土壤中分解尿素的细菌的分离和计数课件ppt课件

1、标标准准培养基类型培养基类型配制特点配制特点主要应用主要应用物物理理性性质质固体培养基固体培养基加入琼脂较多加入琼脂较多微生物的分离、计数等微生物的分离、计数等半固体培养基半固体培养基加入琼脂较少加入琼脂较少观察微生物运动、鉴定观察微生物运动、鉴定菌种、保藏菌种等菌种、保藏菌种等液体培养基液体培养基不加入琼脂不加入琼脂工业生产，连续培养工业生产，连续培养化化学学组组成成合成培养基合成培养基由已知成分配制而成，由已知成分配制而成，培养基成分明确培养基成分明确菌种分类、鉴定菌种分类、鉴定天然培养基天然培养基由天然成分配制而成，由天然成分配制而成，培养基成分不明确培养基成分不明确工业生产工业生产目目

2、的的用用途途鉴别培养基鉴别培养基添加某种指示剂或化学药品添加某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类的微生物选择培养基选择培养基添加（或缺少）某种化学物质添加（或缺少）某种化学物质 培养、分离出特定的培养、分离出特定的微生物微生物培育基：详细配方可以不同，但普通都含有水、碳源、培育基：详细配方可以不同，但普通都含有水、碳源、 氮源和无机盐。氮源和无机盐。 12+H2O345678 1 1、分析该配方的培育基对微生物能否具有挑、分析该配方的培育基对微生物能否具有挑选作用？假设有，又是如何进展挑选的？选作用？假设有，又是如何进展挑选的？ 有挑选作用。尿素是培育基中的独一氮源，有挑选作用

3、。尿素是培育基中的独一氮源，因此，原那么上只需可以利用尿素的微生物才可因此，原那么上只需可以利用尿素的微生物才可以生长。以生长。答：不一定，有些微生物可以利用其他微生物答：不一定，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁衍，因此可以在选择培育基的代谢产物生长繁衍，因此可以在选择培育基上生长的微生物不一定是所需求的微生物，还上生长的微生物不一定是所需求的微生物，还需求进一步的验证。需求进一步的验证。 2、只需可以在选择培育基上生长的微生物能否就、只需可以在选择培育基上生长的微生物能否就是所需求的微生物？是所需求的微生物？910以尿素为以尿素为独一氮源独一氮源的培育基的培育基牛肉膏牛肉膏蛋白胨

4、蛋白胨培育基培育基是分别分别尿素尿素细菌细菌判别该判别该培育基培育基有无选有无选择性择性实验组实验组对照组对照组培育基类型培育基类型能否能否接种接种 目的目的 结果结果只生长尿只生长尿素细菌素细菌生长多种生长多种微生物微生物是是1112液的体积液的体积(ml)(ml)； M M 代表稀释倍数。代表稀释倍数。 当样品的稀释度足够高时，培育基表当样品的稀释度足够高时，培育基表 面生长的一个菌落，来源于样品稀释面生长的一个菌落，来源于样品稀释 液中的一个活菌，经过统计平板上的液中的一个活菌，经过统计平板上的 菌落数，就能推测出样品中大约含有菌落数，就能推测出样品中大约含有 多少活菌。多少活菌。13普

5、通以三个稀释度中的第二个稀释度普通以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在所出现的平均菌落数在5050个左右为最个左右为最好。好。14 例：两位同窗用稀释涂布平板法测定同例：两位同窗用稀释涂布平板法测定同 一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106106的培育基中，得到以下两种统计结果。的培育基中，得到以下两种统计结果。 1 1、甲同窗在该浓度下涂布了一个平板，统计的、甲同窗在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为菌落数为230230。 2 2、乙同窗在该浓度下涂布了、乙同窗在该浓度下涂布了A A、B B、C C三个平板，三个平板，统计的菌落数分

