试验显微镜下的生命世界基础生物学试验安徽大学研究生复试用生物生命科学剖析

1、实验一 显微镜下的生命世界一、实验目的 1了解普通光学显微镜的构造和各部分的性能，学习并掌握正确的使用方 法及维护方法。2了解真核细胞的各种形态，及形态与机能的关系，理解细胞是生命体结 构与生命活动的基本单位。3了解真核细胞与原核细胞，动物细胞与植物细胞结构的异同点。 4在显微镜下观察水中的各种微小生物，认识常见的细菌和真菌，进一步 认识生命的多样性。5学习临时装片方法、 某些细胞器的活体染色方法和细菌的一般染色方法。 6了解生物绘图的意义和方法，初步学习生物绘图技术二、实验原理 生命的存在具有多层次性。从宏观角度，在个体水平上，千姿万态的动、植 物强烈表现出的生命多样性，使整个大自然显得生机

2、盎然、绚丽多彩。然而，随 着显微镜的发明和显微技术的发展， 当人们进入生命的显微世界后， 不仅看到了 肉眼所不能观察到的形形色色单细胞生物和低等多细胞生物， 而且越来越深刻地 认识到所有宏观生物都是多细胞生物， 细胞是除病毒以外所有生命体结构与生命 活动的基本单位，同时，细胞自身又是多层次的复杂结构体系。生物细胞可分为原核细胞和真核细胞两大类。 原核细胞由细胞膜、 细胞质和 核物质等部分组成， 不具有典型的细胞核结构及多种细胞器， 如细菌细胞。 真核 细胞由原核细胞进化而来， 其内部结构与机能更复杂和多层次化。 在结构上， 真 核细胞突出表现为以膜系统的分化为基础， 形成了有膜包围的典型细胞核

3、和结构 与功能更专一的多种细胞器，如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、叶绿体及 液泡等。并且，构成真核生物的真核细胞种类繁多，形态各异，其形态的多样性 又与机能密切联系。在显微镜下观察生命世界， 使人们进一步认识到生命的多样性、 层次性和整 体性，进一步认识细胞的结构，以及形态结构与机能的关系。细胞内的结构在自然状态下近于无色， 一般要经过染色后方可在普通光学显 微镜下显示得较清楚。 不同的细胞组分对各种染料的亲和力不同。 两者间亲和力 强，染色就深，否则，染色就浅或无， 这样便能形成足够的反差以区分细胞组分。 一般生物染料不能穿透细胞膜， 只有用化学试剂或热固定细胞， 破坏细胞膜结构 后，染

4、料才能进入细胞内部发挥其染色作用。 有些染色剂对细胞无毒或毒性很小， 并能进入活细胞内染色， 显示活细胞的某些结构， 称活体染色， 活体染色分体内 活染和离体活组织染色两种。 体内活染是使染料进入生物体内进行染色， 离体活 组织染色是对离体但仍保持生活状态的活细胞进行染色。三、实验材料 人口腔黏膜细胞、 新鲜菠菜叶、洋葱鳞茎、颤藻和池塘水； 酿酒酵母菌悬液、 枯草芽孢杆菌斜面、 金黄色葡萄球菌斜面、 放线菌培养物、 根霉培养物和平菇斜 面；生霉的面包或馒头、橘皮。各种动植物组织器官切片标本、细菌三型制片标本、青霉素制片标本及酵母 菌制片标本。四、实验器材与试剂(一) 器材普通光学显微镜、放大镜

5、、解剖器械、接种环、消毒牙签、载玻片、盖玻片、 吸水纸、擦镜纸和酒精灯。(二) 试剂醋酸洋红染液、0.1 mol/L稀碘液、0.1%碱性湖蓝BB中性红詹纳斯绿染 液、乳酸石炭酸棉蓝染色液、石炭酸复红染色液、 0.1%美蓝染色液、50%乙醇、 香柏油、二甲苯和0.85%生理盐水。五、实验操作I光学显微镜的使用(一)光学显微镜的构造显微镜的种类繁多，结构也很复杂，但是无论哪一种显微镜，按其结构特点 分可分为机械装置和光学系统两大部分(图1-1)。1 机械装置显微镜的机械装置是由精密而牢固的零件组成，主要包括镜座、镜臂、载 物台、镜筒、物镜转换器和调焦装置等。图错误！未定义书签。-1显微镜的外形(1

