考点1：微生物的实验室培养1

1、Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 1一、学习目标：一、学习目标：了解有关培养基和无菌技术的基础知识二、学习导航二、学习导航：自主学习自主学习（一）（一） 、微生物类群：、微生物类群：微生物是指自然界那些形态微小，结构简单，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。包括没有细胞结构的_、原核生物界、真菌界和原生生物界。（二）（二） 、微生物培养基：、微生物培养基：1、概念：培养基是指人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其_的营养基质。2、成分：在配制培养基时，一般都含有_、_、碳源（提供碳元素的物质，可分为无

2、机碳源，如_和有机碳源，如_、花生粉饼、石油等）和氮源（提供氮元素的物质,如 N2、氨、铵盐、硝酸盐等、尿素、牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等） ，此外，培养基还需要满足微生物对_、特殊营养物质以及_的需求。3、种类：分类依据分类特点作用_ _培养基 加大量琼脂，呈固态微生物的分离和计数等半固体培养基加少量琼脂，容器放倒不致流出，剧烈震荡则破散观察微生物的运动，鉴定菌种等物理性质_ _培养基不加琼脂，呈液体常用于_ _培养基在一般培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长_菌种,如青霉素分离出酵母菌和霉菌；高浓度食盐可选择出金黄色葡萄球菌用途鉴别培养基在一般

3、培养基中加入某种_或化学药品，以鉴别不同种类的微生物 _菌种，如伊红和美蓝遇大肠杆菌呈深紫色，略带金属光泽合成培养基化学成分_分类和鉴定等化学成分天然培养基由_配制而成，化学成分不明确用于工业生产（三）（三） 、无菌技术、无菌技术1 1、概念：、概念：指在培养微生物的操作中，所有_ _ 的方法。2、获得纯净培养物的关键是 。3、 分类：在操作中需要进行消毒和灭菌处理，消毒是指使用温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部_对人体有害的微生物（不包括_和_） 。常用的消毒方法有：煮沸消毒法 _ _、 和_ _。灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外_微生物（包括_和_）常用的灭菌方法有 _ _、

4、和_ _。合作探究合作探究Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 21、 培养基中一般都含有哪些成分，结合细胞中元素组成的知识，讨论为什么大多数培养基中都含有这四类物质？2、 消毒和灭菌的区别（阅读教材填充表格）项目概念常用方法应用范围煮沸消毒法：在 100下煮沸_min。一般物品_：70-75煮30min 或在 80下煮 15min。一些不耐高温的液体，如_化学药剂消毒法如用_擦拭双手、用_消毒水源等。消消毒毒消毒是指使用温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部_对人体有害的微生物（不包括_和_） 。_：30W 紫外线

5、灯照射 30min。_：用酒精灯火焰_：160-170下灭菌 1-2h。玻璃器皿、金属工具的灭菌灭灭菌菌灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外_微生物（包括_和_）_:121下灭菌 15-30min。三、典型例题：三、典型例题：例例 1 1：对硝化细菌的叙述正确的是（ ）含有核糖体不含叶绿体 含有 DNA 和 RNA，且 DNA 位于染色体上 因为它是需氧型生物所以含有线粒体 遗传不遵循基因的分离定律和自由组合定律 遗传中会发生基因突变 A. B. C. D.变式变式 1-11-1：下列关于不同生物各自特征的叙述，正确的是（ ） 酵母菌 乳酸菌 硝化细菌 衣藻 金鱼藻 烟草花叶病毒A都是原核生

6、物，且都能发生突变 B都不含叶绿素，且都是分解者C都是异养生物，且都能进行有氧呼吸 D都具有细胞结构，且都有细胞壁例例 2 2：右表是为培养某类微生物而配制的培养基的成分组 成，有关叙述正确的是（ ）A运用上述培养基可培养自养型微生物B该培养基从物理性质来看，属于固体培养基C运用此培养基也可以成功地进行病毒的培养D该培养基中 NH4HCO3只提供氮源变式变式 2-12-1：下列关于微生物营养的说法，正确的是（ ） 编号成分含量NH4HCO30.4gKH2PO44.0gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100mL维生素少量Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的

7、实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 3A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量C除水以外的无机物仅提供无机盐 D无机氮源也能提供能量变式变式 2-22-2：下表是有关 4 种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的概述。其中正确的是（ ）A根瘤菌、乳酸菌 B硝化细菌、酵母菌 C酵母菌、乳酸菌 D硝化细菌、根瘤菌例例 3 3：获得纯净培养物的关键是（ ） A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B接种纯种细菌 C适宜环境条件下培养 D防止外来杂菌的入侵变式变式 3-1：细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭

8、哪些部位的杂菌 ( )A接种针、手、培养基 B高压锅、手、接种针C培养基、手、接种针 D接种针、手、高压锅变式变式 3-2：（14 丰台期末）下列操作属于灭菌的方法的是：A、接种前用酒精棉球擦拭双手和工作台面 B、接种中试管口等易被污染的部位通过火焰C、牛奶在 80下煮 15min 以杀死其中的微生物D、氯化汞溶液浸泡外植体 1-2min 后无菌水冲洗四、反馈拓展：四、反馈拓展：1下列叙述错误的是A酵母菌有核膜，而固氮菌没有B酵母菌有细胞膜，而固氮菌没有C黑藻细胞有线粒体，蓝细菌则没有 D黑藻细胞有内质网，蓝细菌则没有2下列关于病毒的描述，正确的是A噬菌体通常在植物细胞中增殖 B病毒可作为基因

