微生物学实验-典型ppt课件

1、实验一实验一 油镜的运用及细菌形状察看油镜的运用及细菌形状察看实验目的实验目的 了解显微镜的根本构造和运用方法了解显微镜的根本构造和运用方法 掌握油镜的原理和运用方法掌握油镜的原理和运用方法 了解细菌的三种根本形状了解细菌的三种根本形状实验原理实验原理显微镜的构造显微镜的构造机械安装机械安装光学系统光学系统镜座镜座载物台载物台镜臂镜臂标本夹和标本挪动尺标本夹和标本挪动尺粗调螺旋和细调螺旋粗调螺旋和细调螺旋聚光镜升降螺旋聚光镜升降螺旋接目镜接目镜接物镜及镜头转换器接物镜及镜头转换器聚光镜聚光镜虹彩光圈虹彩光圈反光镜反光镜1、添加照亮堂度、添加照亮堂度2、添加显微镜的分辨率、添加显微镜的分辨率实验

2、原理实验原理2NA 实验器材实验器材1、标本片、标本片球菌球菌Coccus杆菌杆菌Bacterium螺旋菌螺旋菌Spirillum2、显微镜、显微镜3、香柏油和二甲苯、香柏油和二甲苯4、镜头纸、镜头纸操作步骤操作步骤 放置好显微镜放置好显微镜 调理好光源调理好光源 低倍镜察看低倍镜察看 高倍镜察看高倍镜察看 油镜察看油镜察看 清洁显微镜清洁显微镜 复原显微镜复原显微镜实验二实验二 革兰氏染色革兰氏染色实验目的实验目的 了解革兰氏染色反响的原理了解革兰氏染色反响的原理 掌握革兰氏染色的方法掌握革兰氏染色的方法 革兰氏染色是革兰氏染色是Gram发明的一种细菌发明的一种细菌鉴别染色法，经过染色，可将

3、细菌分为两鉴别染色法，经过染色，可将细菌分为两大类：一类被染成紫色，称为革兰氏阳性大类：一类被染成紫色，称为革兰氏阳性细菌，另一类被染成红色，称为革兰氏阴细菌，另一类被染成红色，称为革兰氏阴性细菌。这种染色的结果主要与细菌的细性细菌。这种染色的结果主要与细菌的细胞壁构造和化学组成有关。胞壁构造和化学组成有关。实验原理实验原理实验器材实验器材1、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis4、载玻片、载玻片5、显微镜等、显微镜等2、大肠杆菌、大肠杆菌Escherichia coli3、革兰氏染色液一套、革兰氏染色液一套操作步骤操作步骤涂片涂片蒸馏水蒸馏水接种环接种环草酸铵草酸铵结

4、晶紫结晶紫 碘碘 液液95%乙醇乙醇 沙沙 黄黄自然枯燥自然枯燥媒染媒染1min脱色脱色2030s固定固定初染初染1min复染复染2min枯燥枯燥镜检镜检本卷须知本卷须知革兰氏染色成败与否与许多要素有关革兰氏染色成败与否与许多要素有关 菌龄菌龄 涂片厚薄涂片厚薄 脱色时间最为关键脱色时间最为关键实验三实验三 微生物细胞的镜检计数法微生物细胞的镜检计数法实验目的实验目的了解血球计数板的构造了解血球计数板的构造掌握其运用方法掌握其运用方法实验原理实验原理 微生物细胞数量测定方法很多，常用的有微生物细胞数量测定方法很多，常用的有镜检直接计数法和平板菌落计数法。镜检直接镜检直接计数法和平板菌落计数法。

5、镜检直接计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培育悬浮计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培育悬浮液，但对杂菌和杂质那么不易分辩。菌体较大液，但对杂菌和杂质那么不易分辩。菌体较大的细胞常采用血球计数板。的细胞常采用血球计数板。实验原理实验原理 血球计数板是一块特制厚玻片，中部平台上有两个方格网，每个方格网中央有一个正方形大方格，面积为1m2，等分成400个小方格，每小格面积为1/400m2。计数池深度为0.1mm，所以，每小格的体积是1/4000mm3。因此，运用血球计数板计数需先测定一定数量小格中的微生物细胞数，求得平均值，再换算成每毫升菌液中微生物细胞数量。每毫升样品中微生物细胞数每毫升样品中微生物

6、细胞数每小格细胞平均数每小格细胞平均数 4000 1000稀释倍数稀释倍数实验器材实验器材1、啤酒酵母、啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae菌悬液菌悬液2、血球计数板和盖玻片、血球计数板和盖玻片4、吸水纸、吸水纸3、显微镜、显微镜操作步骤操作步骤 调理好菌液浓度调理好菌液浓度 放置好计数板放置好计数板 加样加样 低倍镜察看低倍镜察看 高倍镜计数高倍镜计数 清洁计数板清洁计数板 复原显微镜复原显微镜实验四实验四 微生物细胞大小的测定微生物细胞大小的测定实验目的实验目的掌握利用测微尺测定微生物细胞大小的方法掌握利用测微尺测定微生物细胞大小的方法加强对微生物细胞大小的感性认识加强

