2生物安全评估和管理

1、生物安全评估和管理2. 生物安全评估和管理在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部名录组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。实验室生物危害评估结果应由医院的法定代表人签字认可，并归档保存。生物安全负责人最终对实验室内的安全负责，其职责之一是指导现行工作以判断潜在的危害（生物安全评估）， 职责之二是实验开始前采用合适的安全程序（风险管理）特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。风险评估和风险管理的5 个“ P”

2、是指：Pathogen 病原体 危险的生物因子Procedures 规程 推荐的实验操作和安全的操作规范Personnel 人员 相应的培训与技能Protective equipment 防护设备 防护衣和安全设备Place 地点 实验室所在位置实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的5 个“P。” 正确地指导和风险评估能帮助免受生物危害的暴露，以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。2.1 风险评估和风险管理表风险评估风险管理病原体传染因子类型（见附录A）感染途径登记生物安全办公室感染性疾病发生过程病毒性、致病性、数量、浓度、人群 中影响程度、昆虫媒介的存在感染机构约束机构疾控中心

3、选择机构规程气溶胶风险：超声、离心、混匀、混合、振动经皮风险: 针头、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低温刀片/刀等飞溅/溅泼风险: 吸液管、接种环建立一套结合安全使用的标准操作规程遵守基本的生物安全规则实验室、工作区域、BSL-2 或更高传染因子实验室内的设备贴上标识指导实验室操作和检查实验设备用非传染性材料做尝试性试验，以测试新的规程/设备人员人员免疫赘生物疾病感染免疫抑制治疗年龄、种族、性别、妊娠手术（脾、胃切除）免疫力 后暴露预防 血清库 对安全的态度 安慰 外伤、破损皮肤、湿疹、皮炎安全培训以前从事生物危害的经历技术的熟练程度立即向生物安全负责人和生物安全办公室报告所有的暴露事件、被忽视

4、的事件以及相关疾病的症状调查/核实事件/飞溅等，以防止再次发生防护设备防护：气溶胶-可以吸入粒子直径<5 m飞溅/溅泼锐器个人防护设备（PPE）:口罩 HEPA, N-99, N-95, 等面部（眼、鼻、嘴）防护-面具和安全眼镜、或盖住下颌的面罩、前面无缝外衣或实验室外衣手套生物安全柜安全离心管/转子地点风险组/生物安全等级、设备气溶胶风险基本的实验室-门、易清洁的地方、冲眼器、窗户福州市传染病医院2 2受限制的过道标签用直接气流预防2.2 暴露途径生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤），当生物危害物进入人

5、体，它产生疾病还需满足其它条件，它们必须在人体细胞、组织和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。年龄、免疫状况、职业、物理或地理环境等因素会导致个体对疾病的不同易感性。在涉及生物危害时，确定其最低感染量是很困难的。同一病原体相同剂量在一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。暴露途径的更多信息见下图。生物安全评估和管理感染因子的传播途径M黏膜： ucous Membranes:Exposures to mucous membranes of the eyes, nos

6、e and mouth th通过飞溅或溅泼暴露rough splashes or spl眼、鼻、嘴atters. 里的黏膜In吞咽； gestion:Mouth pipetting, eating, d口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟rinking, smoking in the lab.Inhalation:吸入：Breathing in respirable sizeda吸入气溶胶粒子erosols (<5 m), (c直径entrif<u5gem), 离心leaks, spills, pipetting, etc.渗漏物、溢出物、吸液等经皮Perc:utaneous:Thro

7、ugh intact or non-intact被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、skin via needlestick, puncturewith contaminated sharp object, 动物叮咬、抓伤、湿疹animal scratch or bite, through wounds abrasions, or eczema.C接触 ontac(t间接传播 (indirect):transmission):Via mucous membranes or n通过接触污染面(如凳子、电话、电onintact skin from hands twh脑、设备把手等)的手来触摸黏膜或i

