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文档简介

1、 细菌普通染色 和革兰氏染色 目的要求目的要求a. 掌握细菌涂片标本的制备方法和普通掌握细菌涂片标本的制备方法和普通染色的步骤和关键点染色的步骤和关键点b. 掌握革兰氏染色法的步骤和关键点掌握革兰氏染色法的步骤和关键点c. 识别细菌的革兰氏染色结果并画图识别细菌的革兰氏染色结果并画图d. 学习无菌操作技术学习无菌操作技术 资料器具资料器具 显微镜，擦镜纸，纱布显微镜，擦镜纸，纱布 革兰氏染液革兰氏染液 香柏油香柏油,自来水自来水,95%酒精酒精; 载玻片载玻片,插镜纸插镜纸,接种环接种环,镊子镊子,酒精灯酒精灯; 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌,未知菌未知菌12小时的液

2、体培育液小时的液体培育液 大肠杆菌和酵母菌平板大肠杆菌和酵母菌平板实验步骤n1.涂片n左手持菌液试管,右手持接种环在火焰中灼烧,冷却后从试管中去菌液一滴,在干净载玻片上做一涂膜;n从固体斜面或平板上取菌时,用无菌接种环取少量菌体,涂抹均匀于玻片上预先滴有的一滴自来水中; 实验步骤n2.枯燥n在空气中自然枯燥或在火焰快速经过枯燥(与热固定同步进展).n3.热固定n用镊子夹住涂片一端,在火焰上延续经过几次;以载玻片在手背上试觉得不烫为宜.实验步骤n4.染色n在固定的标本上加结晶紫染液1-2滴,染色1min,悄然滴加水洗; 吸干, 加半滴水, 盖上盖玻片, 滴上半滴镜油油镜检。(到此实际上即为细菌普

3、通染色)n揭去盖玻片,吸干水, 滴加1-2滴革氏碘液媒染1min, 悄然水洗,吸干。实验步骤n滴加95%乙醇溶液(或30%丙酮乙醇脱色),悄然摇动玻片至液滴无色,不要过分脱色(约30秒),立刻悄然滴加水洗;吸干。n滴加蕃红染液复染3min,悄然滴加水洗;n吸干载玻片反面及标本周围水渍,滴上半滴水，盖上盖玻片,油镜镜检;实验步骤n5.镜检n留意标本中细菌的外形,大小,陈列,和颜色.n革兰氏阳性菌为紫色;n革兰氏阴性菌为红色;金黄色葡萄球菌(24hrs)染色结果金黄色葡萄球菌(48hrs)染色结果金黄色葡萄球菌(72hrs)染色结果大肠杆菌(24hrs)染色结果讨论n记录并描画革兰氏染色结果, 注不测形,陈列和颜色, 看看与实践上能否一样;如不同,分析缘由;n分析影响革兰氏染色结果的要素;n酵母菌能进展染色吗?结果如何?为什么?本卷须知n干净的载玻片, 适宜取菌量, 菌龄, 热固定,每一步水洗要彻底而且吸干,和酒精脱色程度是实验胜利的关键n制止把染液倒入水池中,回收到废液桶中实验三终了，预备实验四n肉汤蛋白胨培育基的配制按实验指点61页配方琼脂为2。400ml/组置500ml三角烧瓶中用封口膜封好瓶口，用记号笔在瓶上标明培育基称号、组号如周次座次，132、配制时间，高压灭菌。n包平皿10个/包/组、试管4支/包/组、1ml枪头2个/包/组、5

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