植物生物技术导论复习思考题20606

1、植物生物技术导论复习思考题名词解释名词解释答案植物生物技术（广义概念）提高和改良农作物产量、品质的所有技术。（狭义概念）利用植物器官、组织、细胞和通过分子水平的操作、促进植物 繁殖、有用物质生产和植物品种遗传改良的技术。离体授粉植物的离体授粉也叫离体受精或试管受精，就是在人工控制条件下使离体的胚珠或子房完成授粉、受精形成种子的过程。 植物的离体授粉技术一般包括“胚珠试管受精”、“离体子房授粉”和“雌蕊离 体授粉” 3 3 个方面。T-DNAT-DNA转移-DNA-DNA 区。长度大约在 151530kb30kb，是根癌农杆菌侵染植物细胞 时从 T Ti i质粒上切割下来转移并整合到植物基因组的

2、一段DNADNA植物细胞组织培养在离体条件下利用人工配制的培养基对植物器官、组织、细胞、原 生质体等进行培养，在适宜的培养条件下，长成完整植株的过程。同工酶是功能相同的酶的多重分子形态，它们是特异的基因产物。体细胞胚在愈伤组织表面或内部形成类似于合子胚的结构，称其为体细胞 胚，或不定胚，或胚状体。植物细胞全能性一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信 息。在适宜的条件下能够形成完整植株的能力。细胞培养是指将植物单细胞或细胞团直接在培养基中进行培养的一种培养 方式。细胞悬浮培养是指将游离的单细胞或细胞团按照一定的细胞密度悬浮在液体培 养基中进行培养的方法。脱分化脱分化是在植物组织

3、和细胞培养中，一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程，即形成愈伤组织的过程。愈伤组织在植物组织和细胞培养中，愈伤组织则指在人工培养基上，由外植体形成的一团无序生长、无特定结构和功能的薄壁细胞。花粉培养在人工配制的培养基上，将从花药中游离出来的花粉，单独进行培养, , 获得完整植株。不定器官在愈伤组织的不同部位分别独立形成不定根和不定芽。诱发融合原生质体融合过程中， 需要使用适当的融合剂或机械方法，将不冋的原生质体聚集到一起，使其粘连，融合，形成异核体。人工种子指通过植物组织培养的方法获得具有正常发育能力的材料，外面包被有特定物质，在适宜条件下可以发芽成苗的植物幼体。外植体在植物组织培养中

4、， 从活体植物上提取下来的，接种在培养基上培养的无菌细胞、组织、器官等统称为外植体。低温保存又称最小生长法，是将外植体所再生的试管苗在低温条件下，结合某些特定的培养基如增加蔗糖浓度、添加甘露醇、山梨醇、脱落酸 （ABAABA）等生长延缓因子，辅以培养环境的调控，从而抑制或延缓生 长，延长寿命，达到保存种质的目的。报告基因能快速报告细胞是否被转化的基因，大多是一些水解酶基因如：B- -葡萄糖醛酸苷酶基因（gusgus）、氯霉素乙酰转移酶基因（catcat ）、3-半 乳糖苷酶基因（lacZlacZ ）、荧光素酶基因（lucluc、等；农杆碱合成酶基因、绿色荧光蛋白基因（gepgep）等。体细胞杂

5、交指将植物不冋种、 属，甚至科间的离体细胞通过一定诱导技术使质 膜接触而融合在一起随后导致两个细胞核物质融合，通过离体培 养，使其再生杂种植株的技术。又称原生质体融合。超低温保存将植物的离体材料包括茎尖（芽）、分生组织、胚胎、花粉、愈伤 组织、悬浮细胞、原生质体等，经过一定的方法处理后在超低温（-196-196C）条件下进行保存的方法。细胞悬浮培养是指将游离的单细胞或细胞团按照一定的细胞密度悬浮在液体培 养基中进行培养的方法。基因枪法又名微粒轰击法，通过高速飞行的金属颗粒将包被其外的目的基因 直接导入到受体细胞内，从而实现遗传转化的一种方法。填空题填空题答案植物组织培养中，培养基的主要组分有、

6、等。水、无机成分、有 机成分、植物生长 调节物质脱分化的细胞再分化岀完整植株有两种途径：或。不定器官形成、器官形 成植物组织培养中的发展简史二阶段是、。探索、奠基、迅速发展植物细胞培养中，震荡的主要作用有、等。使愈伤组织破碎成小 细胞团或单细胞、使细 胞团和单细胞均匀分 布于培养基中、促进 气体交换培养细胞活力的测定方法主要有：、等。四唑盐还原法（TTCTTC）、荧光素二乙酸法（FDAFDA）、噻唑蓝法（MTTMTT 法）花粉（小孢子）培养的方法主要有：、等。液体浅层培养、平板培 养法、微室悬滴培养法植物细胞组织培养的基本设备有、等。准备室、无菌操作室、 培养室植物组织培养中，外植体的种类有、

