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文档简介

1、国家十一五科技支撑方案国家十一五科技支撑方案 细菌性阴道病结合检测技术的细菌性阴道病结合检测技术的推行运用推行运用细菌性阴道病及其实验室检测细菌性阴道病及其实验室检测湖南省人民医院湖南省人民医院 曹友德曹友德内容提纲内容提纲 细菌性阴道病的概念细菌性阴道病的概念 细菌性阴道病与微生态平衡细菌性阴道病与微生态平衡 细菌性阴道病的影响细菌性阴道病的影响 细菌性阴道病实验室检查细菌性阴道病实验室检查 细菌性阴道病结合检测技术细菌性阴道病结合检测技术 细菌性阴道病的治疗细菌性阴道病的治疗 细菌性阴道病的概念 细菌性阴道病细菌性阴道病bacterial vaginosis BV是妇科常见病、多发病。细菌

2、性阴道病以是妇科常见病、多发病。细菌性阴道病以往曾有过许多称号,如嗜血杆菌性阴道炎、往曾有过许多称号,如嗜血杆菌性阴道炎、棒状杆菌性阴道炎、加德纳菌性阴道炎及棒状杆菌性阴道炎、加德纳菌性阴道炎及非特异性阴道炎等。直到非特异性阴道炎等。直到1984年在瑞典的年在瑞典的专题国际会议上才正式命名为细菌性阴道专题国际会议上才正式命名为细菌性阴道病。病。细菌性阴道病称号的界定细菌性阴道病称号的界定细菌性:阴道内存在大量细菌细菌性:阴道内存在大量细菌生长繁衍,但生长繁衍,但 无法确定引起无法确定引起BV的特的特异性细菌。异性细菌。阴道病:阴道粘膜无炎症性表阴道病:阴道粘膜无炎症性表现,故称现,故称“阴阴

3、道病,而不称道病,而不称“阴道阴道炎。炎。 BV的发病率高,在阴道感染性疾病中,细的发病率高,在阴道感染性疾病中,细菌性阴道病约占菌性阴道病约占50%60%,念珠药阴道炎,念珠药阴道炎占占20%30%,滴虫性阴道炎占,滴虫性阴道炎占5%10%,因此,细菌性阴道病是妇科临床最常见的阴因此,细菌性阴道病是妇科临床最常见的阴道感染。道感染。 细菌性阴道病与微生态平衡细菌性阴道病与微生态平衡微生态学的根本概念微生态学的根本概念 微生态学与微生物学均研讨微生物微生态学与微生物学均研讨微生物 前者研讨非致病的微生物,而后者研讨前者研讨非致病的微生物,而后者研讨致病的微生物致病的微生物 微生态学是研讨人体正

4、常微生物微生态学是研讨人体正常微生物MMT群,或称生理性微生物的构造功能及其群,或称生理性微生物的构造功能及其与宿主相互关系与宿主相互关系安康妇女阴道微生物群中常住菌除乳酸安康妇女阴道微生物群中常住菌除乳酸杆菌外,还有葡萄球菌、大肠杆菌、棒杆菌外,还有葡萄球菌、大肠杆菌、棒状杆菌、状杆菌、B族链球菌、粪链球菌、支原体、族链球菌、粪链球菌、支原体、消化球菌及类杆菌等。正常菌群中厌氧消化球菌及类杆菌等。正常菌群中厌氧菌与需氧菌之比为菌与需氧菌之比为5:1。 正常的阴道菌群及微生态平衡正常的阴道菌群及微生态平衡正常阴道内的微生物群主要有细菌、正常阴道内的微生物群主要有细菌、真菌、原虫及病毒等。菌群的

