保健食品中总黄酮、总皂甙、粗多糖的测定

1、保健食品中总黄酮、总皂甙、粗多糖的测定附录 A（规范性的附录）保健食品中总黄酮的测定A.1试剂A.1.1聚酰胺粉A.1.2 芦丁标准溶液：称取5.0g芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL即得50卩g/mL。A.1.3 乙醇分析纯。A.1.4 甲醇分析纯。A.2分析步骤A. 2.1试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25mL摇匀后，超声提取20min,放置，吸取上清液1.0mL,于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入 层析柱。先用20m苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至 25mL此液于波长360n m测定吸收值。同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样

2、中的总黄酮 含量。A.2.2 芦丁标准曲线：吸取芦丁标准溶液：0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醛至刻 度，摇匀，于波长360nm比色。求回归方程，计算试样中总黄酮含量。A. 3计算和结果表示：AXVXIOO X-式中：X：试样中总黄酮的含量，mg/100g；A：由标准曲线算得被测液中总黄酮量，卩gM试样质量，gVi：测定用试样体积，mLV?:试样定容总体积，mL计算结果保留二位有效数字。此方法选自保健食品检验与评价技术规范（2003年版）附录 B（规范性的附录）保健食品中总皂甙的测定B.1试剂B. 1.1 Amberlite-XAD-2 大孔树脂，Sigm

3、a 化学公司、U.S.AB.1.2正丁醇分析纯。B.1.3乙醇分析纯。B. 1.4 中性氧化铝层析用，100-200目。B.1.5高氯酸分析纯。B.1.6冰乙酸分析纯。B.1.7 香草醛溶液称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100mLB.1.8 人参皂甙Re 购自中国药品生物制品检定所。B.1.9 人参皂甙Re标准溶液：精确称取人参皂甙Re标准品0.020g，用甲醇溶解并定容至10. 0ml，即每毫升人参皂甙Re2.0mg。B.2仪器B.2.1 比色剂B.2.2 层析柱B.3实验步骤B.3.1试样处理B.3.1.1 固体试样：称取1.000g左右的试样（根据试样含人参量定），置于100ml容

4、量瓶中， 加少量水，超声30min,再用水定容至100m,摇匀，放置，吸取上清液1.0mL进行柱层析。B.3.1.2液体试样：含乙醇的补酒类保健食品，吸取 1.0mL试样（假如浓度高、或颜色深，需稀释一定体积后再取1.0mL）进行柱层析。B.3.2 柱层析：用10mL注射器做层析管，内装3cm Amberlite-XAD-2 大孔树脂，上加1cm 中性氧化铝。先用25mL70?乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25m水洗柱，弃去洗脱液，精确 加入1.0mL已处理好的试样溶液（见B.3.1），用25m水洗柱，弃去洗脱液，用25mL70乙醇 洗脱人参皂甙，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60 E水浴挥干。以此作

5、显色用。B.3.3 显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL53香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿， 使残渣都溶解，再加0.8mL高氯酸，均匀后移入5mK塞刻度离心管中，60C水浴加热10mi n，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸 5.0mL，摇匀后，以1cm比色池与560nm波长处与标 准管一起进行比色测定。B.3.4 标准管：吸取人参皂甙Re标准溶液（2.0mg/mL） 100卩l放蒸发皿中，放在水浴挥干 （低于60C）,或热风吹干（勿使过热），以下操作从“ B.3.2柱层析”起，与试样相同。测定吸光度值。计算:A.V1001X= -X C XX X 冶氛10001000式中：X：试样中总

6、皂甙量（以人参皂甙 Re计），g/1OOg ;A：被测液的吸光度值；A ：标准液的吸光度值；C：标准管人参皂甙Re的量，卩gV：试样稀释体积，mLm试样质量，g计算结果保留二位有效数字。此方法选自保健食品检验与评价技术规范（2003年版）粗多糖的测定C.1试剂C.1.1浓硫酸C.1.2无水乙醇C.1.35%本分溶液C.1.480聽醇溶液C.2分析步骤C. 2.1 试样处理：取本品50.0mL,加热浓缩至约10.0mL,放冷，加入40m无水乙醇，3000 转/分离心5min,弃去上清液，残渣用80汇醇洗涤，离心(重复此过程2次)，用水溶解残 渣，定容20mL此液即为样品处理液。C.2.2 标准曲线：取葡聚糖标准溶液：0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mL，用水定容为1.0mL，加入 0.5mL苯酚溶液，10mL浓硫酸，混匀，放置至室温，于L=1cm波长=485nm测定吸光度， 绘制 标准曲线。C. 2.3 样品测定取样品处理液0.5mL于具塞比色管中，以下同标准