7、等。根、茎、叶、花、果实植物组织培养的关键环节主要有、等。脱分化、再分化、试管 苗的驯化影响植物组织培养的因素主要有、等。光照、温度、湿 度、气体植物基因克隆的方法有、等。化学法合成、从基因 文库中钓取 、PCRPCR 扩 增、图位克隆方法愈伤组织形成经历三个阶段：、和诱导、细胞分裂、细胞。分化植物生物技术常用的灭菌方法有、等。咼压蒸汽火菌、干热 灭菌或表面消毒灭 菌、过滤火菌植物细胞培养的方法有、等。看护培养、悬浮培养外源基因导入植物细胞的方法有、等。基因枪法、农杆菌介 导法、聚乙二醇法、 电击法由花粉培养获得的再生植株是。单倍体植株DNADNA 分子标记主要有、等。RFLPRFLP、 AL

8、FPALFP 、 SSRSSR人工种子包括：、等部分。人造种皮、人造胚乳、 发牙材料体细胞杂种的鉴定方法有、等。形态学、细胞学、冋 工酶、分子生物学离体授粉的类型主要有：、等。离体雌蕊授粉、离体子 房授粉、离体胚珠授粉无性系是。用植物体细胞繁殖所获得的后代植物遗传转化的方法主要有、等。基因枪法、农杆菌介 导法、花粉管通道法、 电击法植物细胞增殖的测定指标主要有、等。细胞鲜重、细胞干重、 细胞密实体积、细胞植 板率等。（其他答案： 细胞计数、细胞有丝分 裂指数）脱去植物病毒常用的方法有：、等。热处理脱毒、茎尖培养 脱毒、微体嫁接脱毒（其他供选择的答案 有：热处理结合茎尖培 养脱毒、抗病毒药剂脱

9、毒等）植物组织培养中，愈伤组织诱导的三个阶段 7 7 是 、。启动期、分裂期、分化期植物种质资源离体保存的方法主要有：、等超低温保存、低温保 存、干燥脱水法保存（备选答案有：包埋脱 水法保存、玻璃化法保 存、常温保存等）植物小孢子在离体培养条件下的发育途径主要有：、等。营养细胞发育途径、生 殖细胞发育途径、营养 细胞和生殖细胞并进 发育途径（还可以填花 粉均等分裂途径）植物组织培养中，脱毒苗的检测方法有、等。指示植物法、 显微镜 鉴定法、抗血清鉴定 法简答题简答题答案简述植物组织培 养过程中的影响 因素。可从(1 1)培养基的成分；(2) 外植体；(3) 培养条件三个方面分析。简述离体培养条

10、件下小孢子的发 育。可从(1 1)营养细胞发育途径；(2 2)生殖细胞发育途径；(3 3 )营养细胞和生殖细胞并进发育途径；(4 4)细胞均等分裂途径等方面阐述。简述被微生物污 染后的玻璃器皿 应该如何清洗。被真菌等微生物污染的玻璃器皿，必须在121121 C C 咼压蒸汽火菌 30min30min后，倒去残渣，用毛刷刷去瓶壁上的培养液和菌斑后，用水冲液干净后， 浸泡在洗涤液中，洗刷后，再用自来水冲液，蒸馏水冲淋一遍后，晾干 备用。非 PCPCR R 依赖的分 子标记主要有几 种？主要有限制性片段长度多态性标记(AFLPAFLP)和染色体原位杂交两种。可展开阐述。简述体细胞杂交 的意义。体细胞

11、杂交(somatic(somatic hybridizatiohybridizatio n)n)，在植物中亦即原生质体融合(protoplast(protoplast fusiofusio n)n)，利用适当的物理或化学方法，可以将任何两种原生质体融合在一起；利用适宜的培养方法，可以由融合原生质体再生出 杂种植株即体细胞杂种。克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传变异 等(适当展开论述)。植物组织培养 中，火菌方法主 要有哪些？火菌方法主要有蒸汽火菌、咼温空气火菌、过滤火菌、灼烧火菌、辐照 灭菌等。可简要将每种方法阐述。简述原生质体分 离培养的主要过 程。从植物材料的选择一

12、分离原生质体一原生质体纯化一原生质体培养这几 个环节加以简述影响细胞悬浮培 养的因素。可从（1 1）培养基的成分；（2 2 ）外植体的选择；（3 3）植物生长调节物质；（4 4）培养条件等方面进行阐述。简述花药培养和 花粉培养的异 同。（1 1） 花粉培养属细胞培养；花药培养为器官培养。（2 2） 花粉培养排除了药壁、药隔和花丝的干扰，从小孢子中获得的材 料是纯合的；花药培养存在药壁等二倍体细胞对小孢子发育的的干扰， 获得的材料可能是杂合的。（3 3） 花粉培养中小孢子能均匀地接触化学和物理诱变因素，是研究吸 收、转化和诱变的理想材料；化药培养中小孢子接触的诱变因素不均匀。（4 4） 花粉培养

