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文档简介
1、血球计数板是一种常见的计数工具。在高中生物学中,血球计数板被用于实验 “培养液中酵母菌种群数量的动态变化”中酵母菌数量的计数。 一、高考真题 1.( 2008 年江苏省高考第31 题)( 4)在整个实验过程中,直接从静置的培养瓶中取培养原液计数的做法是错误的,正确的方法是和 。( 5)实验结束后,用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的,正确的方法是。 解析试题的设计从血球计数板的实验方法入手,需要对实验操作的正误进行判断。静置的培养液中酵母菌可能沉淀到培养瓶下部。若取样时取的是原液底部,则统计出的数据可能偏大,取的是原液上部时,统计处的数据将偏小,因此取样前需摇匀。清洗计数板时,先用洗液
2、浸泡,再用清水冲洗,在冲洗时切忌擦计数室,以免磨损计数室网格。 答案( 4)摇匀培养液后再取样培养后期的样液稀释后再计数( 5)浸泡和冲洗由以上可知,近年的高考题着重于对血球计数板使用目的、使用的步骤以及计数时的注意事项的考查,对计数过程中涉及的计算并未涉及,因此下面对高考真题中涉及的考点进行分析总结,并对未涉及的具体计算问题进行了介绍, 二、血球计数板构造血球计数板是一块较厚的特制玻片,其玻片中有四条凹槽,构成三个平台。中间的平台较宽,且又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网(图 1)。方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室(图2)。这一大方格的长和宽各为1mm,深
3、度为0.1 mm (盖上盖玻片后计数室的高),其容积为0.1 mm3,每个大方格分25个中格,每个中格又分为16个小方格(25X 16 型)如图3,或每个大方格分16个中格,每个中格又分为25个小方格(16X 25 型),共400 个小格。 例 1 有关 “探究培养液中酵母菌数量动态变化”的实验,正确的叙述是()a.改变培养液的ph不影响k值(环境容纳量)大小b.用样方法调查玻璃容器中酵母数量的变化c.取适量培养液滴于普通载玻片后对酵母菌进行计数d.营养条件并非影响酵母菌种群数量变化的唯一因素 解析养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素, ph 变化将影响酵母菌的生长。
4、对酵母菌计数时应该用血球计数板,为样方法。酵母菌体积小,计数时需在显微镜下进行,因此玻璃容器内的酵母菌数量不宜直接观察。 答案 d 四、计数原则( 1)如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。( 2)活酵母有芽殖现象,若芽体达到母细胞大小的一半时,即可作为两个菌体计数,若芽体小于母细胞一半时为1 个酵母细胞。( 3)对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数,一般可采取 “计上不计下,计左不计右 ”的原则,另两边不计数。计数时,如果使用16X 2甄格的计数室,要按对角线位,取左上、右上、左下、右下 4个中格 (即100个小格)的酵母菌数(如图
5、4中黑色部分);如果规格为25格X1解的计数板,除了取其4 个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80 个小方格)的酵母菌数(如图5 黑色部分)。16 x 25s的计数板中酉母细胞个数/1ml=100个小方格细胞总数/100 X400X 100糅倍数;25 x 16s的计数板中酉母细胞个数/1 ml =80个小方格细胞总数/80 x 400X 10 00#释倍数 例 2 下图为不同培养阶段酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变 化曲线,请回答下列问题:某同学在t3 时取样,统计的酵母菌种群数量明显高于d 对应的数量,原因可能有 、 和用血球计数板计数时出现错误等。 解析取样前培养液是否摇匀
6、会影响酵母菌的计数。从曲线看,在t2t3时,酵母菌数量下降,表明培养液中有死酵母菌存在,用血球计数板进行计数时死亡酵母菌也统计在内,而种群数量统计的是存活的个体数,因此种群数量偏高。对此可以用采用活体染色法,如美蓝,当它处于氧化状态时呈现出蓝色,而还原态时为无色,故活细胞表现出无色;而死细胞呈蓝色或者淡蓝色。 答案取样时培养液未摇匀,从底部取样未染色,统计的菌体数包含了死亡的菌体 巩固训练1 .通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm< 1mrtK0.1mm 方格,由400个小方格组成,如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应先稀释后再计数。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5 个酵母菌,则10 ml 该培养液中酵母菌总数有个。2 .检测员将1ml 水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。
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