肾脏功检验ppt课件

1、第十五章第十五章 肾脏功能检验肾脏功能检验掌握掌握 二乙酰一肟法和酶偶联速率法测定血清尿素，碱二乙酰一肟法和酶偶联速率法测定血清尿素，碱性苦味酸法和酶偶联速率法测定血清肌酐以及内生肌酐去性苦味酸法和酶偶联速率法测定血清肌酐以及内生肌酐去除率，磷钨酸复原法和酶偶联比色法测定血清尿酸。除率，磷钨酸复原法和酶偶联比色法测定血清尿酸。熟习熟习 尿素、肌酐、内生肌酐去除率以及尿酸测定的临尿素、肌酐、内生肌酐去除率以及尿酸测定的临床意义，肾脏功能实验的选择原那么与评价，肾脏疾病的床意义，肾脏功能实验的选择原那么与评价，肾脏疾病的生物化学变化。生物化学变化。了解了解 肾脏的构造与功能。肾脏的构造与功能。 n

2、本章内容概要：本章内容概要：u概述概述u血清尿素测定血清尿素测定u血清肌酐测定血清肌酐测定u血清尿酸测定血清尿酸测定n本章教学要求：本章教学要求：第一节第一节 概概 述述一、肾脏的构造与功能一、肾脏的构造与功能二、肾脏疾病的生物化学变化二、肾脏疾病的生物化学变化三、肾脏功能实验的评价与选择原那三、肾脏功能实验的评价与选择原那么么 一、肾脏的构造与功能 ( (一一) ) 肾脏的构造肾脏的构造 外层的皮质外层的皮质 内层的髓质构成内层的髓质构成 肾本质肾本质肾小体肾小体 肾小管肾小管由由2028个肾锥体组成个肾锥体组成 u解剖学构造解剖学构造髓袢髓袢集合管集合管 乳头管乳头管肾盂肾盂输尿管输尿管2

3、 2肾血管肾血管 u肾脏的组织学构造肾脏的组织学构造肾单位肾单位肾小体肾小体肾小管肾小管肾小球肾小球肾小囊肾小囊近端小管近端小管髓袢细段髓袢细段远端小管远端小管1.1.肾单位肾单位: :肾脏的根本功能单位肾脏的根本功能单位 集集合合管管腹腹自自动动脉脉肾小球毛细血管网肾小球毛细血管网肾小管周围毛细血管网肾小管周围毛细血管网与髓袢平行的直小血管与髓袢平行的直小血管静静脉脉体循环体循环肾肾动动脉脉( (二二) ) 肾脏的功能肾脏的功能尿液的生成尿液的生成肾小管的内分泌功能肾小管的内分泌功能重要生化功能重要生化功能血液血液肾小球滤过肾小球滤过肾小管与集合管重吸收肾小管与集合管重吸收肾小管与集合管分泌

4、肾小管与集合管分泌尿液尿液此外，肾脏也是一些激素的代谢场所与靶器官此外，肾脏也是一些激素的代谢场所与靶器官1 1肾小球滤过功能肾小球滤过功能 u原尿的构成原尿的构成: :u 血液流过肾小球毛细血管网时，血浆中的水、小分子溶血液流过肾小球毛细血管网时，血浆中的水、小分子溶u质和小分子血浆蛋白，经过滤过膜滤入肾小囊腔构成原尿质和小分子血浆蛋白，经过滤过膜滤入肾小囊腔构成原尿 u肾小球滤过作用影响要素肾小球滤过作用影响要素: :肾小球滤过膜的通透性肾小球滤过膜的通透性(d7nm) 有效滤过压有效滤过压肾血流量肾血流量(RBF) 肾小球滤过率肾小球滤过率(glomerular filtration r

5、ate(glomerular filtration rate，GFR) GFR) 正常正常GFR约为约为120ml/min。 影响影响肾小球毛细血管血压肾小球毛细血管血压血浆胶体浸透压血浆胶体浸透压肾小囊内压肾小囊内压肾小球滤过膜构造肾小球滤过膜构造K、Na+、葡萄糖、氨基酸等、葡萄糖、氨基酸等 分子量超越分子量超越69KD，半径大于，半径大于4nm的物质的物质 带负电荷的物质带负电荷的物质 正电荷和中性分子正电荷和中性分子 2 2肾小管和集合管重吸收功能肾小管和集合管重吸收功能 原尿量约原尿量约180L 180L 排出的尿量仅为排出的尿量仅为1.5L1.5L99%以上的滤液在流经肾小管和以上

