22ABXDX五分类血细胞分析仪操作保养规程

1、贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-022临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第1页共12页ABX DX120全自动血细胞分析仪操作程序1. 检测原理1.1 RBC/PLT通过电阻抗变化原理测定 RBC和 PLT。这意味着血细胞通过池内微孔时会产生电场。样品稀释在电解质稀释溶液里（电流导电场），混合后被真空吸引通过校准孔的微孔。两个电极置于微孔两侧，恒定电流不断流过两电极间。当血细胞通过微孔时， 它们在两电极之间的电场内产生电阻（阻抗）。测量细胞的电压与细胞的尺寸成比例。由于电流是持续不变的， 大细胞会产生更大的电阻，小细胞电阻也小一

2、些（即两电极间的阻抗变化与细胞体积呈正 比）。当细胞通过微孔时，电压随着脉冲振幅大小而变化。脉冲被放大、根据尺寸和阈值被 引导、聚集、然后连同定标系数进行数学计算给出RBC和PLT的最终数值。1.1.1结果：单位体积内的细胞数X定标系数。1.1.2直方图：a RBC:分布在30fl到300fl间的256通道上。b PLT :分布在2fl至U 活动阈值间的256通道上。该阈值根据分析区域内出现的小细胞个数而移动。1.2 HGB红细胞溶解后释放的血红蛋白与氰化钾结合形成氰化高铁血红蛋白化合物。在550nm波长下，利用分光光度法测出吸光度，测得的吸光度值X定标系数=血红蛋白数值。在闭管自动进样循环中

3、，两次计数池冲洗之间做一个HGB空白，与上次的空白值合并得出最终HGB的空白值（1/5新值，4/5上一次的空白值）。在手工模式下，每个循环都做HGB空白。1.2.1 结果：HGB=Log（空白值/样品值）X K1.3 MCV MCH和 MCHC1.3.1 MCV（平均红细胞体积）由 RBC直方图直接计算得出。1.3.2 MCH（红细胞平均血红蛋白含量）根据HGB直和RBC结果计算。结果：MCH（ pg）=（HGB/RBCX 101.3.3 MCH（红细胞平均血红蛋白浓度）根据HGB直和HCTf直计算。结果：MCH（g/dL ）=（HGB/HCTX 1001.4 HCT细胞通过校准孔的微孔产生的

4、脉冲高度与所分析的RBC体积成正比，HCT是利用与MCV相关的函数测得。1.5 RDW研究RBC分布可以检测与 RBC大小不同相关的 RBC异常。RDV（红细胞分布宽度）让你 根据细胞数目和平均体积去研究曲线宽度。制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-022临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第2页共12页1.5.1 结果：RDW=KSD/MCV其中K=系统常数SD=通过对细胞分布进行统计研究得出的 标准差MCV均RBC体积。1.6 MPV研究血小板直方图可直接得出MPV（

5、平均血小板体积）。1.7 PCT根据下列公式计算 PCT%= （ PLTX MPV /100001.8 PDWPDV（血小板分布宽度）根据 PLT直方图来计算。从 2fl开始的占PLT总数15%勺阈值 S1与从活动阈值开始向后的占PLT总数15%的阈值S2之间的曲线宽度代表 PDW1.9 WBC计数通道：检测原理与RBC计数方法相同。WBC十数在WBC/HG通道内进行，信号处理 设备在 WB（和PLT （和已溶解的 RBC之间置一电子阈值。1.9.1 结果：单位体积内的细胞数X定标系数。计数结果与BASO通道和LMNE通道内的测量结果作对比，以绝对值和百分数形式给出完整的分类结果。1.10 B

6、ASO检测原理与RBC的方法相同。利用特定的溶血剂（ABX嗜碱溶血剂）在独立的 BASOI道内进行计数。血样与ABX嗜碱溶血剂反应后，除了嗜碱性粒细胞之外，全部白细胞失去细 胞膜和胞浆，将嗜碱性粒细胞与其他白细胞裸核分开将变得十分容易。从体积坐标轴开始到阈值V 1之间可见细胞溶解后剩余的碎片，从阈值V 2到直方图尾部是嗜碱性粒细胞。WBC 总数包括全部裸核数目加上嗜碱性粒细胞。嗜碱性粒细胞百分数根据阈值V2 和上限间的细胞数计算。1.10.1 结果：1.10.1.1计数细胞（BASO+WB裸核）总数=单位体积细胞数X定标数X100%1.10.1.2 BASOI道的结果也与其它通道（ WBC和L