6、) 镜座 是显微镜的基座，用以支持整个镜体的平稳。(2) 镜臂 镜臂的作用是支持镜筒、载物台、聚光器和调焦装置等。(3) 载物台 是镜臂基部的一个方形或圆形，放置玻片标本的平台。台中央有一个通光孔。台上有的装有标本片夹，有的装有附标尺的标本移动器，游标尺 可用来测量标本的大小和标记被检部分。 镜筒 是显微镜上部圆形中空的长筒。上端放置目镜，下端连接物镜转 换器。其作用是保护成象的光路与亮度。(5) 物镜转换器 固着在镜筒的下端，可以左右自由转动，有34个螺旋圆 孔，为安装物镜的部位。当旋转转换器时，即可把所需要倍数物镜固定在使用的 位置上，使物镜与目镜的光线合轴。(6) 调焦装置 为了得到清晰

7、的物象，必须调节物镜与标本之间的距离。使它 与物镜的工作距离相等，这种操作叫调焦。在镜臂两侧有大小调焦螺旋各一对， 旋转时可使镜筒上升或下降。大的一对是粗调焦手轮，调动镜筒的升降距离大，旋转一周可使镜筒移动2厘米左右，小的一对是微调焦手轮，调动镜筒距离小， 旋转一周可使镜筒移动约0.10.2毫米。(7) 聚光器调节螺旋在镜柱的左侧或右侧，旋转它时可使聚光器上下移动， 借以调节光线，但简单的显微镜没有这种装置。(8) 倾斜关节 为连接镜柱与镜臂的关节，可使镜体在一定范围内后倾便于 观察，但复杂的显微镜没有这种装置。2 光学系统 显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置。(1) 接目镜 装于镜

8、筒上端，放大倍数通常有5X、10X、16X等几种，一般 常用10X。(2) 接物镜 装于镜筒下端的物镜转换器上，通常有10X、40X、100X (油浸物镜)等几种。物镜和目镜配合所取的乘积。如下表 1-1表1-1物镜和目镜配合所取的乘积为放大倍数放大目镜 倍数 物镜5X10X16X10X50 X100X160X40 X200X400 X640 X注：“X”代表倍数(3) 聚光器 位于载物台下面，由集光镜(一组透镜)和虹彩光圈组成。是集 聚由反光镜反射来的光线，可以调节高低而得到强度不同的光线。 光圈：位于聚 光器中央，由许多铜片组成，有一操纵柄，可用铜片分开或聚合而使光圈放大或 缩小，以便控制

9、透入的光线，所以根据光线的强弱不同，适当调节光圈，以增加物象清晰度度。(4) 照明装置 主要包括反光镜(或内置光源)反光镜为聚光镜下面的一双 面镜，镜分平凹两面，可以任意方向转动，其功能是将光源射来的光线，反射到聚光器，再射出镜筒，平面反射平行光线宜在强光下用， 凹面反射集中成束的光 线，宜于弱光下使用。(二)光学显微镜的使用方法1 安装 根据实验需要装配适当的物镜和目镜，调节聚光器的光栏，使数 值孔径等于物镜的数值孔径。2 低倍镜的使用 总的原则是“先低倍，后高倍；先接近，后渐离”。“先 低倍，后高倍”具体指观察任何标本，都必须先用低倍镜，因低倍镜的视野大， 容易发现目标和确定观察部位。先用