5、组成真菌、原虫及病毒等。菌群的组成菌中兼性厌氧乳杆菌是正常阴道的菌中兼性厌氧乳杆菌是正常阴道的优势菌。优势菌。阴道粘膜上皮细胞阴道粘膜上皮细胞乳杆菌乳杆菌过路菌过路菌条件致病菌条件致病菌乳杆菌乳杆菌类杆菌类杆菌表皮葡球菌表皮葡球菌粪链球菌粪链球菌大肠杆菌大肠杆菌梭状杆菌梭状杆菌白色念珠菌白色念珠菌棒状杆菌棒状杆菌消化球菌消化球菌金葡菌金葡菌肠杆菌肠杆菌丙酸杆菌丙酸杆菌消化链球菌消化链球菌韦荣球菌韦荣球菌加德纳菌加德纳菌滴虫滴虫乳酸杆菌是阴道的原籍菌在阴道的正常菌乳酸杆菌是阴道的原籍菌在阴道的正常菌群中其数量可达群中其数量可达8107个个/ml,从正常妇女,从正常妇女阴道内可分别出阴道内可分别出

6、16种左右乳杆菌,其中有种左右乳杆菌,其中有几种能产生几种能产生H2O2的乳杆菌如卷曲乳杆菌、的乳杆菌如卷曲乳杆菌、詹森乳杆菌以及发酵乳杆菌等,在乳杆詹森乳杆菌以及发酵乳杆菌等,在乳杆菌中占绝对优势,而其他不产菌中占绝对优势,而其他不产H2O2的乳杆的乳杆菌只占菌只占10%左右。左右。 95%5%乳杆菌其他阴道正常菌 阴道内各种微生物群之间阴道内各种微生物群之间,相互作用、相互作用、相互制约、相互依赖,坚持微生态平相互制约、相互依赖,坚持微生态平衡。一旦突破这种平衡,就会导致疾衡。一旦突破这种平衡,就会导致疾病的发生。病的发生。BV时的阴道微生态改动时的阴道微生态改动 乳杆菌不仅数量上减少,乳

7、杆菌不仅数量上减少, 特别特别是产是产H2O2的乳杆菌减少的乳杆菌减少加德纳菌及厌氧菌添加加德纳菌及厌氧菌添加厌氧菌可添加上千倍,厌氧菌厌氧菌可添加上千倍,厌氧菌与需氧菌之比由原来的与需氧菌之比由原来的5 1,添加到添加到100 1至至1000 1。 致致病病菌菌条件致病菌条件致病菌阴道乳杆菌在数量上处于绝对优势位置,是维持阴阴道乳杆菌在数量上处于绝对优势位置,是维持阴道微生态平衡的前提和根底道微生态平衡的前提和根底乳杆菌乳杆菌乳杆菌乳杆菌微生态平衡微生态平衡微生态失调微生态失调内源性感染内源性感染外外源源性性感感染染产产H2O2乳杆菌的生理作用乳杆菌的生理作用产生乳酸,降低阴道产生乳酸,降低

8、阴道PH值,值,抑制致病菌的生长繁衍抑制致病菌的生长繁衍产生产生H2O2调理阴道微生态调理阴道微生态平衡,防治外籍菌侵入引平衡,防治外籍菌侵入引起的感染起的感染粘附抑制粘附抑制影响阴道微生态环境的要素影响阴道微生态环境的要素影响要素很多;包括内分泌影响要素很多;包括内分泌变化月经、妊娠、绝变化月经、妊娠、绝经、性伴侣、滥用抗生经、性伴侣、滥用抗生素、宫内节育器、阴道冲素、宫内节育器、阴道冲洗以及不洁的性生活等。洗以及不洁的性生活等。致病要素致病要素乳杆菌乳杆菌数量减少数量减少功能减退功能减退产产H2O2产乳酸产乳酸加德纳菌加德纳菌/类杆菌等数量类杆菌等数量阴道内源性感染阴道内源性感染BV阴阴道

