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文档简介
1、部分发酵产品配方和工艺;青霉素菌种:产黄青霉H 110;培养基:发酵培养;6. 5,空气流量6L/min,转速300r/mi;发酵培养:种子培养基移入发酵罐后(接种量为:1O罐顶压力0. 06Mpa,用4mol/LNaoH和;发酵培养基:黄豆粉1.5%,棉籽粉2%花生粉3;种子培养阶段通风1:0 . 5 / m in.;头抱菌素发酵参考环境:51 0 0吨罐,搅拌转速1部分发酵产品配方和工艺青霉素菌种:产黄青霉H 110;培养基:发酵培养基,一玉米浆,磷酸二氢钾,碳酸钙,麸质粉,葡萄糖。将长好的种子移入 5m自动发酵罐。发酵过程各参数控制:PH值6. 06. 5,空气流量6L/min,转速30
2、0r/min,培养温度25r,单糖浓度46. 8%发酵全过程采 用控制补料。从60小时带放后每4小时补加一次玉米浆,每次补入35ml直到放罐。发酵单位测定 是利用高压液相色谱仪用外标法测定。发酵培养:种子培养基移入发酵罐后(接种量为:10%)培养温度维持在26 r,通气率为Ivvm,罐顶压力 0. 06Mpa 用 4mol/LNaoH和 1mol/LH2SO4t持 PH6 5 左右。发酵培养基:黄豆粉1.5%,棉籽粉2%花生粉3%磷酸二氢钾0.15%,硫酸铵1%碳酸钙0.15%葡萄糖0.30%,苯氧乙酸0.57%,硫酸钠0.54%,发酵菌种:产黄青霉,发酵周期 140小时。种子培养阶段通风1:
3、 0.5/min.头抱菌素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1: 1 /分,pH在7左右,(1)种子培养基:玉米浆、蔗糖、葡萄糖、DL一蛋氨酸、豆油、CaCO3 pH: 6.56.6。发酵培养基:玉米浆、淀粉、糊精、蛋氨酸、葡萄糖、豆油、 CaCO3,MgSO4,(NH4)2S0 4,FeSO4,MnSO4,ZnSO4,CuSO4pH: 6.06.1。发酵菌种采用顶头抱霉,周期 150小时螺旋霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1: 1 /分,pH在7左右,培养基主要成分为?,发酵菌种采用螺旋霉素链霉菌,发酵
4、周期130小时左右。 根据螺旋霉素生物合成的研究结果,短链脂肪酸是合成螺旋霉素的前体,结果发现在发酵培养48h后添加O. 5%浓度的乙醇,能够提高其发酵效价1O3左右(表2)加入豆油能较大幅度地提高螺旋霉 素的发酵效价。在培养48h时加入较在基础料中加入更能提高螺旋霉素发酵效价,豆油的浓度以1%为好。新霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1: 1/ 分,pH在7左右,培养基主要成分为热榨的黄豆饼粉,广东的酵母粉,福建的蛋白胨,发酵菌种 采用?菌,发酵周期130小时左右。推荐产品:DF6000K在新霉素发酵过程中,需不断补充碳源(糖)和氮源(硫酸铵)。
5、若一次补 人的糖量太多且供气不足时,碳源氧化不完全,会导致有机酸堆积,则pH值下降;当培养基中的蛋白质、氨基酸或其它含氮的有机物中碳被利用后,将释放出游离NH使pH值上升。同样,一次补人糖和硫酸铵量的多少,也会使发酵液的 pH值发生波动。因此,为了使产生菌生命活动及合成新 霉素的各种酶活力发挥得好,必须控制一定的补入量,以补充产生菌正常营养,调节发酵液pH值适合菌体的生长,发育,繁殖和新霉素的合成。在生产中控制pH值的最佳适宜范围在6. 56. 8之间。利福霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速115转/分,罐压0.5公斤,最高通风量1: 1 /分,pH在7左右,培养基主要成分为葡萄糖10%