6、的滤液在流经肾小管和集合管时被重吸收回到血液集合管时被重吸收回到血液 (1) (1) 肾小管重吸收的方式肾小管重吸收的方式 自动重吸收自动重吸收被动重吸收被动重吸收 (2) (2) 肾小管重吸收的部位肾小管重吸收的部位 近端小管：肾小管的重吸收作用主要在此段进展近端小管：肾小管的重吸收作用主要在此段进展髓袢：肾小管液部分髓袢：肾小管液部分Na+，水重吸收。，水重吸收。 “逆流倍增逆流倍增 在尿液的浓缩和稀释在尿液的浓缩和稀释远端小管与集合管：滤液中部分远端小管与集合管：滤液中部分Na+和水在远端小管和集和水在远端小管和集合管被重吸收合管被重吸收 Na+(自动转运，激素调理自动转运，激素调理 逆

7、浓度差，耗能逆浓度差，耗能顺浓度差或电位差，不耗能顺浓度差或电位差，不耗能葡萄糖、氨基酸、葡萄糖、氨基酸、K+K+、Na+Na+、Ca2+Ca2+、Cl- Cl- 尿素和水尿素和水 3 3肾小管和集合管的排泌功能肾小管和集合管的排泌功能 (1)(1)近端小管、远端小管和集合管的泌近端小管、远端小管和集合管的泌H+H+功能功能(2)(2)远端小管和集合管泌远端小管和集合管泌NH3NH3功能功能(3)(3)远端小管和集合管泌钾功能远端小管和集合管泌钾功能(4)(4)近端小管的排泌代谢产物和外源性物质功能近端小管的排泌代谢产物和外源性物质功能H+ H+ 、NH4+NH4+、K+K+、代谢产物以及进入

8、机体的外源性物质、代谢产物以及进入机体的外源性物质 4 4肾脏的内分泌功能肾脏的内分泌功能 肾素、前列腺素、缓激肽、促红细胞生成素及肾素、前列腺素、缓激肽、促红细胞生成素及1 1，25-25-OHOH2D3 2D3 二、肾脏疾病的生物化学变化二、肾脏疾病的生物化学变化u急性肾小球肾炎：少尿、血尿、蛋白尿、高血压、水肿、急性肾小球肾炎：少尿、血尿、蛋白尿、高血压、水肿、GRF降低降低 u肾病综合征：大量蛋白尿、低清蛋白血症高脂血症和严重水肿肾病综合征：大量蛋白尿、低清蛋白血症高脂血症和严重水肿 u急性肾功能衰竭：电解质和酸碱平衡引起氮质血症、高血钾、代急性肾功能衰竭：电解质和酸碱平衡引起氮质血症

9、、高血钾、代谢性酸中毒等谢性酸中毒等u慢性肾功能衰竭：代谢废物潴留，水、电解质和酸碱平衡失调慢性肾功能衰竭：代谢废物潴留，水、电解质和酸碱平衡失调 u肾小管性酸中毒：肾小管泌肾小管性酸中毒：肾小管泌H+和重吸收和重吸收HCO3-功能妨碍，临床功能妨碍，临床出现酸中毒出现酸中毒三、肾脏功能实验的评价与选择原那么三、肾脏功能实验的评价与选择原那么u肾小球滤过功能实验肾小球滤过功能实验u肾小球滤过率肾小球滤过率u血肌酐血肌酐(creatinine(creatinine，Cr)Cr)测定测定u血尿素血尿素(urea(urea，Urea)Urea)测定测定u血尿酸血尿酸(uric acid(uric a