10、低倍镜找到清晰物像后，用手移动转换器， 直接换高倍镜即可。“先接近，后渐离”具体指将观察标本放置在载物台上，转动粗调螺旋使低倍镜镜头与玻片标本的间距很小，边观察边用粗调螺旋慢慢升起镜筒(或下降载物台)，直至物像出现后再用细调螺旋调节到物像清楚为止。具体步骤如下：(1) 检查 右手握镜臂，从镜箱内取出显微镜，左手托镜座，轻轻放在实验 桌上。先检查一下显微镜备部件有无损坏， 如发现有损坏或性能不良者， 立即报 告教师请求处理。(2) 准备 将显微镜放于前方略偏左侧， 必要时使镜筒倾斜 ( 有的显微镜本身 已经倾斜 )以便观察。转动粗调节钮， 将镜筒略升高使物镜与载物台距离略拉开。 再旋转物镜转换器

11、，将低倍镜对准载物台中央的通光孔(可听到“咔哒”声 ) 。(3) 对光 打开光圈，上升聚光器，双眼同时睁开，以左眼向目镜内观察， 同时调节反光镜的方向， 直到视野内光线明亮均匀为止。 反光镜的平面镜易把其 他景物映入视野，一般用凹面镜对光；用内置光源时，使用光亮调节器调光。(4) 放标本片 标本片的盖片朝上，将标本片放到载物台前方，然后推到物 镜下面，用压片夹压住，如有标本移动器，可用上面的弹簧夹夹住标本片，然后 把要观察的部分移到通光孔的正中央。(5) 调节焦距 总的原则是“先接近，后渐离”。先接近：从显微镜侧面注 视物镜镜头， 同时旋转粗调节钮， 使镜筒缓慢下降 (或载物台缓慢上升 )，大

12、约低 倍镜头与玻片间的距离约5mm寸。后渐离：再用左眼从目镜里观察视野，左手慢 慢转动粗调节钮， 使镜筒缓缓上升 (或载物台缓慢下降 )，使低倍镜头与玻片间的 距离逐渐增大，在这过程中，直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰，可转 动细调节钮，使物像更加清晰。(6) 计算倍数 由所用的目镜放大倍数跟物镜放大倍数相乘，就能算出物象 比原物的放大倍数。例如，5X的目镜和10X的物镜所放大的物象，是原物的 5 X 10倍，即50倍。如果物象不在视野中央，就得一面观察，一面用手移动玻片。 选择一个适当的部分移至视野的中央。 镜中所成的象是倒象。 玻片移动方向跟物 象移动方向刚巧相反。如果按上述操作步骤

13、仍看不到物像时，可能由以下原因造成。(1) 转动调节钮太快，超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距。(2) 物镜没有对正，应对正后再观察。(3) 标本没有放到视野内，应移动标本片寻找观察对象。(4) 光线太强，尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时，易出现这 种现象，应将光线调暗一些后，再观察。3高倍镜的用法(1) 依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。(2) 将需要观察的部分移到视野的中央。(3) 眼睛从侧面注视物镜，用手移动转换器，换高倍镜。(4) 眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调节钮，直至视野内看到清晰 的物像为止。如按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成。(1) 观察的

14、部分不在视野内，应在低倍镜下寻找到后，移到视野中央，再换 高倍镜观察。(2) 标本片放反了，应把标本片放正后，再按上述步骤操作。(3) 焦距没调好，应仔细调节焦距。 注意：有的显微镜高倍镜与低倍镜不配套，从低倍镜转换高倍镜时，往往转不过来或撞坏标本， 如遇到这种情况， 可把镜筒略升高 (或载物台下降 ) ，直接 用高倍镜调焦。方法是：从侧面注视物镜，调节粗调节钮，使高倍镜头下降至与 标本片最短距离，再观察目镜视野，慢慢调节细调节钮，使镜头缓缓上升，直至 物像清晰为止。如需要更换标本片时，应该先把镜筒升高 （ 或载物台下降 ） ，然后把标本片移 到载物台前方，再取下。4油镜的使用方法（1）先用低