9、道菌菌群群失失调调细菌性阴道病的临床特征细菌性阴道病的临床特征 阴道黏膜充血不明显,阴道黏膜充血不明显, 病理特征无炎症病变。病理特征无炎症病变。 临床表现为牛奶样白带,检查无临床表现为牛奶样白带,检查无滴虫,真菌或淋菌。滴虫,真菌或淋菌。 细菌性阴道病的影响BV对妊娠妇女的影响对妊娠妇女的影响妊娠期妊娠期BV可导致绒毛膜羊膜可导致绒毛膜羊膜炎、胎膜早破炎、胎膜早破及早产,产褥感染也比正常人及早产,产褥感染也比正常人群高。群高。 BV时,一些厌氧药可产生脂时,一些厌氧药可产生脂酶及蛋白酶,消酶及蛋白酶,消 化胎膜上的脂质及蛋白质,化胎膜上的脂质及蛋白质,使胎膜强度减弱而使胎膜强度减弱而 易发生

10、胎膜早破。易发生胎膜早破。BV时某些时某些厌氧菌,可产生厌氧菌,可产生 大量磷脂酶大量磷脂酶A2,诱导子宫部,诱导子宫部分组织细胞膜磷脂分组织细胞膜磷脂 分解,使花生四烯酸添加,分解,使花生四烯酸添加,从而使前列腺素合从而使前列腺素合 成添加,刺激子宫收缩而诱成添加,刺激子宫收缩而诱发早产。发早产。 BV对非孕妇女的影响对非孕妇女的影响 发生宫颈上非典型增生的危险性发生宫颈上非典型增生的危险性添加添加 宫内膜炎、附件炎的发生添加宫内膜炎、附件炎的发生添加 全子宫切除,术后阴道残端感染全子宫切除,术后阴道残端感染添加添加 细菌性阴道病实验室检查阴道分泌物检查阴道分泌物检查 阴道分泌物是女性生殖系

11、统分泌的液体阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体,主要由阴道粘膜、宫颈腺体、前庭大腺主要由阴道粘膜、宫颈腺体、前庭大腺及子宫内膜的分泌物混合而成,俗称及子宫内膜的分泌物混合而成,俗称“白白带。带。 检查目的:用于检查生殖系统病变、感检查目的:用于检查生殖系统病变、感染、滴虫、念珠菌,同时还可确定阴道染、滴虫、念珠菌,同时还可确定阴道清洁度。清洁度。 白带常规检查白带常规检查 普通性状检查 pH值 阴道分泌物清洁度 霉菌与滴虫普通性状检查普通性状检查 正常白带: 白带异常可表现为色、质、量的改动: 1 . 大量无色透明粘稠白带常见于运用雌激素药物后及卵巢颗粒细胞瘤时。 2 . 脓性白带 3 . 豆

12、腐渣样白带4 . 血性白带 5 . 黄色水样白带pH值检查值检查 正常pH值为4.5左右。阴道内呈弱酸性,这是阴道的自净作用,可以防止致病菌繁衍。假设患有滴虫性或细菌性阴道炎时,pH值上升,可大于56。 白带清洁度检查白带清洁度检查 白带涂片镜检,根据所见上皮细胞、白细胞或脓细胞阴道杆菌与杂菌的数量进展判别,并划分清洁度:、度为正常,、度为不清洁。 判别规范 清洁度 杆菌 上皮细胞 白细胞 杂菌 意义 + + 05 - 正常 + + 515 - 正常 - - 1530 + 提示炎症 - - 30 + 严重阴道炎霉菌和滴虫检查霉菌和滴虫检查 白带经过处置后在显微镜下可以发现有白带经过处置后在显微