10、cid，UA)UA)测定测定u肾小管功能实验肾小管功能实验u肾近端小管重吸收功能实验肾近端小管重吸收功能实验u肾小管排泌功能实验肾小管排泌功能实验u肾小管浓缩和稀释功能实验肾小管浓缩和稀释功能实验 u肾小管和集合管酸碱调理功能实验肾小管和集合管酸碱调理功能实验 u肾血流量测定：单位时间内流经肾脏的全血或血浆肾血流量测定：单位时间内流经肾脏的全血或血浆量量 u肾有效血浆流量肾有效血浆流量=(UPAH=(UPAHV)/PPAHV)/PPAHu肾血浆流量肾血浆流量= ERPF /(90%)= ERPF /(90%)u 肾全血流量肾全血流量(RBF)=RPF/(1-RBC(RBF)=RPF/(1-RB

11、C比积比积) )u尿蛋白检查尿蛋白检查u肾小球性蛋白尿检查肾小球性蛋白尿检查u肾小管性蛋白尿检查肾小管性蛋白尿检查u肾功能实验的选择原那么肾功能实验的选择原那么u 针对肾脏疾病类型、病程等临床诊断和治针对肾脏疾病类型、病程等临床诊断和治疗选择相应的肾功能实验工程或工程组合，便于对肾疗选择相应的肾功能实验工程或工程组合，便于对肾脏疾病的早期诊断脏疾病的早期诊断 肾小球滤过率肾小球滤过率 PVUC式中式中C C：去除率，：去除率，P P：血中浓度，：血中浓度，U U：尿中浓度，：尿中浓度，V V：单位时间尿量。：单位时间尿量。 血浆中某物质经肾脏时，能从肾小球自在滤过血浆中某物质经肾脏时，能从肾小

12、球自在滤过,既不被肾小管重吸既不被肾小管重吸收收,也不被肾小管分泌也不被肾小管分泌,该物质的去除率就可以代表该物质的去除率就可以代表GFR 菊粉、肌酐、甘露醇菊粉、肌酐、甘露醇 内生肌酐去除率内生肌酐去除率(Ccr)(Ccr)实验：检测实验：检测GFRGFR最常用最常用 单位时间内肾排出某物质的总量与同一时间该物质血浆浓度之比：单位时间内肾排出某物质的总量与同一时间该物质血浆浓度之比：用于用于GFRGFR测定的物质测定的物质: :表示方法表示方法: :肾去除率肾去除率菊粉去除率实验菊粉去除率实验CinCin ：测定：测定GFRGFR的的“金规范金规范肾血流量测定肾血流量测定肾血流量或肾血浆流量

13、肾血流量或肾血浆流量 是指单位时间内流经肾脏的全血或血浆量是指单位时间内流经肾脏的全血或血浆量 低浓度的对氨基马尿酸低浓度的对氨基马尿酸(PAH)(PAH)肾去除实验肾去除实验 肾有效血浆流量肾有效血浆流量=(UPAH=(UPAHV)/PPAHV)/PPAH肾血浆流量肾血浆流量= ERPF /(90%)= ERPF /(90%)肾全血流量肾全血流量(RBF)=RPF/(1-RBC(RBF)=RPF/(1-RBC比积比积) ) 当血浆中PAH浓度50mg/L时，流经肾脏血浆中的PAH约90%从肾脏去除，另有10%从肾的非排泌部分回到肾静脉。故PAH去除率只代表有功能肾本质的血浆流量，即有效肾血浆

14、流量ERPF参考范围：RPF 600800ml/min，RBF 1 2001 400ml/min 蛋白尿选择性指数蛋白尿选择性指数u选择性蛋白尿选择性蛋白尿 肾脏疾病早期，肾小球滤过膜电荷屏障损伤，尿中排出的蛋白质肾脏疾病早期，肾小球滤过膜电荷屏障损伤，尿中排出的蛋白质为小分子蛋白质，以清蛋白质为主为小分子蛋白质，以清蛋白质为主 u非选择性蛋白尿非选择性蛋白尿 肾脏疾病较为严重时，肾小球滤过膜分子屏障被破坏，尿中除清肾脏疾病较为严重时，肾小球滤过膜分子屏障被破坏，尿中除清蛋白外，还有分子量较大的蛋白质蛋白外，还有分子量较大的蛋白质( (如分子量为如分子量为150kD150kD的的IgG) Ig