15、倍物镜观察标本的概况。（2）更换高倍物镜，把所要观察的部分移在视野中央。（3）把镜筒上升约 1.5 cm ，再把油镜转到工作位置。（4）在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油，细心拧动粗调螺旋，使镜 筒慢慢下降 （ 或载物台慢慢上升 ） 。这时要从侧面仔细观察物镜前端与标本之间的 距离，先使物镜前端与油滴接触， 然后再慢慢下降镜筒 （ 或慢慢上升载物台 ） ，至 物镜前端接近而没有碰到盖玻片为止。 这步操作要特别小心， 防止油镜压碎标本 或损坏油镜 （ 油镜的工作距离约 0.2 mm） 。（5）眼睛从目镜中观察，拧动细调螺旋，使镜筒慢慢上升 （ 或载物台慢慢下降 ） 到能看清标本。这步操作要特

16、别注意不要把细调螺旋的方向拧错， 以防压碎标本。（6）观察完毕后，提升镜筒（或下降载物台）约1 cm把油镜转离光轴，及时做清洁工作。先用干的擦镜纸擦 12次，把大部分油去掉，再用二甲苯滴湿的 擦镜纸擦 2 次，最后再用擦镜纸擦 1 次。擦拭时要顺镜头的直径方向， 不要沿镜 头的圆周擦。擦拭要细心，动作要轻，不可用力擦，如果聚光器上有油滴也要同 样清洁。载玻片上的油可用“拉纸法”擦净，即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴 上，在纸上滴一些二甲苯，趁湿把纸往外拉，这样连续作34次，即可干净。（7）复原 把聚光器下降约1 cm,把物镜转离光轴，使镜筒下端正好对在两 个物镜之间。 下降镜筒或载物台至原来位置

17、， 把载物台上的标本移动器移到适当 位置，把反光镜转到垂直方向 （或关闭内置光源开关 ）。n细胞的形态结构（一）真核细胞形态的观察 （示范）（图 1-2） 显微镜下观察各种动植物组织器官切片标本， 了解不同组织细胞的形态特征以及与其功能的关系。1人血涂片 观察成熟的红细胞、 各类白细胞形态。 人的成熟红细胞形态如 何，该特征与其携带Q和CQ的机能有何联系。2平滑肌切片 观察动物平滑肌细胞形态结构特征， 该特征与其收缩机能联 系如何?3小肠横切片 观察小肠壁内表面单层柱状上皮细胞形态结构特征， 该特征 与其吸收机能有何联系。4兔脊髓横切片 观察脊髓灰质前角运动神经元， 试述神经元胞突适应接受 刺

18、激和传导神经冲动的形态特征。5小白菜下表皮平铺片 观察表皮细胞的形态及表皮上两个肾形保卫细胞围 成的气孔，想想叶表皮气孔与蒸腾作用、气体出入机能的关系。（二）动物细胞的结构小就柿f图1-2形状不同的细胞 （引自吴敏，2001）1 口腔黏膜细胞涂片标本的制备与观察（1）人口腔黏膜细胞涂片标本的制备吸取醋酸洋红（或碘液）滴一滴在一干净载玻片中央，将消毒牙签粗的一端伸入口腔，在口腔颊内壁上轻轻刮取黏膜上 皮细胞，将刮下的白色粘性物质放入载玻片上的染液内，分散均匀。染色1030 min后，加盖盖玻片，即用镊子夹取盖玻片的一侧，将另一侧边缘先接触载 玻片上染液，然后将整块盖玻片慢慢盖上，注意两玻片之间不

19、要有气泡。若盖玻 片周围的染液过多，可用吸水纸吸去盖玻片边缘多余的染液。 观察 将以上制备的标本片置显微镜载物台上，有盖玻片的一面向上。用 标本移动器的卡片卡紧，并转动标本移动器的螺旋，移动标本片，使待观察的材 料处于物镜正下方。在低倍镜下，可见人口腔黏膜上皮细胞呈扁圆形或扁平多边 形。再寻找较分散、轮廓清晰的单个细胞，移至视野中央转高倍镜观察。高倍镜 下可见细胞外仅有一大致可辨的细胞界限，即细胞膜。细胞核扁圆形呈鲜红色（如 用碘液染则为深黄色），位于细胞中央或近中央，细胞质浅红色（或浅黄色）。2.人口腔黏膜细胞线粒体活体标本的制备和观察取34滴中性红詹纳斯绿染液于一干净载玻片中央。用消毒牙签