6、别为统计的菌落数分别为2121、212212、256256，该同窗以这三，该同窗以这三个平板上菌落数的平均值个平板上菌落数的平均值163163作为统计结果。作为统计结果。 他以为这两位同窗的作法正确吗？假设有问题，他以为这两位同窗的作法正确吗？假设有问题，错在哪？错在哪？ 甲：没有反复实验至少涂布甲：没有反复实验至少涂布3 3个平板个平板 乙：乙：A A组结果误差过大，不运用于计算平均值组结果误差过大，不运用于计算平均值15三设置对照三设置对照 1 1、设置对照的目的：、设置对照的目的： 排除实验组中非测试要素对实排除实验组中非测试要素对实验结果的影响，提高实验结果的可验结果的影响，提高实验结

7、果的可信度。信度。 对照实验是指除了对照实验是指除了 被测试被测试 的条的条件外，其他条件都件外，其他条件都 一样一样 的实验。的实验。满足该条件的称为满足该条件的称为 对照组，未满足对照组，未满足该条件的称为该条件的称为 实验实验 组。组。162.设置对照的方法：设置对照的方法：空白对照：不给对照组任何处置要素。空白对照：不给对照组任何处置要素。条件对照：给对照组施以部分实验要素，但不是所要研讨的条件对照：给对照组施以部分实验要素，但不是所要研讨的 处置要素。处置要素。本身对照：对照组和实验组都在同一研讨对象上进展。本身对照：对照组和实验组都在同一研讨对象上进展。相互对照：不单设对照组，而是

8、几个实验组相互对照。相互对照：不单设对照组，而是几个实验组相互对照。课本课本2323页例子中页例子中A A同窗的结果与其他同窗的结果与其他同窗不同，能够的解释有两种，怎样办？同窗不同，能够的解释有两种，怎样办？一是由于土样不同；一是由于土样不同；二是由于培育基污染混入其他二是由于培育基污染混入其他N源或操作失误。源或操作失误。171819 由于初次实验，对于稀释的范围没有把握，因此由于初次实验，对于稀释的范围没有把握，因此选择了一个较为广泛的范围：稀释倍数为选择了一个较为广泛的范围：稀释倍数为103103107107。 预备牛肉膏蛋白胨培育基和以尿素为独一氮源的预备牛肉膏蛋白胨培育基和以尿素为

9、独一氮源的选择培育基。每个稀释度下需求选择培育基。每个稀释度下需求3 3个选择培育基，个选择培育基，1 1个牛个牛肉膏蛋白胨培育基。还需求肉膏蛋白胨培育基。还需求8 8个灭菌试管和个灭菌试管和1 1个灭菌移液个灭菌移液管管 。 将稀释一样倍数的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基将稀释一样倍数的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基上生长的菌落数目应明显多于选择培育基上的数目，因上生长的菌落数目应明显多于选择培育基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培育基可以作为对照，用来判别选择此，牛肉膏蛋白胨培育基可以作为对照，用来判别选择培育基能否起到了选择作用。培育基能否起到了选择作用。2021测定土壤中细菌的数量，普通选用104

10、105106测定放线菌的数量，普通选用103104105测定真菌的数量，普通选用10210310422问题：为什么分别不同的微生物要采用不同的稀问题：为什么分别不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围一样吗？解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围一样吗？23实验时要实验时要对培育皿作对培育皿作好标志。注好标志。注明培育基类明培育基类型、培育时型、培育时间、稀释度、间、稀释度、培育物等。培育物等。假设得到了假设得到了2个或个或2个以上菌落数目在个以上菌落数目在30300的平板，的平板，那么阐明稀释

11、操作比较胜利，并可以进展菌落的计数，那么阐明稀释操作比较胜利，并可以进展菌落的计数，假好像一稀释倍数的三个反复的菌落数相差较大，阐明假好像一稀释倍数的三个反复的菌落数相差较大，阐明实验不准确，需求重新实验。实验不准确，需求重新实验。242526 三、操作提示三、操作提示27大，表示实验不准确。大，表示实验不准确。2829303132六、例题解析六、例题解析 例例1 1对细菌群体生长规律测定的正确的表述是对细菌群体生长规律测定的正确的表述是A A在液体培育基上进展在液体培育基上进展 B B至少接种一种细菌至少接种一种细菌 C C接种一个细菌接种一个细菌 D D及时补充耗费的营养物质及时补充耗费的