15、G) uSPI:SPI:判别肾小球滤过膜的屏障情况判别肾小球滤过膜的屏障情况 SPI=(尿尿IgG/血血IgG)/(尿尿Tf/血血Tf)n非蛋白氮化合物：非蛋白氮化合物： 尿素、尿酸、肌酐、肌酸、氨、氨基酸、核苷酸等尿素、尿酸、肌酐、肌酸、氨、氨基酸、核苷酸等 n测定的意义：测定的意义： 非蛋白氮化合物是体内蛋白质、肌酸、核酸等的代谢产物，非蛋白氮化合物是体内蛋白质、肌酸、核酸等的代谢产物，均由肾脏排泄，在一定程度上反映了肾脏的功能，是临床常用均由肾脏排泄，在一定程度上反映了肾脏的功能，是临床常用的肾功能目的。的肾功能目的。非蛋白氮测定非蛋白氮测定第二节第二节 血清尿素测定血清尿素测定一、测定

16、方法简介一、测定方法简介u直接法直接法 血清尿素直接与试剂作用，产生显色反响进展测定血清尿素直接与试剂作用，产生显色反响进展测定 u间接法间接法 利用尿素酶催化血清尿素分解生成氨或铵盐，然后用纳氏试剂显色法、酚-次氯酸盐显色法、酶偶联法、电导法测定氨的量，再换算成尿素 ( (一一) ) 二乙酰一肟法二乙酰一肟法原理：原理：Fearon反响反响 540nm540nm处有吸收峰处有吸收峰 尿液先用去离子水作尿液先用去离子水作1：50稀释后再测定稀释后再测定 ( (二二) ) 尿素酶法尿素酶法第一步：第一步： 首先利用尿素酶首先利用尿素酶( (脲酶脲酶) )催化尿素水解生成铵盐，铵盐在碱催化尿素水解

17、生成铵盐，铵盐在碱性条件下释放出氨。然后再用不同的方法测定铵盐或氨，在测性条件下释放出氨。然后再用不同的方法测定铵盐或氨，在测定过程中需防止外源性氨的污染。定过程中需防止外源性氨的污染。原理原理:酶偶联速率法：酶偶联速率法： 第二步：第二步： 纳氏试剂显色法：纳氏试剂显色法：或或酚酚- -次氯酸盐显色法：次氯酸盐显色法： 波氏法波氏法 或或或或电导法电导法铵离子使电导添加，电导添加程度与产生的铵离子浓度成正比关系铵离子使电导添加，电导添加程度与产生的铵离子浓度成正比关系NADH方法评价：方法评价：二乙酰一肟法：二乙酰一肟法： 灵敏度高、操作较为简便灵敏度高、操作较为简便, ,线性范围较窄线性范

18、围较窄150mmol/L150mmol/L特异性不高；本法难以实现自动化，目前临床上已很少运用。特异性不高；本法难以实现自动化，目前临床上已很少运用。脲酶法脲酶法( (纳氏试剂与波氏法纳氏试剂与波氏法) )： 特异性强，反响专注，但易受体液及环境中氨的干扰，因特异性强，反响专注，但易受体液及环境中氨的干扰，因此测定时需严防外源性氨的污染。普通用于手工操作测定，适此测定时需严防外源性氨的污染。普通用于手工操作测定，适宜基层单位开展；但试剂稳定性差。宜基层单位开展；但试剂稳定性差。酶偶联速率法：酶偶联速率法：准确度和灵敏度较高，多用于自动分析系统，试剂较贵准确度和灵敏度较高，多用于自动分析系统，试

19、剂较贵电导法：电导法：准确性高，反响所需时间很短，适宜自动化分析，但规范实验条件有一定困难。准确性高，反响所需时间很短，适宜自动化分析，但规范实验条件有一定困难。血清尿素：血清尿素：1.781.787.14 mmol/L7.14 mmol/L。参考范围：参考范围：二、尿素测定的临床意义二、尿素测定的临床意义血液尿素浓度增高血液尿素浓度增高1 1生理性：高蛋白饮食，年龄添加生理性：高蛋白饮食，年龄添加2 2病理性病理性 肾前性肾前性: :失水失水 肾性肾性: :影响肾小球滤过的疾病影响肾小球滤过的疾病 肾后性肾后性: :尿路阻塞的要素尿路阻塞的要素 2 2血尿素浓度降低血尿素浓度降低 婴儿孕妇低