20、刮取口腔颊黏膜细胞，用力稍重点， 以获得生活力较旺盛的细胞。将刮取物置于载玻片上的染液中， 混匀，盖上盖玻 片。23 min后置显微镜下观察。先低倍镜后高倍镜观察，在高倍镜下可见颊黏膜细胞的细胞质中，散在一些 被染成亮绿色的短杆状和圆形颗粒，即为线粒体。（三）植物细胞的结构1. 洋葱鳞片表皮细胞临时装片标本的制备与观察（1）临时装片的制备取一干净载玻片，滴一滴碘液在玻片中央。用尖头镊子从洋葱肉质鳞片内表面撕下一小块膜质表皮，平铺在载玻片的碘液滴上，用解剖针将其轻轻压人液滴中，使之展开，盖上盖玻片（操作同上）。用吸水纸吸去盖玻 片周围多余的碘液。（2）观察将制备好的装片标本置显微镜下观察。先用低

21、倍镜观察，可见许多长柱状细胞排列整齐，彼此相连。选择其中一个较典型的细胞移至视野中央，再 转高倍镜观察。在高倍镜下可见细胞最外面为一层棕黄色较厚的结构，即细胞壁。细胞壁以 内是着色较浅、近于透明的细胞质。细胞质内有一个或几个、或大或小的透明的液泡，在细胞中央或靠近细胞壁，有一个椭圆形细胞核。调节细调螺旋，可见核 内有12个染成棕黄色、折光较强的核仁。细胞质外围有一薄层细胞质膜，但 在光镜下不易分辨。2. 菠菜叶肉细胞叶绿体的观察 取一新鲜菠菜叶片，用镊子撕去一小块下表 皮，用小刀轻轻刮取表皮以内的叶肉细胞，置于载玻片的水滴中，分散均匀，盖 上盖玻片9成菠菜叶肉细胞临时装片标本。 将所制标本装片

22、置显微镜下，先用 低倍镜再转高倍镜观察，注意叶肉细胞内叶绿体的形态和数目。（四）原核细胞的结构1. 制备临时装片取新鲜颤藻，用解剖针挑少许丝状体，置载玻片上的水滴 中，使藻丝分散后，用吸水纸将水吸去。再加一滴 0.1%1 勺碱性湖蓝BB溶液，染 色12 min，盖上盖玻片。2. 观察将所制装片置低倍镜下观察，可见颤藻的藻丝由单列细胞组成，细胞呈短圆柱状或盘状，藻丝顶端细胞呈帽状。选择其中较清晰的细胞，转高倍镜 观察。可清楚地看到细胞内呈深蓝色的中央体， 在细胞壁以内，中央体四周未着 色的是周质。川一滴池塘水中的微小生物生命科学是实验科学，同时也是发现科学。我们知道水是无色、无味、透明 的液体。

23、但有的水体，特别是富营养化的水体往往呈现蓝绿色、红色等颜色，而 且发出很臭的气味，水体含有害物质，不能饮用，这是什么原因造成的？天然情 况下，江河湖泊等大型水体生物物种丰富， 鱼类为什么不断长大呢？通过本次实 验，我们就有所理解，有所收获。一滴池塘水中含有众多的微小生命， 它们大多因个体微小而无法用肉眼判明 正身，必须借助显微镜才能观察清楚。镜下可见，水中微小生物种类繁多（图 1-12,13,14 ），或单细胞植物和动物，或低等多细胞生物。它们是水生生物的重 要组分，也是池塘生态系统食物链的重要一环。（一'）制备临时装片用浮游网到池塘采集水生生物，分成两份。可将样品分装两瓶，1瓶按10