13、可观祭到雄核发育的全过程，是研究遗传和发育的很好 材料体系；花药培养对雄核发育的全过程难于观察。（5 5） 花粉培养可以从每个花药中获得更多的单倍体；花药培养获得的 单倍体少。简述花粉管通道 法导入外源基因 的原理。可从（1 1）花粉管通道法概念（又名子房注射法，花蘖注射法，柱头 涂抹法，蘸花法。它是利用开花植物授粉后形成的花粉管通道，直接将 外源目的基因导入尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚细胞，实现 目的基因遗传转化的一种方法）；（2 2）花粉管通道法导入外源基因的步骤进行阐述。简述 RAPDRAPD 的基本实验步骤。从以下方面叙述：DNADNA 的提取模板 DNADNA 浓度和质量的检

14、测PCRPCR 扩增电泳检测：PCRPCR 吉束后每个样品加 4ul4ul 凝胶上样缓冲液，每个泳 道点样20ul20ul。将凝胶浸于 1ug/ml1ug/ml 的 EBEB 中 30min60min30min60min，用水清洗约 10min10min, 观察、拍照。统计分析：记录条带清晰的 RAPDRAPD 条带，计算带纹相似率；计算 带频率、群内遗传纯度；DNADNA 片段大小。简述几种转基因 植物材料的检测 方法。对转基因植物材料中目的基因的表达主要米用分子生物学方法和 生物化学方法检测。主要有：报告基因检测法、SouthernSouthern 杂交法、NorthernNorthern

15、 杂交法、WesterWestern n杂交法、PCRPCR 方法、生物学鉴定等。（1 1） 报告基因检测法：利用报告基因能快速报告细胞是否被转化 的特点，来检测转基因植物材料的方法。（2 2） SouthernSouthern 杂交法：主要是利用两条单链 DNADNA 互补性，来检 测外源DNADNA 的转化结果，该方法 SouthernSouthern 于 19751975 年发明的。该方法只 能验证转化基因是否存在于被检测植株中，但不能得到基因是否表达的信息。（3 3） NorthernNorthern 杂交法：用于检测外源基因转录出来的mRNAmRNA，该 方法是 AlwineAlwi

16、ne 于 19771977 年发明的。该方法能检测转化基因是否转录出 mRNAmRNA，在转录水平上基因的表达和调控。(4)WesternWestern 杂交法：是将外源基因转录并翻译的蛋白质从SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶中转移到固相支持体上，然后对固定化蛋白质进行免疫学测定。该方法只能验证转化基因是否存在在蛋白质水平上的正常表达。(5) PCRPCR 方法：在一种耐高温的 DNADNA 聚合酶作用下，通过引物和模板 DNADNA 进行多聚酶链式反应(PCRPCR)来扩增 DNADNA。该方法只能验 证转化基因是否存在于被检测植株中，但不能得到基因是否表达的信息。该方法比 SouthernSou

17、thern 杂交法简单。(6 6)生物学鉴定：对转基因植物的生物学性状进行观察，鉴定基因 的功能和表型，是否稳定地遗传给后代。该方法能验证基因是否能正常 地表达，是否稳定遗传给后代。四、 论述题论述题答案简述 DNADNA 分子标记在植物 研究中的应用。(1)(1) 比较生物的遗传变异性，从而研究亲缘、进化关系。(2)(2) 构建遗传连锁图，进行分子标记辅助选择。(3)(3) 构建遗传图谱，进行基因定位、克隆。 例如：RFLP-RFLP-( restrictionrestriction fragmentfragment lengthlength polymorphismpolymorphism

18、) 限制性片段长度多态性标记。特定牛物类型的基因组DNADNA 经某一种限制性内切酶完全酶解后，会产生分子量不同的同源等位 片段，或称限制性等位片段，通过电泳的方法分离和检测这 些片段。凡是可以引起酶解位点变异的突变，如点突变(新 产生和去除酶切位点)和一段DNADNA 的重新组织(如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化)等均可导致限制性等位 片段的变化，从而产生 RFLPRFLP植物细胞培养的应用有哪 些？可从(1 1)筛选突变体；(2) 生产次生代谢产物；(3) 其他应用(克服远缘杂种的不育性，用于植物代谢 生理学、生物化学等的研究)等方面展开阐述。在培养室中发现部分培养材 料被污染，试分析原因。培养室中发现部分培养材料被污染，可能的原因主要如下： (需要展开讨论，根据情况加分或扣分)(1) 植物材料本身内生菌的生长；(2) 培养基火菌不彻底；(3) 培养基火菌后，微生物从器皿的封口处进入；(4) 培养材料表面消毒不彻底；(5) 无菌接种操作不规范；(6) 接种室或超净工作台空气不洁净；(7) 培养室空气不洁净或湿度较大。