20、蛋白高糖饮食者婴儿孕妇低蛋白高糖饮食者肝功能衰竭肝功能衰竭 由于肾脏有强大的贮藏才干，因此，仅在肾小球滤过率下降至正常的由于肾脏有强大的贮藏才干，因此，仅在肾小球滤过率下降至正常的50以下时，血浆或血清中尿素浓度才会升高，故该目的灵敏度不高，不以下时，血浆或血清中尿素浓度才会升高，故该目的灵敏度不高，不能作为早期肾功能目的。能作为早期肾功能目的。第三节第三节 血清肌酐测定血清肌酐测定一、测定方法简介一、测定方法简介 血血( (尿尿) )中肌酐测定的方法主要有中肌酐测定的方法主要有JaffeJaffe法、酶偶联法、高法、酶偶联法、高效液相色谱法。效液相色谱法。在控制外源性肌酐摄取时，测定血清肌酐

21、可作为肾滤过功能的目的。在控制外源性肌酐摄取时，测定血清肌酐可作为肾滤过功能的目的。 一一 Jaffe Jaffe反响法反响法 肌酐与苦味酸盐碱性溶液反响，生成黄红色的碱性肌肌酐与苦味酸盐碱性溶液反响，生成黄红色的碱性肌酐苦味酸复合物，该反响称为酐苦味酸复合物，该反响称为JaffeJaffe反响苦味酸反响反响苦味酸反响 原理：原理：方法学评价：最常用的方法方法学评价：最常用的方法,简便、快速不需去蛋白，简便、快速不需去蛋白，但是特异性差但是特异性差 假肌酐：一些与碱性苦味酸生成红色的物质假肌酐：一些与碱性苦味酸生成红色的物质 维生素维生素C C、丙酮、乙酰乙酸、丙酮、乙酰乙酸、-酮酸、胆红素、

22、葡萄糖、酮酸、胆红素、葡萄糖、蛋白质以及头孢菌素类抗生素、强心甙、甲基多巴等蛋白质以及头孢菌素类抗生素、强心甙、甲基多巴等 排除假肌酐的干扰：排除假肌酐的干扰： 吸附法吸附法速率法速率法二次读数法二次读数法在手工操作中制备无蛋白滤液或参与十二烷基硫酸钠去除在手工操作中制备无蛋白滤液或参与十二烷基硫酸钠去除蛋白质干扰，在延续流动自动化生化分析仪中可采用透析器蛋白质干扰，在延续流动自动化生化分析仪中可采用透析器去除蛋白质。去除蛋白质。在缓冲液中参与硼酸盐消除葡萄糖、维生素在缓冲液中参与硼酸盐消除葡萄糖、维生素C C的干扰。的干扰。 参考范围：男性：参考范围：男性：44133mol/L；女性：；女性

23、：70106mol/L ( (三三) )高效液相色谱法高效液相色谱法二酶偶联速率法：二酶偶联速率法： 1 1肌酐酶法肌酐酶法2 2肌氨酸氧化酶法肌氨酸氧化酶法3 3谷氨酸脱氢酶法谷氨酸脱氢酶法在在340nm340nm处监测吸光度值的降低，可丈量肌酐含量。处监测吸光度值的降低，可丈量肌酐含量。不需化学方法处置直接用紫外光不需化学方法处置直接用紫外光233nm233nm测定测定 二、肌酐测定的临床意义二、肌酐测定的临床意义反映肾小球滤过率减退的后期目的反映肾小球滤过率减退的后期目的 血清肌酐浓度升高提示肾脏的病变较重，临床上常作为血清肌酐浓度升高提示肾脏的病变较重，临床上常作为氮质血症、肾功能衰竭