24、0毫升样品加入1.5毫升鲁哥氏液的比例进行固定（鲁哥氏液6 g碘化钾溶于20 mL 水中，溶解后加入4g碘，充分摇动待碘完全溶解后再加 80 mL水，溶液即配制 完成）。另1瓶不固定，采样后立即观察（一般不能过夜，因为时间延长，藻类 植物越来越少，浮游动物种类也越来越少，但优势种明显，而且个体越来越大）。用滴管吸取池塘水水样一滴于载玻片中央， 慢慢盖下盖玻片，制成临时装片， 置显微镜下观察。学生贯彻两种方法获得的水样，结果有何不同。（二）池塘水中的藻类植物1. 兰藻门（1）颤藻属（Oscillatoria ）（图 1-3）植物体为不分枝单列细胞的丝状体，每个细胞如圆筒形丝状 外有一极薄不易看到

25、的胶鞘，注意丝体能否前后伸缩和左右摆动 的现象，图1-3颤藻在丝体上常出现死细胞，死细胞呈双凹形，将丝体分为几段，每一段为一藻 殖段（连锁体），藻殖段可长成新丝体。(2) 螺旋藻属(Spirulina )(图 1-4)图1-4螺旋藻单细胞，或多细胞组成丝体，无鞘；圆柱形， 呈疏松或紧密而有规则的螺旋状弯曲。细胞或藻丝 顶部常不尖细，横壁常不明显，不收缢或收缢，顶 细胞圆形，外壁不增厚。（3）念珠藻属（Nostoc）（图 1-5）念珠藻为球状或片状的胶质群体，呈兰绿色或兰黑色。显微镜下观察：看到 在胶质内埋有许多条细胞圆形如珠，连成弯曲的藻类。在藻丝上除营养细胞外, 尚有异形胞。异形胞的内含物较

26、均匀透明，易识别，两个异形胞之间藻丝，叫藻 殖段。（4）鱼腥藻属（Anabaena ）（图 1-6，7）植物体为单一丝状，或不定形胶质块，或柔软膜状。藻丝等宽或末端尖细，直或不规则地螺旋状弯曲。细胞球形，桶形。抱子1个或几个成串，紧靠异形胞或位于异形胞之间。图1-7鱼腥藻图1-5念珠藻属（2）衣藻属（图1-13）图1-8空球藻图1-6鱼腥藻属2绿藻门（1）小球藻属 为淡水中最常见的单细胞藻类。在低倍视野中，它们像绿色 的小点单独或群聚成团。换高倍镜观察，小球藻为圆形或略椭圆形，细胞内有 个杯形载色体。也是常见单细胞藻类。先低倍镜后高倍镜观察，可 见有些细胞呈卵形、椭圆形或呈圆形，细胞壁较厚，

27、胞内也存在载色体。与小球藻最大的不同是其体前 端有两根鞭毛，能游动，此即为衣藻。（3）空球藻属（图1-8）群体球形或卵形，由16、32、64（常为32）个细 胞组成，群体细胞彼此分离，排列在群体胶被的周 边，群体胶被表面平滑或具胶质小刺，个体胶被彼 此溶合。细胞球形，壁薄，前端向群体外侧，中央图1-9单突盘星藻图1-10双突盘星藻具2条等长的鞭毛， 基部具2个伸缩泡。 色素体杯状，仅I个 种色素体为长线状， 具1个或数个蛋白 核。眼点位于细胞前 端。（4）盘星藻属 （图 1-9，10）植物体盘状，星状，浮游，由 2128个细胞排列成为一层细胞厚的定形群 体，群体完整无孔或具穿孔，边缘细胞常具