6、,液化淀粉2%黄豆饼粉1%蛋白胨1%鱼粉0. 5%各种无机盐适量,发酵菌种采用地中海诺卡氏菌,发酵周期 130小时左右。红霉素发酵参考环境:10100吨罐,搅拌转速115转/分,最高通风量1:1/分,pH自然,发 酵菌种采用红色链霉菌;培养基主要成分 A:液化淀粉4%葡萄糖4%黄豆饼粉4%正丙醇1%无机盐适量B:黄豆饼粉4.0 %、葡萄糖4.0 %、淀粉4.0 %、糊精2.0%、CaCO30.%、(NH4)2SO40.15% KH2PO40.0%、NaC10.2% MgSO0.02% 28C,周期 160 小时。洁霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速115转/分,最高通风量1: 1/分,p
7、H在7左右, 发酵菌种采用链霉菌,发酵周期150小时。培养基()黄豆饼粉 2.5,玉米浆 0.6,(NH)2SO40.5, NaNO30.4 NaC10.6, CaCO30.9 玉米淀 粉 2.5,葡萄糖 3.0 , KH2PO40.07发酵工艺FBC培养温度:060h, 31C; 6C13Oh 30C;130h至放罐3C。种子培养基淀粉 20g/L,葡萄糖 15g/L.豆饼粉 25g/L , CSL30g/L, caco35. Og/L , pH7. 07. 21. 3. 3发酵培养基可溶性淀粉 30g/I,葡萄糖100g/L,豆饼粉30g/L , (NH4)2SO48.0g/L, NaNO
8、38.0g/L. KCI5.0g/L . CaCO39.0g/L, pH6. 57. 0菌种Lin 一 337:皖北药业股份有限公司选育、保存。1. 1. 2发酵培养基玉米淀粉,2.0 %;葡萄糖,4.0 %;黄豆饼粉,2.0 %;去酚棉子饼粉,0.5 %;玉米浆,0.6 %; 氯化钠,0.5 %;碳酸钙,0.5 %;硫酸铵,0.3 %;磷酸二氢钾,0.02 %;玉米油,0.06 %; GP 0. 03%发酵液初期粘度最大到130 mPas推荐产品:DF6000K配合豆油使用。洁霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速100转/分,通风量1 : 0.5/分,罐压0.7公斤,pH在 6.5 7,
9、培养基()黄豆饼粉 2.5%,玉米浆 0.6%, (NH)2SO40.5% NaNO34%NaC10.6% CaCO30.9% 玉米淀粉 2.5%,葡萄糖 3.0%, KH2PO40.07%培养温度:060h , 31C; 6C13Oh 30C ;130h至放罐31 r。发酵液初期粘度最大到130mPas发酵菌种采用链霉菌,发酵周期150小时。土霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速140转/分,通风量1 : 0.7/分,罐压0.7公斤,培养基主要成分为黄豆饼粉 3.0%,玉米浆0.65%,淀粉8.0%, (NH4)2SO41.2% NaCI0.2%, CaCO31. 1% KH2PO40.
10、015% 每罐外加 CoCI2500g。环抱素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速140转/分,通风量1 : 0.7/分,罐压0.7公斤, 发酵培养基组成:葡萄糖 2.0%,面粉4.0%,干酪素0.61.2%, NaNO30 15% KH2PO40.2% KCI0. 05% MgSO4 7H2O0.005% CaCO30.2% pH6.5,发酵时间 4 天左右,温度 25 度左右。通气和培养温度对CyA的生物合成量影响非常大,pH7. 5, 2%接种量接8g/ L。发酵菌种:褐纳他霉素发酵培养基:大豆蛋白胨l.8% ,酵母粉0.45%,葡萄糖3.6%, 种,进行纳他霉素发酵生产 96h,菌体生
11、物量为l2 . 65/L,最终产量为2. 黄抱链霉菌。1/分,罐压0.5公斤,庆大霉素发酵参考环境:5100吨罐,搅拌转速140转/分,通风量1:培养基主要成分为淀粉 4.0%,玉米粉2%黄豆饼粉3.0%,蛋白胨0.3%, (NH4)2SO40.1%CaCO30.5%每罐外加CoCI2810g/吨。PH7.58.0。发酵菌种采用庆大小单抱菌,发酵周期80小时。金霉素金色链霉菌经正交法筛选得到发酵培养基配方(%):玉米淀粉& 5,花生粉1. 5,黄豆粉2. 5,淀粉酶(沈丘酶制剂厂生产,酶活力 2000IU /mL)O 004,氯化钠0. 25,硫酸铵0. 5, 碳酸钙0. 7,蛋白胨1