7、对微生物细胞大小的感性认识实验原理实验原理 微生物细胞大小是微生物的根本形状特征,其测定需借助于测微尺，包括目尺和台尺。 实验原理实验原理 由于不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目尺每小格所代表的实践长度也不同，因此，用目尺丈量微生物细胞大小时，必需先用台尺进展校正，以求出该显微镜在一定放大倍数目镜和物镜下，目尺每小格所代表的相对长度。然后再根据微生物细胞相对于目尺的格数，计算出细胞的实践长度。 实验器材实验器材1、啤酒酵母、啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae2、目镜测微尺、目镜测微尺5、吸水纸、吸水纸4、显微镜、显微镜3、镜台测微尺、镜台测微尺6、载玻片和盖玻片、载玻片

8、和盖玻片操作步骤操作步骤 调整好显微镜，调理好光源调整好显微镜，调理好光源 装好目尺装好目尺 校正目尺校正目尺 1放置好台尺放置好台尺 2校正校正 3计算计算 菌体大小测定菌体大小测定 测定终了测定终了实验五实验五 培育基的制备及灭菌培育基的制备及灭菌实验目的实验目的掌握培育基制备的原理和方法掌握培育基制备的原理和方法了解灭菌方法了解灭菌方法实验原理实验原理 不同的微生物生长繁衍都需求提供一定的营养不同的微生物生长繁衍都需求提供一定的营养条件，在实验室中，微生物的营养是由培育基来提条件，在实验室中，微生物的营养是由培育基来提供的。培育基是按照微生物生长繁衍所需求的营养供的。培育基是按照微生物生

9、长繁衍所需求的营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。物质，用人工方法配制而成的营养基质。 除营养条件以外，微生物必需在最适酸碱度范除营养条件以外，微生物必需在最适酸碱度范围内才表现出最大生命力，因此，应针对不同的微围内才表现出最大生命力，因此，应针对不同的微生物将培育基的生物将培育基的pHpH值调理到适当范围。值调理到适当范围。 实验原理实验原理 培育基的种类较多，根据培育基的物理状态可分为三种： 液体培育基： 半固体培育基：加0.20.5%琼脂， 固体培育基：加1.52.0%琼脂。实验器材实验器材1、药品、药品2、其他、其他 牛肉膏、蛋白胨、牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、琼脂、琼脂、1

10、N NaOH1N NaOH、1N 1N HClHCl。 培育皿、试管、三角瓶、吸管、烧杯、漏斗、培育皿、试管、三角瓶、吸管、烧杯、漏斗、量筒、硅胶塞、天平、包装纸、包装绳等。量筒、硅胶塞、天平、包装纸、包装绳等。操作步骤操作步骤按培育基按培育基配方称量配方称量加水加加水加热熔化热熔化调理调理pH值值过滤过滤分装分装包装包装灭菌灭菌检查灭菌检查灭菌彻底与否彻底与否实验六实验六 土壤微生物的纯系分别土壤微生物的纯系分别实验目的实验目的了解纯系分别的原理、掌握其方法了解纯系分别的原理、掌握其方法实验原理实验原理 在自然条件下，微生物常以群落的方式与其他的在自然条件下，微生物常以群落的方式与其他的微生

11、物混杂在一同。为了研讨某种微生物的特征，必微生物混杂在一同。为了研讨某种微生物的特征，必需获得该种微生物的纯培育。纯培育就是从自然界或需获得该种微生物的纯培育。纯培育就是从自然界或已染杂菌的培育体中分别出消费、科研所需的单一微已染杂菌的培育体中分别出消费、科研所需的单一微生物个体，进展培育并产生大量的后代。生物个体，进展培育并产生大量的后代。 获得纯培育的方法称为微生物的纯系分别法。获得纯培育的方法称为微生物的纯系分别法。实验原理实验原理 纯系分别的方法很多，常用的有稀释平板分别法和平板划线分别法。这些方法都是根据微生物生长所需营养和环境条件不同而人为的加以控制，以便某一种微生物在培育基上出现

12、单个菌落。实验器材实验器材 无菌培育皿、天平、无菌培育皿、天平、90ml90ml无菌水，无菌吸管、无菌水，无菌吸管、接种环、酒精灯、牛肉膏蛋白胨固体培育基、土壤。接种环、酒精灯、牛肉膏蛋白胨固体培育基、土壤。操作步骤操作步骤称取称取10g土样土样参与参与90ml无菌水中无菌水中振荡振荡10分钟分钟取一环在平取一环在平板上划线板上划线培育培育察看察看实验七实验七 平板菌落计数法平板菌落计数法实验目的实验目的掌握平板菌落计数的的原理和方法掌握平板菌落计数的的原理和方法实验原理实验原理 在适当的培育基和培育条件下，将样品稀释至一在适当的培育基和培育条件下，将样品稀释至一定浓度，取一定量接种到平板上，

13、经过培育，就会出定浓度，取一定量接种到平板上，经过培育，就会出现由单个细胞生长繁衍而构成的肉眼可见的菌落。统现由单个细胞生长繁衍而构成的肉眼可见的菌落。统计菌落数，根据样品的稀释倍数和取样接种量即可计计菌落数，根据样品的稀释倍数和取样接种量即可计算出样品中的微生物总量。算出样品中的微生物总量。每毫升样品中微生物细胞数每毫升样品中微生物细胞数每皿菌落平均数每皿菌落平均数 1/取样体积数取样体积数稀释倍数稀释倍数实验器材实验器材 无菌培育皿、天平、无菌培育皿、天平、90ml90ml无菌水，无菌水，9ml9ml无菌水、无菌水、无菌吸管、酒精灯、牛肉膏蛋白胨固体培育基、土无菌吸管、酒精灯、牛肉膏蛋白胨固体培育基、土壤。