降胆固醇乳酸菌菌制剂的制备及应用

1、降胆固醇乳酸菌菌制剂的制备及应用胆固醇又称胆甾醇 , 是一种环戊烷多氢菲的衍生物 , 普遍存在于动物体内 , 是 动物组织细胞所不可或缺的重要物质。但是如果胆固醇摄入量过高 , 会使血清中 胆固醇含量偏高 , 容易导致动脉粥样硬化、冠心病、脑中风、高血压等心脑血管 疾病, 严重威胁着人类健康 , 所以如何降低血清中胆固醇含量对相关疾病的治疗 来说至关重要。乳酸菌是一类普遍存在于人体和动物内的益生菌 , 具备促进动物生长 , 调节 胃肠道正常菌群、维持微生态平衡 , 从而改善胃肠道功能 ;抑制肠道内腐败菌生长 提高机体免疫力等许多重要生理功能。 同时也有研究表明一些乳酸菌具有降胆固 醇的作用 ,

2、 这为如何降低血清中胆固醇含量的研究又提供了新的方向。本文研究了降胆固醇乳酸菌的分离纯化和鉴定 ;培养基的优化 ;菌制剂的制 备工艺; 在发酵泡菜上的应用。为降胆固醇乳酸菌的开发和利用奠定了基础。论文从以下四个方面进行研究。 1 降胆固醇乳酸菌的筛选及鉴定对降胆固醇 乳酸菌进行了筛选和鉴定。实验通过平板筛选出 99 株接触酶试验为阴性、革兰氏染色为阳性、有明显 透明钙圈的菌株。其中胆固醇降解率大于 30%的有 8株, 降解率最高的为 I4, 降解 率为 37.3 ±1.50(%,n=3) 。通过生理生化试验和16S r RNA序列分析法对菌株14进行鉴定,菌株14为 植物乳杆菌 (L

3、actobacillus plantarum) 。对植物乳杆菌 I4 进行了耐酸、耐胆盐 试验的研究 , 实验表明植物乳杆菌 I4 具有很好的耐酸能力 , 和一定的耐胆盐能力。2 降胆固醇植物乳杆菌 I4 增菌培养基响应面优化采用响应面法对降胆固醇 植物乳杆菌 I4 增菌培养基进行优化研究。实验通过 Plackett-Burman 试验设计 筛选出影响菌体浓度的主要因素为蔗糖、酵母提取物和乙酸钠。经响应面优化后 , 得到蔗糖、酵母提取物和乙酸钠的最佳浓度分别为2.05%、1.54%、0.31%。优化后的增菌培养基中,菌体密度OD62C可达到2.458,比MRSS 养基OD620值提高了 23.

4、7%,菌落单位提高了 3.91倍。3 降胆固醇植物乳杆菌 I4 菌制剂的制备及稳定性考察对降胆固醇植物乳杆 菌 I4 菌制剂的相关条件及菌制剂稳定性进行了研究。实验通过对菌制剂制备条件的选择，得出在以明胶为保护剂、菌泥与保护剂比例1：5(w:v)、预冻条件为-40 C 下预冻60min、装液量为3m L时，制备出来的菌制剂中活菌数最高，为1.15 X 1012CFU/g。通过对菌制剂降胆固醇能力的测试 , 得出菌制剂胆固醇降解率为 36.9± 1.80(%,n=3), 说明冻干对植物乳杆菌 I4 的降胆固醇能力没有明显影响。通过对 菌制剂稳定性的考察，得出在常温、3C、-18 C保存

5、温度下,90天后活菌数分别 为 0.978 X 1011CFU/g 2.223 X 1011CFU/g 1.125 X 1011CFU/g,说明该菌制剂具 有良好的稳定性。4 降胆固醇植物乳杆菌 I4 菌制剂在发酵泡菜中的应用对降胆固醇植物乳杆 菌 I4 菌制剂在发酵泡菜中的应用进行了研究。实验对不同菌制剂添加量发酵泡 菜过程中p H的变化、总酸含量的变化、氨基态氮含量的变化、亚硝酸盐含量的 变化以及感官值变化进行了测试 ,并对添加过菌制剂发酵泡菜 7天后发酵液中细 菌总数、乳酸菌数、大肠杆菌数进行了测定。结果表明 : 添加菌粉相对于没有添加菌粉来说 , 泡菜发酵时间明显缩短、 安全性更高、稳定性更好。发酵后泡菜液中，细菌总数为2.72 X 106CFU/m L,乳酸菌总数为2.33 X 106