12、. 0,酵母粉0. 2,硫酸镁0. 025,豆油1. Om/25mL培养基(见表4)。 在温度29C± 0. 5C,半径25mn偏心运动旋转摇床(ZP 96型),转速260r / min条件下培养16 6h。小诺霉素1. 1 菌种:棘抱小单抱(Micromonosporaechinospora)1. 2培养基种子培养基:黄豆饼粉l5g,葡萄糖1g,玉米粉20g,鱼粉2g,淀粉40g, pH7. 5,定容1L 发酵培养基:葡萄糖5g,淀粉40g,玉米粉15g,黄豆饼粉25g,蛋白胨2g,硫酸铵O.5g, pH7.2, 定容1L再生培养基:斜面培养基添加蔗糖 68g,氯化镁10g,定容1
13、LP稳定液:见文献2。筛选出的MS 116菌株生理特性与出株有所不同,对其发酵条件进行 研究,认为最适宜温度应控制在 34C,其对氧的需求量较大,应注意改善供氧状况;培养基中应 使用热榨黄豆粉饼,浓度为3. 0%;葡萄糖浓度为0,2%。核黄素发酵参考环境:培养基主要成分为葡萄糖5100吨罐,搅拌转速140转/分,通风量1:1/分,罐压0.5公斤,30.0%,玉米浆2%无机盐适量。发酵菌种采用细菌,发酵周期40小时。5100吨罐,搅拌转速140转/分,通风量1 : 0.7/分,罐压0.7公斤,KH2PO4每罐外加二巯基苯并噻唑和 NaBr。pH在四环素发酵参考环境:培养基主要成分为液化淀粉,玉米
14、浆,黄豆粉, 6左右。推荐产品:DF204K红曲红色素菌种:Monascusruber6 一 X4(由宁夏瑞德公司提供)培养基固态培养基各成分质量分数:可溶性淀粉 5%,麦芽糖4%,蛋白胨2%,琼脂I . 8%2%液体发酵培养基种子培养基各成分质量浓度:豆粉20g/L,大米粉50g/L,KH2PO42 5g/L,NaNO3g/L MgSO4 7H204g/L,调节pH值为4. 5左右。液体发酵培养基各成分质量浓度:大米粉 100g/ L,NaNO37g/L 调节 pH值为 3. 5左右。多粘菌素发酵参考环境:1060吨罐,搅拌转速115转/分,通风量1: 1/分,pH在7左右, 发酵培养基主要
15、成分为玉米粉、液化淀粉、尿素、玉米浆,CaCO3发酵温度30度左右,周期32小时。在25m3发酵罐中发酵42小时,硫酸粘杆菌素效价达15.88万u/ml硫酸粘杆菌素是第二代抗菌促生长类饲料添加剂,是由多黏芽抱杆菌所产生的碱性多肽抗生 素,对畜禽等动物体内有害的革兰氏阴性菌具有强大的对抗杀菌作用。分子式及分子量:COLISTINA C53H1OON16O131169COLISTINBC52H98N16O131155硫酸粘杆菌素又名硫酸粘菌素、克利斯汀(Colistin)、多粘菌素E(PolymyxinE)、抗敌素等, 系由多粘轩菌培养液中获得的碱性琐环状多肽类(p o1y pep tidesys
16、tem)抗生素,是多粘菌素E1和E2的混合物。为白色粉末,易溶于水,耐热,消化道不易吸收,排泄迅速,毒性小,无副作用,不易产生耐 药菌株,是最安全的畜禽促生长抗生素之一。粘菌素主要对革兰氏阴性菌有很强的抗菌作用,几乎对 所有革兰氏阴性菌有效,对绿脓杆菌有显着作用。治疗时常与抗革兰氏阳性菌的杆菌肽锌合用;用作 饲料添加剂可刺激幼畜生长.提高饲料效率,防止肉鸡、猪、牛等畜禽传染性肠炎;防治大肠杆菌、 绿脓杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性菌引起的肠道疾病。硫酸粘菌素的抗菌作用机理colistin 属于polymyxins抗生素,故其抗菌作用机理与polymyxinB相似,首先吸附细菌细胞 璧,结合细胞膜中
17、脂蛋白的游离磷酸盐,使细胞成分(嘌呤和嘧啶)脱逸,从而细胞死亡,故具有杀菌作用,其最低的抑菌浓度为每升0.2 80单位。硫酸粘菌素的配伍性Colist in 不可与 Solublebarbiturates(可溶性巴比妥类)及 Cya nocobalaml(Vitami nB12)合做成溶液使用。临床应用硫酸粘菌素属于狭效性抗生素,它对革兰氏阴性菌如:Ecoil、Pseudomonas Salmonella、Shig ella、Aerobactor等引起的疾病有效,对革兰氏阳性菌无效,由于其毒性、副作用较低,故它在禽、 畜的临床应用上较多,它主要用于防治禽、畜的细菌性肠炎。我国1958年才开始赤