8、atht ha acvoentabmeeinnatiend csournftaaccet (i破损皮肤，或实验后洗手不彻底.e. benches, phones,福州市传染病医院2 4生物安全评估和管理2.2.1 实验室内传染因子的传播途径暴露途径防护措施黏膜：通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的黏膜通过以下方式进行面部的预防：戴护眼镜或面罩在生物安全柜内或保护罩后工作进行规范的微生物操作吸入：由于离心渗漏、溢出或产生气溶胶的操作如吸液、混匀等而吸入了可吸入的气溶胶粒子（直径<5 m）。通过以下方式避免暴露气溶胶：在生物安全柜内工作离心时使用密封转子或杯进行规范的微生物操作吞咽；口腔吸入、吃

9、、喝、在实验室里抽烟通过以下方式防止经吞咽产生的暴露：不在实验室内吃、喝或吸烟始终使用手工吸液进行规范的微生物操作经皮 :被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、动物叮咬、抓伤、湿疹通过以下方式防止皮肤破损：用塑料制品代替玻璃制品 使用锐器要非常小心用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内 适当限制动物戴不易划破的手套、袖套、 用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套接触（间接传播）:通过接触污染面（如凳、电话、电脑、设备把手等）的手来触摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不彻底。通过以下方式防止间接暴露：工作台面消毒工作后、脱去手套后总是洗手。不要用戴手套或不戴手套的手触摸脸部（良好的个人习惯）实验室内不使用化妆

10、品。在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度：不在实验室内吃、喝或吸烟 工作结束后或脱去手套后总是洗手 实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备 不用口吸、始终用手工吸液 使用锐器格外小心 用合适的设备抑制气溶胶的产生 对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒2.3 生物安全等级国家和卫生部对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。 提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合使用，以及所选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。以下是 1-4 级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括。2.3.1 所推荐的生物安全等级

11、与相应感染因子生物安 全等级感染因子规程安全设备 （第一道屏障）实验室设备 （第二道屏障）已知对健康成人标准微生物操作不需要。开放工作台。和动物不造成疾需要时，防止节肢动物和啮病。限制进入齿动物进入。生物危害警示标记实验室靠近出口处BSL-1有洗手池。实验室的窗户有纱窗。适当的消毒设备，必要时配备灭菌设备。能引起人或动BSL-1 操作加：I 级 or II 级生物安BSL-1 加：物发病，但一般限制进入全柜或其它物理防护实验室门应带锁并情况下对健康生物危害警示标记设备，这些设备应用可自动关闭。工作者、群体、锐器谨慎使用于可能会产生飞溅或应设洗眼设施、高压家畜或环境不制定安全手册，确定气溶胶的感

12、染因子的灭菌锅。会引起严重危所有废物消毒和医疗监操作；个人防护设备：BSL-2害的病原体。实督计划外套、手套、所需要验室感染不导的面部防护致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。能引起人或动BSL-2 操作加：II 级（B2）或级生BSL-2 加：物严重疾病，或控制进入物安全柜和用于所有自成隔离区，进入实造成严重经济所有废弃物消毒感染因子操作的其它验室的过道用物理方损失，但通常不实验室衣服洗之前对物理防护设备；个人式隔开。BSL-3能因偶然接触其进行消毒防护设备：防护衣、入口处采用自动关闭而在个体间传手套、需要的呼吸道双层门。播， 或能用抗生防护。清洁区设置淋独立的送排风系统，素

13、抗寄生虫药浴装置。空气排至室外，不在治疗的病原体。室内循环。实验室负压实验室污染区内设不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器。能引起人或动BSL-3 操作加：按照级生物安全的BSL-3 加：物非常严重的进入实验室前更衣所有步骤进行，全身远离建筑物或单独的疾病，一般不能出口处冲淋穿上有空气供应系区域治愈，容易直所有材料在出口处消统、 正压个人防护衣。安装供应、排放真空接、 间接或因偶毒系统BSL-4然接触在人与BMBL 上的其它需求人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物之间传播的病原体。根据国家标准GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求编制2.3.2 生物安全评估病毒名称危害程度分未经培养的感英

14、文名中文名分类学地位类染材料的操作Hepatitis A virus甲型肝炎病毒小 RNA 病毒科第三类BSL-2Hepatitis B virus乙型肝炎病毒嗜肝DNA 病毒科第三类BSL-2Hepatitis C virus丙型肝炎病毒黄病毒科第三类BSL-2Hepatitis D virus丁型肝炎病毒卫星病毒第三类BSL-2Hepatitis E virus戊型肝炎病毒嵌杯病毒科第三类BSL-2Humanimmunodeficiencyvirus( HIV)艾滋病毒逆转录病毒科第二类BSL-2Cytomegalovirus巨细胞病毒疱疹病毒科第三类BSL-2Dengue virus登革