13、镜下可以发现有无滴虫或霉菌,如存在滴虫或霉菌均用无滴虫或霉菌,如存在滴虫或霉菌均用“来表示。这一符号只阐明他曾经感来表示。这一符号只阐明他曾经感染了滴虫或霉菌,并不阐明感染的严重染了滴虫或霉菌,并不阐明感染的严重程度。程度。 其他实验室检查其他实验室检查 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 其他细菌检查其他细菌检查 支原体和衣原体检查支原体和衣原体检查 病毒检查:单纯疱疹病毒病毒检查:单纯疱疹病毒 、人巨细胞、人巨细胞病毒病毒 、人乳头状病毒、人乳头状病毒 病理检查病理检查 细菌性阴道病的诊断细菌性阴道病的诊断规范规范 具备以下具备以下4条中条中3条者即可诊断为细菌条者即可诊断为细菌性阴道病。性阴道病。 1

14、.阴道分泌物为均质稀薄的白带。阴道分泌物为均质稀薄的白带。 2.阴道分泌物阴道分泌物pH4.5。 3.氨臭味实验阳性。氨臭味实验阳性。 4.线索细胞阳性。线索细胞阳性。细菌性阴道病的实验室检查细菌性阴道病的实验室检查 阴道分泌物pH检查 阴道分泌物胺实验 阴道分泌物找线索细胞 阴道分泌物唾液酸酶实验 阴道分泌物脯氨酸氨肽酶实验胺实验胺实验 检查细菌性阴道病的方法: 白带加一滴10%氢氧化钾, 如发出鱼腥味, 即胺实验阳性 线索细胞线索细胞 线索细胞:线索细胞是指细菌性阴线索细胞:线索细胞是指细菌性阴道炎患者有许多杆菌凝聚在阴道上道炎患者有许多杆菌凝聚在阴道上皮细胞边缘,在悬滴涂片中见到阴皮细胞

15、边缘,在悬滴涂片中见到阴道上皮细胞边缘呈颗粒状或点画状道上皮细胞边缘呈颗粒状或点画状致使模糊不清者即为线索细胞,它致使模糊不清者即为线索细胞,它是细菌性阴道病的最敏感最特异的是细菌性阴道病的最敏感最特异的体征。体征。不同染色条件下线索细胞形状不同染色条件下线索细胞形状唾液酸酶实验唾液酸酶实验唾液酸酶是引起BV加德纳菌分泌的一种特异性胞外酶,正常妇女阴道中普通无此酶,细菌性阴道病时此酶可排泌至阴道分泌物中。 BV患者唾液酸酶检测阳性。脯氨酸氨肽酶实验脯氨酸氨肽酶实验 运用ELISA方法检测BV妇女分泌物中高于正常妇女的脯氨酸氨肽酶活性,检测产物为-naphthylamin 传统诊断BV的Amse

16、ls金规范易遭到显微镜质量、样本采集情况以及操作者阅历等诸多要素影响。 细菌性阴道病的结合检测术BV结合检测技术结合检测技术 该工程技术包括过氧化该工程技术包括过氧化H2O2)阴道乳酸杆菌的标志物、唾液阴道乳酸杆菌的标志物、唾液酸苷酶加德纳菌、游动弯曲杆菌酸苷酶加德纳菌、游动弯曲杆菌等等BV致病菌的标志物和白细胞酯致病菌的标志物和白细胞酯酶酶LE炎性细胞的标志物三项目炎性细胞的标志物三项目的。不仅能诊断的。不仅能诊断BV感染,而且能反感染,而且能反响正常阴道菌群目的。响正常阴道菌群目的。实验原理实验原理1 过氧化氢浓度测定:阴道液中过氧化氢过氧化氢浓度测定:阴道液中过氧化氢经过氧化物酶作用,释

17、放出新生态氧,经过氧化物酶作用,释放出新生态氧,后者在后者在4氨基安替吡啉存在下,使氨基安替吡啉存在下,使3,5-二二氯氯-二羟基苯磺酸氧化呈红色,在反响系二羟基苯磺酸氧化呈红色,在反响系统中参与统中参与3,5-二氯二氯-二羟基苯磺酸的拮抗二羟基苯磺酸的拮抗物,当标本中物,当标本中H2O2浓度浓度2mol/L,反响,反响结果呈红色,呈色深度与结果呈红色,呈色深度与H2O2浓度成正浓度成正比。比。实验原理实验原理2 唾液酸苷酶活性测定:唾液酸苷酶水解唾液酸苷酶活性测定:唾液酸苷酶水解5-溴溴-4-氯氯-3-吲哚神经氨酸,释放出溴吲吲哚神经氨酸,释放出溴吲哚基,后者遇重氮盐起反响呈现红色或哚基,后