24、、尿毒症的诊断和病情察看目的。氮质血症、肾功能衰竭、尿毒症的诊断和病情察看目的。2. 2. 判别肾功能损伤的程度判别肾功能损伤的程度血清肌酐浓度可以初步判别肾功能损伤的程度：血清肌酐浓度可以初步判别肾功能损伤的程度：轻度肾损伤轻度肾损伤178mol/L178mol/L。中度肾损伤中度肾损伤178mol/L(178mol/L(氮质血症氮质血症) )。重度肾损伤重度肾损伤445mol/L(445mol/L(肾功能衰竭肾功能衰竭) )。尿毒症尿毒症1800mol/L1800mol/L。三、内生肌酐去除率测定三、内生肌酐去除率测定 原理：原理： 经过测定已控制外源性肌酐摄取的病人血清和尿液中经过测定已

25、控制外源性肌酐摄取的病人血清和尿液中肌酐的含量，计算肌酐的含量，计算24h或每分钟有多少毫升血浆中肌酐被肾或每分钟有多少毫升血浆中肌酐被肾脏去除的值即为脏去除的值即为Ccr。 操作：操作： 1. 受试者延续禁食肉类受试者延续禁食肉类3d无肌酐饮食，不要饮茶无肌酐饮食，不要饮茶或咖啡，停顿服用利尿剂，实验前防止猛烈运动，饮足够或咖啡，停顿服用利尿剂，实验前防止猛烈运动，饮足够量的水，使尿量不少于量的水，使尿量不少于1ml/min。 2. 于第于第4d早晨早晨8时抽空腹静脉血时抽空腹静脉血3ml并分别出血清低温并分别出血清低温保管，同时将尿液排空、弃去，然后搜集至第保管，同时将尿液排空、弃去，然后

26、搜集至第5d早晨早晨8时时24h的全部尿液，参与的全部尿液，参与45ml甲苯以防腐。甲苯以防腐。 3. 测定尿及血清肌酐含量和丈量测定尿及血清肌酐含量和丈量24h尿量。尿量。 4. 丈量受试者身高与体重丈量受试者身高与体重(kg)。计算计算 24h24h内内CcrCcr： 4h4h尿及空腹一次性取血，测每分钟尿量和每分钟尿及空腹一次性取血，测每分钟尿量和每分钟CcrCcr： 内生肌酐去除率测定的临床意义内生肌酐去除率测定的临床意义 是判别肾小球滤过功能的敏感目的是判别肾小球滤过功能的敏感目的2. 2. 初步判别肾功能的损害程度初步判别肾功能的损害程度3. 3. 指点治疗指点治疗4. 4. 慢性

27、肾炎临床分型的参考慢性肾炎临床分型的参考第四节第四节 血清尿酸的测定血清尿酸的测定一、测定方法简介一、测定方法简介 磷钨酸复原法磷钨酸复原法尿酸酶法尿酸酶法HPLC法法一磷钨酸法一磷钨酸法 将血、尿样本制备成去蛋白滤液，具有复原性的尿酸将血、尿样本制备成去蛋白滤液，具有复原性的尿酸在碱性环境中使磷钨酸复原成蓝色的钨蓝，在碱性环境中使磷钨酸复原成蓝色的钨蓝，650650700nm700nm处处比色测定。比色测定。 此法缺陷是特异性不高，灵敏度低，显色不稳定。此法缺陷是特异性不高，灵敏度低，显色不稳定。1. 1. 直接紫外分光法直接紫外分光法2. 2. 酶偶联比色法酶偶联比色法3. 3. 酶联酶联- -紫外分光法紫外分光法二尿酸酶法二尿酸酶法 尿酸在尿酸在282282292nm292nm处有特异吸收峰，经尿酸酶作用处有特异吸收峰，经尿酸酶作用后，生成的尿囊素在后，生成的尿囊素在282282292nm292nm无吸收峰，丈量尿酸酶无吸收峰，丈量尿酸酶作用前后吸光度之差，可计算血作用前后吸光度之差，可计算血( (尿尿) )中尿酸含量。中尿酸含量。 该法灵敏度高，特异性强，其他物质无干扰；血清该法灵敏度高，特异性强，其他物质无干扰；血清样本可直接测定，不需沉淀蛋白、易于自动化，具有简样本可直接测定，不需沉淀蛋白、易于自