7、MNE的结果作对比，以绝对值和百 分数形式给出完整的分类结果。1.11双矩阵双矩阵基于三条原理： DHSS（双鞘流）原理（ABX专利）体积检测：阻抗变化 细胞化学法染色和吸光度测量。采样阈LMNEf路内的全血样本注入 LMNE也，与ABX嗜酸染色剂混合，此试剂溶解掉 RBC并使 WBC稳定在原始状态并分别染色。在加热池反应/稀释后在进入测量池分析之前，溶液被吸引送到光学反应通道。在双层鞘流作用下，该溶液通过LMNE流式细胞通道的光窗和 60um微孔，每个细胞均被检测吸光度（细胞化学法）和阻抗（体积）。通过上述测量以体积为X轴，以吸光度为 Y轴绘制 WB（散点图。2. 试剂2.1 稀释液（DIL

8、UENT）2.1.1试剂品牌：ABX,包装规格，20L.制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-022临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第3页共12页2.1.2储存条件：5-30 C避光保存。2.1.3使用期限：有效期内使用，试剂开封后科可稳定60d。2.1.4安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，必要时寻求医 疗救助。2.1.5注意事项：注意防尘。2.2嗜碱溶血剂（BASOLYS）2.2.1试剂品牌：ABX包装规格,5L.2.2.2储存条件：18-25

9、 C避光保存。2.2.3使用期限：有效期内使用，试剂开封后科可稳定60d。2.2.4安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，必要时寻求医 疗救助。2.2.5注意事项：在试剂使用前须确认是否有污染或颜色变化，一经发现，须速更换。 若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。2.3嗜酸溶血剂（LEUCODIFF2.3.1试剂品牌：ABX包装规格1L。2.3.2储存条件：18-25 C避光保存。2.3.3使用期限：有效期内使用，试剂开封后科可稳定60d。2.3.4安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，必要时寻求医 疗救助。2.3.5注意事项：在试剂使用前须确

10、认是否有污染或颜色变化，一经发现，须速更换。 若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。2.4血红蛋白溶血剂（LYSEBIO2.4.1试剂品牌：ABX包装规格1L.2.4.2储存条件：15-30 C避光保存。2.4.3使用期限：有效期内使用，试剂开封后科可稳定60d。2.4.4安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，必要时寻求医 疗救助。2.4.5注意事项：在试剂使用前须确认是否有污染或颜色变化，一经发现，须速更换。 若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。2.5 清洗液（CLEANER2.5.1试剂品牌：ABX包装规格1L。2.5.2储存条件：5-30 C避光

11、保存。2.5.3使用期限：有效期内使用。2.5.4安全事项：本品为强碱性洗涤剂，避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用 大量清水冲洗，必要时寻求医疗救助。制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-022临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第4页共12页2.5.5注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须速更换。若 试剂发生凝固，须替换。2.6网织红细胞染液(Fluoyte)2.6.1试剂品牌：ABX包装规格0.5L。2.6.2储存条件：18-25 C避光保存

12、.2.6.3使用期限：有效期内使用。2.6.4安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，必要时 寻求医疗救助。2.6.5注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须速更换。若 试剂发生凝固，须替换。2.7校准品及质控品2.7.1试剂品牌：ABX2.7.2储存条件：2-8 C垂直保存，避免冷冻。2.7.3使用期限：有效期内使用，其中校准品开封后必须4h内使用，如未用完，应废弃剩余部分。2.7.4注意事项：校准品上清液有轻微溶血现象是正常现象。温度超出规定范围可导致 严重溶血，校准品平均值超出测试限，并且实验室内质控历史数据和室间质评数据表示良好 的结果时，可

13、视为本校准品失效。应更换校准品，重新校准。2.8试剂的更换2.8.1更换试剂以后，先进行空白检查，确认空白计数符合要求(WBS 0.1 X 109/L ; RBC1290.02 X 10 /L ; HGBC 1g/L ; PLTW 5.0 X 10/L )，再开始进行样本分析2.8.2以上所有试剂开封后应在外包装注明启用日期。2.8.3进入检验LIS系统试剂出库登记。3. 校准程序3.1校准周期正常展开工作半年校准一次。仪器投入使用前；更换配件维修后，可能对检测结果有影响时；室内质控显示系统的检测结果有漂移时；比对结果超出允许误差时可校准。但校准应被视为故障排除步骤中的最后一步，执行不必要的校

14、准会掩盖仪器性能中存在的潜在问题。3.2 校准前检查3.2.1 检查校准品批号和有效期。使用配套试剂，试剂必须充足。如果室温超过30C,不能进行校准，在校准前30分钟打开仪器电源。3.2.2 确认是否按厂家建议进行仪器保养。尽可能不要在进行保养或试剂更换的当天进行校准或校准验证。3.2.3 浏览最近的质控数据，确保分析仪性能稳定。制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-022临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第5页共12页324 检测手工进样模式及自动进样模式的精确性：各取