18、者遇重氮盐起反响呈现红色或紫色,呈色深度与唾液酸苷酶活性成正紫色,呈色深度与唾液酸苷酶活性成正比。比。实验原理实验原理3 白细胞酯酶测定:白细胞酯酶水解白细胞酯酶测定:白细胞酯酶水解5-溴溴-4-氯氯-3-吲哚乙酸盐,释放出溴吲哚基,吲哚乙酸盐,释放出溴吲哚基,后者在氧存在的条件下呈蓝色,呈色深后者在氧存在的条件下呈蓝色,呈色深度与白细胞酯酶活性成正比。度与白细胞酯酶活性成正比。实验操作实验操作 将阴道分泌物中参与400l稀释液,反复挤压棉拭子,使样本溢出。在反响安装中的三个孔中各加1滴阴道分泌物,之后在中间唾液酸酶反响孔中再加1滴显色液,置37恒温反响。15min后察看反响孔内的结果。结果察

19、看结果察看过氧化氢浓度过氧化氢浓度(过氧化物酶法过氧化物酶法):显红色或紫显红色或紫色为色为H2O2浓度浓度2mol/L(正常正常),显蓝色为显蓝色为H2O2浓度浓度2mol/L(异常异常)。唾液酸苷酶唾液酸苷酶(5溴溴-4氯氯-3吲哚唾液酸苷盐法吲哚唾液酸苷盐法) :不显色为正常不显色为正常,显红色或紫色为阳性。显红色或紫色为阳性。白细胞酯酶白细胞酯酶(5溴溴-4氯氯-3吲哚乙酸盐法吲哚乙酸盐法):不显不显色为正常色为正常,显蓝色或绿色为阳性。显蓝色或绿色为阳性。 性能目的 反复性:批内反复性:反复性:批内反复性:90% 、批间反复、批间反复性:性:90% 。低检出量低检出量(灵敏度灵敏度)

20、:过氧化氢过氧化氢2mol/L、唾、唾液酸苷酶液酸苷酶7单位单位/ml、白细胞酯酶、白细胞酯酶9单位单位/ml,检出符合率,检出符合率90%。准确性:阴性参考品符合率准确性:阴性参考品符合率90%、阳性参、阳性参考品符合率考品符合率90%。试剂保管:试剂保管:28密封避光保管有效期在密封避光保管有效期在一年以上。一年以上。工程推行需求条件工程推行需求条件 一名或数名具有临床检验或医学背一名或数名具有临床检验或医学背景的初级以上技术人员。景的初级以上技术人员。 有一间相对固定的实验场地。有一间相对固定的实验场地。 无需特殊的仪器设备条件无需特殊的仪器设备条件 细菌性阴道病的结合检细菌性阴道病的结合检测技术与传统的常规检测等多种测技术与传统的常规检测等多种方法相结,极大地提高了细菌性方法相结,极大地提高了细菌性阴道病的检出率和准确性。可对阴道病的检出率和准确性。可对女性生殖道微生态环境、分泌物女性生殖道微生态环境、分泌物清洁度和细菌性阴道病致病菌情清洁度和细菌性阴道病致病菌情况、早期宫颈炎进展全面诊断。况、早期宫颈炎进展全面诊断。详细操作:详细操作: 临床实际操作实习临床实际操作实习BV的治疗的治疗常选用抗厌氧菌的药物,如甲硝唑类药常选用抗厌氧菌的药

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