18、霉素的研究、生产和推广应用,并于1969年因为党的“九大召开及国庆20周年,故把赤霉素称之为九二 O.25nm发酵罐工业化生产试验2. 1试验材料与方法2.1. 1 菌种:G-1142.1. 2试验地点:2.1. 3培养基种子培养基(W/W):葡萄糖1 . 5,糊精1 . 0,花生粉1 . 5,MgSO4- 7HzO0 1,KH2PO40 1,消 泡剂0 . 2,自来水配制,自然pH值,6m3种子罐中投料3m3实罐消毒1210, 30分钟,冷却至28r 待接种。发酵培养基(W/W):玉米淀粉7. 0,饴糖2. 5;豆饼粉0. 3,花生粉1. 0,MgSO4 7H2O0 0 7,KH2PO40
19、14;消沫剂0. 05, a一淀粉酶0.05, 50m3发酵罐投料40m3 pH值自然,实罐消毒1 21"C, 30分钟,冷却至28r后接入种子培养液.2, 1. 4发酵设备;种子罐6m3二档搅拌.发酵罐体积50m3,三档搅拌.流加罐用另一种 子罐代替.2. 1. 5发酵条件种子罐:培养温度28 r士 I C,通风量I : IV / V,罐压0. 4-0. 5kg/cm2发酵罐:培养温度 28 士 l r,通风量 I : 0. 7v / V,罐压 0. 1-0. 15kg/cm2赤霉素发酵参考环境:1060吨罐,搅拌转速115转/分,通风量1: 1/分,培养温度大多采 用29
20、6;C32 °C。培养基的起始pH值控制在5.5左右,而将发酵过程的pH值维持在3.54.5之间为宜。种子培养基:葡萄糖 0.3g,蒸馏水lOOmI。豆饼粉1.5g,淀粉1.0g,葡萄糖1.0g,KH2PO40.lg,发酵培养基:豆饼粉(NH4)2SO40 05g,MgSO40.1g 自来水 lOOmI。a-淀粉酶0.003 %,pH5-5.5发酵周期130小时0.9 % .淀粉 7.0 %,葡萄糖 1.0 %, KH2PO40.1%,MgSO40.0坯,阿维菌素:种子培养基(g/L):酵培养基(g / L):淀粉pH7.07.2。淀粉 30,豆饼粉 20,酵母粉 2.0 , CoC
21、I2 6H200.0005,pH7. 07. 2。发50,玉米粉 l0,酵母粉 l0,豆饼粉 10. CaCO32.0 CoCl2 6HaO0 0005,妥布霉素发酵培养基:黄豆饼粉2.5 ;葡萄糖1.O;玉米粉1.O;玉米淀粉1.5 ; (NH4)2SO40.5;鱼粉O.4; MgS040.6;油1.0 ; Zn SO40.05 CaCO30.6温度37C,发酵时间112h左右。发酵菌种采用黑暗链霉菌。洛伐他汀培养基:淀粉,黄豆饼粉,葡萄糖,玉米浆,K2HPO4 (NH4)2S04, CaCO3发酵菌种米用红曲菌株,M.ruber。发酵周期10天。甾体激素氢化可的松菌种:蓝色犁头霉(As36
22、5),培养基()葡萄糖1.O,酵母膏0.23 ,玉米浆1.5,硫酸铵0.5 ; pH值6.46.5 ; m1), 28C培养24h,投入0.25%的RSA(发酵底物醋酯化合物:17a 一羟基孕甾一 4 一烯一 3, 2O一二酮一 21 一醋酸酯,RSA,然后转化3642h。综上所述,在利用整肠生菌(BacillusLicheniformis)等杆菌发酵生产杆菌肽中,由于前期微生物生长繁殖迅速,碳源消耗量较大。在发酵中后期的碳源主要用于杆菌肽次级代谢产物的合成, 故碳耗较平稳。所以碳源不宜过多,2%3%为宜。同时杆菌肽生产与其它抗菌素生长碳源不同, 实验表明,加入3%柠檬酸作为碳源最佳,以保证菌体迅速生长。如果中后期碳浓度过高,会引起 菌体生长太快,而减少杆菌肽合成。 所以,对碳源种类的选择和控制至关重要,在选择适合种类碳 源的条件下,碳源量的控制方法可采用碳
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