28、1、2或4个突起，有时突起上具长 的胶质毛丛，群体内部细胞多角形，无突起。细胞壁平滑无花纹，或具颗粒或细 网纹。幼小细胞的色素体周生，圆盘状，具 1个蛋白核，随细胞成长而扩散，具 多个蛋白核。成熟细胞具I、2、4或8个细胞核。（5）水绵属（图1-11）取水绵少许，放置于玻片水滴中，盖上盖玻片，置于显微镜下观察。植物体是由长筒形细胞连成的不分枝的丝状体，每个细胞内有一和或数条呈 带状的色素体，作螺旋形绕于原生质体外围，上有一列淀粉核。细胞核由原生质 连络丝将其与周围的原生质连着，细胞中有一大液泡。取水绵接合生殖制片，观察水绵接合生殖情况。（示范）梯形接合CD减数分裂图i-ii水绵属的生活史睡泡侧

29、面援合3硅藻门（图1-12 ）在显微镜的低倍视野中还可以看到一类形状比较特殊的单细胞藻类-硅藻,它们的形状多样，有圆形，新月形，弓形或其他形状，但细胞壁是由两个瓣片套 合而成，转高倍镜观察，可见瓣面上有花纹。硅藻在海水尤其是淡水中分布普遍， 是鱼类和很多其他水生动物的食料， 硅藻死亡后，其细胞壁形成的硅藻土有多种 工业用途。图1-12池水中的部分硅藻（三）池水中的微小动物（图1-13,14 ）1. 绿眼虫 眼虫是单细胞生物。在低倍镜下观察，可看到许多绿色游动的小 虫子，这是眼虫。找到一个游动缓慢的眼虫，移至高倍镜下观察，眼虫的前端钝 圆，后端尖削，虫体前端有一个红色的眼点，细胞内有许多绿色的椭

30、圆形小体一 叶绿体，所以身体呈绿色，因为这两个特征称为绿眼虫。将光线调节暗些，可 看见虫体的前端有一根鞭毛，在不停地摆动，从而带动身体运动。世虫AWMik住虫图1-13池水中的部分微小生物（引自吴敏，2001）2. 喇叭虫 在低倍镜下移动装片，寻找单细胞动物喇叭虫。其虫体可伸缩， 伸展时，体呈喇叭形；体表具成行的纤毛，口围有一圈口缘小膜带，顺时针旋至 口旁。多数种类的大核呈念珠状或长棒状；小核多个，极小。3. 钟虫 在低倍镜下继续寻找钟虫。钟虫形体似倒置的钟，钟口即口缘有纤 毛，纤毛不停地快速摆动，虫体其他部分无纤毛。反口端有一柄，以柄附于水草 或其他物体上，轻触载玻片，可见柄能伸缩。钟虫是单

31、细胞动物。4. 大草履虫在低倍视野中，继续寻找较眼虫稍大的单细胞动物一一大草履 虫。草履虫一般运动迅速，为了限制草履虫的游动以便观察，制作装片时，将少 许棉花撕松，铺在载玻片上，滴一滴池塘水，盖好盖玻片。如果草履虫继续运动 迅速，可将吸水纸放在盖玻片的一侧吸去部分水 （注意不要吸干）再进行观察。在低倍镜下可见虫体酷似倒置的草鞋底。将光线调暗一些，可看到虫体满覆 纤毛，时时在摆动。5. 轮虫 轮虫是体型极小的多细胞动物。在低倍镜下观察，虫体前端轮盘 状，沿轮盘边缘丛生着纤毛，纤毛不停地摆动，使虫体运动。身体中部即躯干部 膨大，其内是内脏。躯干部向后渐削细，为足部。调节标本移动器，将轮虫的足 部移

32、至视野中央，其足末端细细的趾附着于玻片或其他物体上。图 1-14 池水中的部分微小动物IV常见的细菌和真菌细菌属原核生物，一般直径在1 im（10-6m）左右，需借助显微镜来观察，细菌形态千差万别，但基本形态可分为球状、杆状和螺旋状三种（图1-15a）。丝状原核生物放线菌由分支发达的菌丝组成，根据菌丝的形态和功能又可分为营养菌 丝（基内菌丝、基质菌丝）、气生菌丝和抱子丝三种 第一部分观察性实验（图 1-15b）。霉菌、酵母菌以及蘑菇等均是真菌，属真核生物。霉菌菌体由菌丝构成，菌 丝管状，直径约210旳 在固体培养基上，部分菌丝伸入培养基内吸收养料， 称为营养菌丝；另一部分则向空中生长，称为气生