15、病毒黄病毒科第三类BSL-2Japaneseencephalitis virus乙型脑炎病毒黄病毒科第二类BSL-2Rubivirus (Rubella)风疹病毒披膜病毒科第三类BSL-2Measles virus麻疹病毒副粘病毒科第三类BSL-2序号病原菌名称危害程度分类样本检测所需生物安全实验室级别学名中文名1.Mycobacterium tuberculosis结核分枝杆菌第二类BSL-22.Vibrio cholerae霍乱弧菌第二类BSL-23.Staphylococcus spp葡萄球菌属第三类BSL-24.Streptococcus spp链球菌属第三类BSL-2福州市传染病医院

16、2 195.Enterococcus spp肠球菌属第三类BSL-26.Micrococcus spp微球菌属第三类BSL-27.Moraxella spp莫拉菌属第三类BSL-28.Moraxella spp莫拉菌属第三类BSL-29.Neisseria spp奈瑟菌属第三类BSL-210.Corynebacterium spp棒状杆菌属第三类BSL-211.Bacillus spp芽胞杆菌属第三类BSL-212.Listeria spp李斯特菌属第三类BSL-213.Erysipelothrix spp丹毒丝菌属第三类BSL-214.Rhodococcus equi马红球菌第三类BSL-2

17、15.Nocardia spp诺卡菌属第三类BSL-216.Enterobacteriaceae肠杆菌科第三类BSL-217.Vibrio spp弧菌属（除霍乱弧菌）第三类BSL-218.Aeromonas spp气单胞菌属第三类BSL-219.Plesiomonas spp邻单胞菌属第三类BSL-220.Pseudomonas spp假单胞菌属第三类BSL-221.Acinetobacter spp不动杆菌属第三类BSL-222.Flavobacterium spp黄杆菌属第三类BSL-223.Haemophilus spp嗜血菌属第三类BSL-224.Pasteurella spp巴斯德菌

18、属第三类BSL-225.Gardnerella spp加德纳菌属第三类BSL-226.Legionella pneumophila嗜肺军团菌第三类BSL-227.Clostridium spp梭菌属第三类BSL-228.Fusobacterium spp梭杆菌属第三类BSL-229.Bacteroides spp拟杆菌属第三类BSL-230.Actinomadura spp放线菌属第三类BSL-231.Candida albicans白假丝酵母菌第三类BSL-232.Cryptococcus neoformans新生隐球菌第三类BSL-2根据上述病原体检测的表格，本医院开展的检测允许在生物安全

19、等级为1、 2 的实验室里工作。各专业实验室根据实际情况编写病原微生物危害评估报告。2.3.3 本实验室生物安全等级在福州市传染病医院实验室，仅仅允许在生物安全等级为1 ， 2 的实验室里工作，这里没有3、 4 级生物安全实验室可供工作。世界卫生组织（WHO）已有建立了生物安全手册，各专业科室内应配备该手册可供查阅。2.3.4 生物安全的原则“防护”这个词语用于描述在运行或维持实验室环境下管理传染源的安全方法。 防护的目的在于减少或排除实验室人员、其他人员和具有潜在危险物对外部环境的暴露。一级防护，为使个人和实验室环境不受传染因子的暴露，可以通过好的微生物技术和使用适当的安全设备而得以提供。接

20、种疫苗可以提供更好的个人防护。二级防护，为使实验室外部环境不受传染因子的暴露，可以通过设备的设计和熟练操作相结合而得以提供。因此，防护的三个因素包括实验室操作与技术、安全设备和设备设计。这些因素之间相应的结合是由专门机构对所从事这一工作所做的风险评估来决定的。实验室操作与技术防护最主要的因素是严格执行标准的微生物操作和技术。与具传染性或潜在传染性因子打交道的人必须意识到其潜在的危害，必须通过培训，熟练掌握安全处理这些物质的操作和技术。实验室的领导或主管有责任提供或安排全体人员的相关培训。每一个实验室应制订生物安全操作程序，该程序表明了将会或可能遇到的危害，以及减少或排除这种危害的操作和设计步骤