9、工程的运载体C青霉素可有效抑制流感病毒增殖 D癌症的发生于病毒感染完全无关3. 不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以 CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ） A氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D水是该微生物的营养要素之一4. 下列物质中，不能作为异养型微生物碳源的是（ ）A蛋白胨 B含碳有机物 C含碳无机物 D石油、花生粉饼5、有关培养基配制原则的表述正确的是A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、水和无机盐生物硝化细菌根瘤菌酵母菌乳酸菌能源氧化 NH3N2的固定分解糖类等有机物光能碳源C0

10、2糖类糖类糖类氮源NH3N2NH4+、NO3-尿素代谢类型自养需氧型异养需氧型异养兼性厌氧型自养需氧型Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 4B.碳源和氮源必须有一定比例，碳元素的含量最多，其次是氮元素C.微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 PH、氧和渗透压的影响D.营养物质的浓度越高越好6、甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培 养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在种正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）A.甲、乙、丙都是异养微生物 B.甲

11、、乙、丙都是自养微生物、丙是异养微生物C.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物D.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物7. 下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ）A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C.向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动8、下列常用的无菌操作中，错误的是 A用酒精擦拭双手 B用氯气消毒水源C实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭9、牛奶、吸管、接种环、培养基、空气灭菌的方式依次是 灼烧灭菌巴氏消毒干热灭菌紫外线

12、消毒高压蒸汽灭菌A B C D10、 下列是与微生物培养有关的问题，请回答：某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是_，碳源是_，氮源是_。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_培养基。按照化学成分分类，该培养基属于_培养基。从同化作用类 型上看，用该培养基培养的细菌属于_。11、请回答下列与大肠杆菌有关的问题：（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于 ； 它 的同化作用类型是 。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1 000 mL 根据用途划分

13、该培养基属于 培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是 。（3）培养大肠杆菌时，为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行 。（4）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入 。12 有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂0.2 g琼脂12.0 gSw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 5（1）在筛

14、选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为惟一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染12.恒化器是微生物连续培养时使用的大型容器，容器中一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验

15、室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 6人员将大肠杆菌 JA122 菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，在恒化器内连续培养 773 代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：（1）用于连续培养 JA122 大肠杆菌的培养基属于 。培养基中除了含葡萄糖作为 外，还应该含有 。（2）样品中共发现 CV101、CV103、CV116 三种新菌株，产生新菌株的原因是由于 JA122大肠杆菌发生了 导致的，产生三种不同类型的新菌株说明 。（3）下图表示将 CV101、CV103、CV116 三种新菌株混合在一起培养的生长情况，三者之间互为 关系，并保持稳定生长水平，没

16、有出现一个菌株生存而另外两种菌株灭绝的现象，说明它们已经具有了不同的适应能力，这是 的结果。（4）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103 对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101 可以在过滤的培养过 CV103 的培养基中生长，反过来 CV103 不能在过滤的培养过 CV101 的培养基中生长，据此作出的推测是： 。请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点。 配制 的培养基；将 CV101 和 CV103 菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。 预期实验结果： 三、反馈拓展三、反馈拓展四、反馈拓展：四、反馈拓展：。【答案】 （1）

17、稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染）（2）碳源 氮源（3）时间 水浴 滤去不溶物（4） （实验）对照2 2、将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入 37恒温箱的目的是 A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基是否被杂菌污染Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln 审核人：cln 7C没必要放入未接种的培养基 D为了下次接种时再使用例 2 海洋上的石油泄漏会对海洋造成污染。自然环境中假单孢杆菌能够分解石油，请回答下列问题：（1）假单孢杆菌同化作用类型是 ，属于生态系统成分的 。欲从自然环境中分离提纯假单孢杆菌，除了基础营养外

18、，可在培养基中必须加入石油，制成 培养基。（2）下面是某实验小组做的假单孢杆菌分离和计数的实验方案及结果，其中有 4 处明显错误,请指出并改正。a将溶化后的培养基倒平板备用。b将接种环放在酒精灯的火焰上灼烧后立即沾取一环菌液，然后，将培养皿皿盖轻轻放在桌面上，手拿培养皿，在火焰旁划平行线，盖上皿盖。c将接种过的培养皿倒置放入恒温箱内，在适应条件下培养一段时间并观察结果。d统计出三个培养皿中菌落的数目分别为 21、212 和 256，以这三个平板上菌落的平均值 163 作为统计结果。 （3）用假单孢杆菌进行实验后，所有用过的培养液、培养基等必须经过 处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散，污染环境。7、石油污染会造成某些生物的大量死亡或大量增加，引起生态系统的变化。运用生物修复技术已发展成高效、低成本、环境友好的污染治理方法，该方法主要是在污染地接种经驯化的高效微生物来提高生物降解污染物的速率。图 1 表示驯化降解石油成分菌株S25A1 的方法。图 2 为不同 N：P 对石油降解的影响。请回答： Sw-x1-2014-8 考点考点 1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养 1 执笔人：cln