15、1份新鲜全血标本进行仪器的精密度试验，连续检测 11次，统计第211次结果的CV值。3.2.5进行自动清洗，确认空白计数没有超出规定范围。3.3校准方法3.3.1校准ABX DF120手工进样模式3.3.1.1 校准品的准备a）从冰箱或包装取出1瓶校准品，放置30分钟使其温度升至室温（18-25 C）。b）保持瓶子直立的状态放在双手中轻轻搓动20秒，然后将其颠倒后再搓动20秒以上。c）轻轻来回倒转12次使其混合均匀，确保所有细胞都已经悬浮起来。d）进行分析前在平面上静置瓶子15秒，使泡沫散去。3.3.1.2校准品检测：在手工进样模式下连续进行11次分析，在分析当中不要混匀校准品。分析结束后，使

16、用洁净无屑的纱布擦拭干净瓶子及瓶盖螺纹，之后盖上瓶盖。3.3.1.3平均值的计算及校核数据：去除第 1次分析结果，计算其余10次分析结果的平均值，确认各参数的平均值与靶值差异绝对值都在可接受范围内（WB&1.5%,RBC W1.0%HGB W1.0%HCT 2.0%PLT 3.0%）。如果某个参数的平均值与靶值 差异绝对值超出了可接受范围，并且内部质控和（或）室间质评的结果也显示出类似偏差， 表示需要重新校准分析仪。3.3.1.4 计算新的校准设定值：校准设定值的修改是非常关键的操作，只能由ABX现场技术服务代表进行。3.3.1.5校准后用另一只校准品连续测定11次，计算第211次检测结果均值

17、与靶值的差异百分比绝对值是否在可接受范围内（WB&1.5%,RBC 1.0%HGB 1.0%HCT 2.0%PLT 3.0%） o3.3.2 校准ABX DF120自动进样模式3.3.2.1 校准前准备a）校准前确认ABX DF120手工进样模式已被正确校准。b）新鲜全血标本的准备：选择同血型各参数均正常的新鲜全血标本多份混合成约22ml全血标本，分装4ml/管，共5管，分别用于该份全血标本的定值，ABXDF120自动进样模式校准，ABX DF120自动进样模式校准验证， ABX DF120手工进样模式校准， ABX DF120手工 进样模式校准验证，标本尽量在 2小时内完成检测，最长不能超过

18、 4小时。3.3.2.2样品的检测及计算： 先取上述标本1份在靶仪器连续检测11次，计算第211次各参数检测结果均值，以此为该新鲜全血标本的靶值；再用其他份相同的新鲜全血标本在要校准模式上连续检测 11次，计算第211次检测结果均值与靶值的差异百分比绝对值是 否在可接受范围内（WB1.5%,RBC 1.0%HGB 1.0%HCT 2.0%PLT 500X 109/L 或w 50X109/L （齿状波明显，尾部抬高 大于峰值20%涂片镜检，如结果不符，人工计数RBCRBC直方图出现双峰或多峰涂片镜检RBC仪器提示eryt（有核RBC）涂片镜检，如发现有核红细胞，应人工分类 计数并校正WBC数校正

19、公式为：校正后WBC数=校正前 WB（数 X 100 *（ 100+分类 100个白细胞遇到的有核红细胞总数）WBC首次 WBO 30X 109/L 或w 2.5 X910/L涂片镜检，如结果不符，人工计数WBC仪器报警left shit（核左移）涂片镜检MCV首次 MC0 120fL 或w 60fL涂片镜检MCHCMCHIC 380g/L检查标本有无脂血，溶血，标本量或涂片镜 检RDW首次 RDW 22%涂片镜检异型淋巴细胞异型淋巴细胞5%涂片镜检，不符应人工分类巨大不成熟 细胞巨大不成熟细胞3%涂片镜检，不符应人工分类中性粒细胞首次中性粒细胞90%涂片镜检单核细胞首次单核细胞15%涂片镜检

20、，不符应人工分类淋巴细胞首次淋巴细胞50% （成人）或 70% （儿童）涂片镜检，不符应人工分类嗜酸性粒细 胞首次嗜酸性粒细胞15%涂片镜检，不符应人工分类制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第9页共12页嗜碱性粒细 胞首次嗜碱性粒细胞3%涂片镜检，不符应人工分类其他首次新生儿标本涂片镜检，不符应人工分类其他未分类或分类不全标本涂片镜检，不符应人工分类其他明确为血液病患者或服务对象 要求人工镜检分类的标本涂片镜检贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-0225. 质控程序5.

