剂的种类、超声波的强度与时光等举行了优化，当用5ml水提取，超生5min时，效果最佳。提取物用二氯甲烷净化后，hplc测定。办法技术指标满足残留分析要求。该讨论小组又开发了酶探针结合微波辅助提取(mae)鱼肉和蚌中包括cap、tap在内的11种抗生

9、素及其5种代谢物的办法。当用5ml水，50w微波提取5min时，效果最佳。提取物用二氯甲烷净化后，lc-ms测定。办法回收率在70%100%之间。 也有采纳磷酸、磷酸盐缓冲液、醋酸缓冲液、mcllvaine缓冲液等来提取caps。rocha siqueira等用磷酸提取鸡蛋、虾、鱼、鸡、猪、牛肉中的cap，再用乙酸乙酯反萃取，lc-ms/ms检测。办法回收率在85%120%之间，rsd小于20%，loq为0.1ug/kg。santos等用ph 6.00.1 mol/l的磷酸缓冲液提取虹鳟鱼中的cap，离心后，用正已烷除脂，乙酸乙酯反萃取，蒸干提取液后，用水复溶，c18柱净化，lc-ms/ms测

10、定，办法cca为0.267ug/kg。 ramos等用ph7.0的磷酸缓冲液提取虾组织中的cap，c18固相萃取柱净化，lc-ms测定。办法回收率为101%110%，日间cv小于7.1%；cca为0.02ng/g，loq为0.2ng/g。谢孟峡等对鸡肉、猪肉、猪肝、鸭肝等动物组织样品中的cap残留检测办法举行了讨论。用乙酸乙酯和磷酸盐缓冲溶液提取，用硅胶和c18固相萃取柱净化，经衍生化后用气相色谱-质谱(gc-ms)测定。该办法的加标回收率在80%100%之间，rsd小于20%，办法lod为0.1ug/kg verzegnassi等采纳醋酸缓冲液稀释蜂蜜样品，经固相萃取净化后，lc-ms/ms测定。在0.1ug/kg、0.2ug/kg、0.5ug/kg添加水平，cap的精确度优于15%，重复性和重临性分离为12%和18%；cca和cc均优于0.1ug/kg。wang等用 mellvaine缓冲液-甲醇(8+2，v/v)提取牛奶中的cap、tap等10种抗生素，固相萃取柱净化后，uplc测定。在0.1ug/g、0.5ug/g、2.5ug/g添加水平，办法回收率分离为52.1%68.0%、70.1%81.0%和76.2%101.0%，l