21、的详细说明。全体人员应该知道一些特殊危害，并且应了解和遵循所要求的操作程序。受过专业培训，并且了解相关实验技术、安全程序和危害物处理的专家必须指导实验室相关工作。当标准操作不足以充分控制由特定的传染因子或实验步骤所产生的危害时，则需增加附加措施。实验室领导有责任选择附加的安全措施，该措施必须能控制由传染因子或实验步骤所产生的危害。实验室全体人员、安全操作和技术必须通过适当的设备设计、工程优化、安全设备和管理加以补充。2.3.5 安全设备（一级屏障）安全设备包括生物安全柜（BSC） 、密闭容器、或其它用于清除或减少生物危害物质暴露的工程设计。生物安全柜主要是对许多微生物操作过程中所产生的液体飞溅

22、或气溶胶进行防护。微生物实验室里使用的三种生物安全柜（Class ， ）。当应用较好的微生物技术时，级和级生物安全柜起到了主要屏障的作用，该屏障为实验室的人员和环境提供了更好的保护。级生物安全柜还能保护在柜内处理时的物质（如细胞培养液，微生物繁殖液）。密闭式型生物安全柜为实验室的人员和环境提供了目前为最高等级的保护。另一个主要屏障是安全的离心管，为防止离心时产生气溶胶而设计的密闭容器。为减少危害，处理因暴露的气溶胶而传播的感染源时必须使用象生物安全柜或离心管之类的安全设备来控制污染。安全设备也包括手套、帽子、隔离衣、鞋套、长统靴、口罩、面罩、护眼镜。个人防护设备通常与生物安全柜和从事包括感染因

23、子、动物和其它工作的设备结合使用。因个人防护设备可以成为人与感染因子之间的初级屏障，因此某些工作在生物安全柜内进行是不可行的。如某些动物研究、动物石尸体解剖、制剂生产和与实验室设备维修、服务、或其它支持性工作。2.3.6 设备的设计（第二道屏障）设备的设计在提供屏障方面起了重要作用。该屏障可保护实验室内外的工作人员，也可保护群体中的人或动物不受偶然从实验室内释放出来的传染因子的危害。实验室管理者有责任提供与实验室功能和所从事的传染源所推荐的生物安全等级相适应的设备。所推荐的第二道屏障取决于特定传染源所传播的风险程度。例如， 在生物安全等级为级和级的实验室，其暴露风险将与感染源的接触或忽视在污染

24、的工作环境中的暴露， 第二道屏障可以包括实验室工作区与公共通道的隔开，有效的去污设备（如压力消毒锅）和洗手设备。随着气溶胶传播危险的增加，为了防止气溶胶扩散到环境中，需要更高等级的保护和多重二级屏障，这些设计的特点包括确保空气直接流入的专用同通风系统，清除空气中感染因子的空气处理系统，控制通道区，实验室入口处的气锁，与实验室隔开的缓冲区。实验室设计工程师可以参考国家关于特殊实验室通风系统中的要求。2.3.7 生物安全等级由实验室操作和技术、安全设备、实验室设备相结合构成四级生物安全等级，每一种结合对于经证明或有疑问的传染源的传播途径与实验室的功能是很合理的。生物安全级的操作、安全设备和实验室设

25、备不仅适应大学生、再教育培训及教学实验室， 也适用研究一些限定的有特异性的活性微生物，而这些微生物不知道会对人类引起疾病。枯草杆菌、传染性狂犬肝炎病毒是这些微生物的代表。许多感染源虽不与疾病发生过程直接相关，但它是潜在的病原体，并会使年轻的、年老的、免疫力缺乏或低下的人群引起感染。经多次传代的疫苗不应认为是无毒病原体，因它们毕竟是疫苗菌株。生物安全级代表基本的防护水平，在无任何屏障的情况下，依靠规范的微生物操作，而不仅仅依靠洗手来进行防护。生物安全级的操作、安全设备和实验室设备即适用于临床、诊断、教学，也适用研究一些人群和人类疾病存在显著变异的具内在中度传染源的工作。通过好的微生物技术， 这些传染源可以在开放的工作台上安全地处理，所产生潜在的飞沫和气溶胶也较低。乙型肝炎病