21、1质控参数的设定：在 LIS系统里面，进入质控监测画面，点击相应选项进行质控水 平，质控品批号，有效期，项目靶值，标准差，变异系数等内容的输入。5.2质控标本的检测5.2.1质控品的准备：从冰箱或包装盒内拿出质控品，检查有效期及状况(如极度溶血 或过期，应及时更换)，在室温平衡15分钟，期间不能混匀，避免光照，然后将质控品垂直置于两手掌中前后搓匀20秒，再将质控品倒转后垂直置于两手掌中前后搓匀20秒，轻轻颠倒混匀10次，继续上述操作直到细胞完全悬浮起来(最少 3次，大约2分钟)。5.2.2质控品上机检测：将已摇匀的质控品按标本检测方法手动进样上机检测，检测结 果传输到LIS系统内设定为相应水平

22、的质控结果。5.3手工进样模式与自动进样模式验证：每日随机取1份新鲜全血标本进行手工进样模式与自动进样模式结果比对，以手工进样模式检测结果为靶值，通过公式来计算 WBC,RBC,HGB,HCT,MCV,PL等参数的偏倚，结果在允许误差范围内为符合比对要求，其误差范围为(WBC7.5%,RBC .0%HGB 3.0%HCT 3.0%PLT 15.0% MCV3.0% )，验证结果 输入电子表格文档中保存。5.4两台仪器间的比对：每日随机取1份新鲜全血标本在 ABXDF120仪器上进行手工进样模式与自动进样模式结果比对后，再用同份标本在另1台ABXDX120仪器上进行手工进样模式与自动进样模式检测

23、，两台仪器检测结果比对，通过公式来计算 WBC,RBC,HGB,HCT,MCV,PL等参数的偏倚，结果在允许误差范围内为符合比对要求，其误差范围为(WBC7.5%,RBC 3.0%HGB 3.0%HCT 3.0%PLT 15.0% MCV3.0% )，比对结果 输入电子表格文档中保存。6. 性能参数ABX DF120线性范围和不精密度见下表检验项目线性范围不精密度制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日贵州省黔南州中医院检验科文件编号：QZJ-LJ-022临检室管理SOP文件版序：A/O生效日期：2016年1月10日责任部门：检验科页码：第10页共12页WBC（0 10

24、0） x 109/L 3.0%RBC（0 8.00） x 1012/L 1.5%HGB（0 250）g/L 1.0%HCT（0 60.0）% 1.5%PLT（0 1000） x 109/L 15%7. 仪器保养7.1每日保养7.1.1每天上班前用浓缩清洗液清洗仪器1次，然后执行1次start up,各项参数空白通过方能进行日常工作，下班前执行start dow n,仪器自动清洗完毕后关掉电源。7.2每周保养7.2.1自动浓缩清洗： RBQ也，WBC也，BASO也7.2.1.1准备工作：备好5ml注射器，4%次氯酸钠浓缩清洗溶液，打开仪器外壳，排空 RBC,WBC,BAS池，按下 menuos-

25、3-8-2-1,提升仪器压力。7.2.1.2 清洗RBC也：打开RBC也上盖，用注射器吸取 5ml浓缩清洗液到 RBC也，重新 盖好盖子，按下22#阀15秒，模拟计数过程；然后同时按下 42#和22#阀，对RBC也进行反 冲，持续时间大约 10秒，放置仪器10分钟以上。7.2.1.3 清洗 WBC池松开 WBC/HG池保护罩上螺丝，取下保护罩，用注射器吸取2ml浓缩清洗液到 WBC/HG池，重新盖好盖子，按下23#阀15秒，模拟计数过程；然后同时按下42#和22#阀，对RBC也进行反冲，持续时间大约5秒，再盖上 WBC/HG池保护罩，拧紧螺丝，放置仪器10分钟以上。7.2.1.4 清洗BASO

26、也：打开BASO也上盖，用注射器吸取 5ml浓缩清洗液到 BASO也，按40#阀排出到剩余3/4的浓缩清洗液，重新盖好盖子，按下24#阀15秒,模拟计数过程，然后同时按下42#和24#阀，对RBC池进行反冲，持续时间大约10秒，放置仪器10分钟以上。7.2.1.5以上各池子浓缩清洗完后，盖好仪器外壳，按下esc返回主界面，再按下startup,做启动循环，检查仪器清洁状态，如果空白值符合下列条件：WB& 0.1 x 109/L ; RBCC0.02 x 1012/L ; HGBC 1g/L ; PLTW 5.0 x 109/L，表示通过，再做质控分析，检查结果是否在 可接受范围之内。7.2.2清洗采样阀：当仪器出现以下情况时：没有结果显示；质控结果超出可接受范围；结果重复性差；报警提示（不正确采样），需清洗采样阀。7.2.2.1准备工作：备好2ml注射器，4%次氯酸钠浓缩清洗溶液，打开仪器外壳，用注 射器吸取2ml浓缩清洗液，取下启动循环杆，按下menuos-3-8-2-1,提升仪器压力。制定人审核人批准人批准日期韦廷玉胡松元罗衡丽2016年1月10日贵州省黔南州中医院检验科临检室管理SOP文件文件编号：QZJ-LJ-022版序：A/O生效