12、营养物质 解析：细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进展的。解析：细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进展的。这些条件是：一种细菌、恒定容积的培育基，液体培育基、定这些条件是：一种细菌、恒定容积的培育基，液体培育基、定时测定细菌总数。在这些条件下，才干测定出细菌的生长规律。时测定细菌总数。在这些条件下，才干测定出细菌的生长规律。测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长；恒定容积是给微生物提供一定的生存环境；液体培育基生长；恒定容积是给微生物提供一定的生存环境；液体培育基才干经过样品推测细菌总数。假设接种多种细菌，那

13、么会发生才干经过样品推测细菌总数。假设接种多种细菌，那么会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时，要保种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时，要保证一定的接种量。证一定的接种量。答案：答案：A A33例例2 2在微生物群体生长规律的测定中，种内在微生物群体生长规律的测定中，种内斗争最显著最猛烈的时期是斗争最显著最猛烈的时期是A A调整期调整期 B B对数期对数期 C C稳定期稳定期 D D衰亡期衰亡期解析：种内斗争是一种生态要素。种内斗争反响了种内生物解析：种内斗争是一种生态要素。种内斗争反响了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间富余，营养充足的时对生存空间和

14、生活资源的争夺。在生活空间富余，营养充足的时候，种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的添加，候，种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的添加，每个个体的生存空间越来越少，营养物质也越来越少，每个个体每个个体的生存空间越来越少，营养物质也越来越少，每个个体对生存空间和资源的争夺也越来越猛烈，种内斗争就越来越猛烈。对生存空间和资源的争夺也越来越猛烈，种内斗争就越来越猛烈。由此可知，在稳定期的种内斗争最猛烈。在衰亡期，微生物的数由此可知，在稳定期的种内斗争最猛烈。在衰亡期，微生物的数目曾经开场减少，目曾经开场减少，pHpH曾经极度不适于微生物的生存，次级代谢产曾经极度不适于微生物的生存

15、，次级代谢产物积累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环物积累到很高的程度，这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。境的斗争。答案：答案：C C341.1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是对细菌群体生长规律测定的正确的表述是 A. A.在液体培育基上进展在液体培育基上进展 B. B.至少接种一种细菌至少接种一种细菌 C. C.接种一个细菌接种一个细菌 D. D.及时补充耗费的营养物质及时补充耗费的营养物质 2.2.运用选择培育基的目的是运用选择培育基的目的是 A. A.培育细菌培育细菌 B. B.培育真菌培育真菌 C. C.使需求的微生物大量繁衍使需求的微生物大量繁衍 D

16、. D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别3.3.能合成脲酶的微生物所需求的碳源和氮源分别是能合成脲酶的微生物所需求的碳源和氮源分别是( )( ) A.CO2 A.CO2和和N2 B.N2 B.葡萄糖和葡萄糖和NH3NH3 C.CO2 C.CO2和尿素和尿素 D. D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素A A C CD D354.4.以下说法不正确的选项是以下说法不正确的选项是 A. A.科学家从科学家从70708080度热泉中分别到耐高温的度热泉中分别到耐高温的TaqDNATaqDNA聚聚合酶合酶 B. B.统计某一稀释度的统计某一稀释度的5 5个平板

17、的菌落数依次为个平板的菌落数依次为M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、M5M5，以，以M3M3作为该样品菌落数的估计值作为该样品菌落数的估计值 C. C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试要设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试要素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D. D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。种类最多。5.5.为培育和分别出酵母菌并淘汰杂菌，常在培育基中为培育和分别出酵母菌并淘汰杂菌，常在培育基中参与参与 A. A.较多的氮源物质较多的氮源物质 B. B.较多的碳源物质较多的碳源物质 C. C.青霉素类药物青霉素类药物 D. D.高浓度食盐高浓度食盐B BC C36例例3 320192019年江苏抗生素作为治疗细菌感年江苏抗生素作为治疗细菌感染的药物，其高效性和宏大的经济价值使抗生素工业染的药物，其高效性和宏大的经济价值使抗生素工业经久不衰。其中青霉素的发现和应器具有划时代的意经久不衰。其中青霉素的发现和应器具有划时代的意义。义。青霉素发酵产生青霉素。青霉菌的新陈代谢类型青霉素发酵产生青霉素。青霉菌的新陈代谢类型是是 ，青霉素是青霉菌的，青