33、菌丝，有的气生菌丝发育到一 定阶段，分化为繁殖菌丝（图1-15c）。酵母菌是一类单细胞的真核微生物，一般 呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形（图1-15d）。大小约（15） ymX （530）/ m 最长可达100 pm蘑菇是大型真菌（图1-15e）。bc图1-15常见的细菌和真菌（引自吴敏，2001）a.细菌的基本形态 b.放线菌c.霉菌d.酵母e.蘑菇（一）细菌类1. 观察细菌三型制片标本 先在低倍镜下找到待观察的样品区域，并用标本 移动器将其移至视野中央，然后，将低倍镜移开，在待观察的样品区域滴一滴香 柏油，再用油镜观察。注意识别细菌的球状、杆状和螺旋状三种形态，在细菌细 胞中可以观察到明显

34、的细胞核吗？观察完毕，清洁油镜头。2. 活菌形态观察（示范）取两块载玻片各滴一滴生理盐水，用牙签分别挑取 少量枯草芽抱杆菌和金黄色葡萄球菌培养物， 涂匀，盖上盖玻片，用相差显微镜 观察。3. 采用印片法观察放线菌形态（1）取样用解剖刀将平板上的菌连同培养基切下一小块，菌面朝上放在一载 玻片上。（2）印迹 取另一洁净载玻片置酒精灯火焰上微热后，盖在菌上，轻轻按压， 使培养物（气丝、抱子丝或抱子）粘附（“印”）在该载玻片的中央。（3）固定 取下已印迹载玻片，有印迹的一面朝上，通过微火23次固定，此时用手摸载玻片反面，以不烫手为宜。染色将印迹载玻片置水平位置，滴加石炭酸复红染液覆盖印迹，染色约1 m

35、in。（5）水洗 倾去印迹载玻片上的染液，斜置载玻片，用自来水的细水流从载玻 片上端流下（水流不得直接冲在印迹上），直至从载玻片上流下的水元染液颜色为 止。（6）干燥 印迹载玻片自然晾干或用吸水纸轻轻吸干（注意不要擦掉印迹）。（7）观察待载玻片完全干燥后，依次在低倍镜、高倍镜下观察，并将典型部 位移至视野中央，再用油镜观察。可见菌丝分为营养菌丝和气生菌丝， 气生菌丝 进一步分化产生抱子丝和抱子，气生菌丝在上层，色暗；基内菌丝在下层，较透明。观察完毕，清洁油镜头。(二)真菌类1霉菌(1) 取青霉菌制片标本在低倍镜下观察其形态特征。(2) 用放大镜观察生霉的面包或馒头和橘皮上霉菌的自然生长情况，可

36、见有 一些青灰色的细毛状物，此为青霉的菌丝体；白色绒毛状的则为匍枝根霉( 面包霉)的菌丝体。(3) 染色镜检 取两块载玻片，各滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针 分别从两种霉斑边缘处，挑取少量菌丝，先于 50%乙醇中浸一下，再分别放在两 块载玻片上的染液中，用解剖针将菌丝分开。盖上盖玻片，置低倍镜下观察，必 要时换高倍镜观察。注意比较青霉和根霉的形态特征。2酵母菌(1) 取酵母菌制片标本，观察酵母菌形态及芽细胞。(2)观察酵母细胞在载玻片中央加12滴0.1%美蓝染色液，用接种环取少许 酵母菌悬液于染液中混匀，盖上盖玻片。染色 23 min后镜检。先用低倍镜再 用高倍镜观察， 注意酵母菌的形态和出芽情况 (酵母菌可行出芽生殖 )。此外，用 美蓝染色液还可以区分细胞的死活。 其中染上蓝色的为死细胞， 无色的为活细胞。3蘑菇在蘑菇的生长过程中， 要经历行营养机能的营养菌丝和行有性繁殖的繁殖体( 也是由