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1、(时间:90分钟;满分:100分)一、选择题(本题共20小题,每小题2.5分,满分50分)1 .破译生物基因组 DNA的遗传信息进行基因操作时,首先要提取细胞核DNA。下列不适宜作为提取 DNA的实验材料的是()A.鸡血细胞B.蛙的红细胞C.人的成熟红细胞D.菜花解析:选Co DNA主要分布于真核细胞的细胞核中,而人的成熟红细胞中无细胞核,故无DNA ,因而不能用人的成熟红细胞作为提取DNA的实验材料。2 .在下列图示中,可以正确反映 DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()1JN&溶解度0J4NaC啾度0.14N.CI 减度(mU/L)&14NaCI 粒度OLMNd堪t
2、度(iuiI/L)I)C解析:选Co在NaCl溶液的浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最小,而蛋白质的溶解度较大;NaCl溶液的浓度高于或低于 0.14 mol/L时,随着其浓度的升高或降低,DNA的溶解度都会逐渐增大。3 .蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来,下列药品可达到上述同一目的的是()A .蒸储水B . NaCl溶液C. NaOH溶液D.盐酸答案:B4 .在“ DNA的粗提取与鉴定”实验中,有两次 DNA沉淀析出:DNA在NaCl溶液中的物质白量浓度为 0.14 mol/L溶解度最低;DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能够沉淀析出。该实验依据的原理是()A
3、 .两次都是B .两次都是C.第一次是,第二次是D.第一次是,第二次是解析:选Co DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低, 而高于或低于这一浓度,DNA在NaCl溶液中的溶解度都会增大;DNA不溶于酒精溶液,但是,细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,这样 DNA就可以沉淀析出。5 .在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是()A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质,使 DNA释放,便于进一步提纯解析:选D。蛋白水解酶简称蛋白酶,能够催化多肽或蛋白
4、质水解,所以这种酶可以分解血细胞中的所有蛋白质,有利于DNA的释放。6 .将含有DNA的滤液放在6070 C的恒温水浴箱中保温 1015 min,可以得到含杂 质较少的DNA ,这一做法所依据的原理是 ()A.高温使蛋白质变性B.高温使DNA变性C.高温使蛋白质分解D.高温使DNA分解解析:选A。大多数蛋白质不能忍受 6080 C的高温,而DNA在80 C以上才会发生 变性。在6070 C的恒温水浴箱中保温,目的是使蛋白质发生变性,从而分离得到DNA。7 .在DNA的粗提取实验过程中,对 DNA提取量影响较小的是()A.使鸡血细胞在蒸储水中充分破裂,放出 DNA等核物质8 .搅拌时要用玻璃棒沿
5、一个方向轻缓搅动C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸储水,直到黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀 DNA ,甚至再将混合液放入冰箱中冷却解析:选B。本题考查DNA的粗提取与鉴定的有关知识,同时考查学生对DNA提取原理的理解。搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动的目的是防止DNA的细丝被打碎,但是打碎的DNA分子并不影响提取的 DNA的含量;如果鸡血细胞破裂不充分,DNA等核物质释放不充分,DNA的提取量会减少;在析出 DNA黏稠物时,加入蒸储水的量不足,会 使DNA不能充分析出,而如若加入蒸储水的量过多,析出的 DNA又会溶解,DNA的提取 量也会减少;用冷酒精沉淀DNA甚至将混合液放入冰箱冷却
6、的目的是抑制DNA水解酶活性,防止DNA降解,如果酒精冷却不充分,DNA析出量减少,DNA的提取量也会减少。此类题目的解题方法是理解实验各个环节或操作的目的,突破的方法是将各个环节进行比较分析,找出其中的相互关系。8 .如图表示PCR扩增的产物,请分析它是哪次循环的产物()1皿 I Hili 11】11111in 】n II 】h n 】imT引物I引物nunmnninninnininnnininiiiLA.第一次循环B.第二次循环C.第三次循环D.第四次循环解析:选A。在PCR反应中以引物为标记,第一次循环时,以加入的DNA为模板,两条DNA链可分别由引物I和引物n与其结合,并在 DNA聚合
7、酶的作用下延伸,所以,形 成的每个子代 DNA中只有一种引物。从第二次循环开始,第一次产物的DNA分子又可作为模板参与反应,形成的DNA分子两端都含有引物。9 . PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器,下列关于它调控不同温度的目的叙述错 误的是()A. 95 C,使DNA分子变性,解开螺旋B. 55 C,使DNA分子两条单链与两种引物结合C. 72 C,使DNA分子开始复制,延伸D. 72 C,使DNA分子恢复双螺旋结构,恢复活性解析:选D。PCR禾I用DNA热变性的原理,当温度上升到90 C以上时,双链 DNA解旋为单链,A项正确;当温度下降到 50 C左右时,两种引物通过碱基互补配对原则
8、与两条 单链DNA结合,恢复活性,B项正确;当温度上升到 72 C左右时,在DNA聚合酶的作用 下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,从而实现 DNA延伸,故C正确,D错误。10.下列关于DNA复制的叙述,不.正确的是(多选)()A. DNA聚合酶不能从头开始合成 DNA ,只能从5'端延伸DNA链B. DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D. DNA的合成方向总是从子链的 3'端向5'端延伸解析:选ABD。只认为B错误的原因是没有理解 DNA复制过程以及 DNA聚合酶的作 用特点。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA ,只能从引物的3
9、39;端延伸DNA链。由于模板链首先复制的是 3'端,即复制方向3' - 5',而DNA分子是反向平行的,子链是依据 碱基互补配对原则,在 DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向从子链的5' - 3'。11.在pH = 5.12时进行电泳,哪种蛋白质既不向正极移动也不向负极移动()A.血红蛋白:pI(等电点)=7.07B.鱼精蛋白:pI = 12.20C. ai 球蛋白:pI = 5.06D. 3 球蛋白:pI = 5.12解析:选D。3球蛋白在pH=5.12时不带电,在电泳时既不向正极移动也不向负极移 动。12.洗涤红细胞时,离心所采用的方法是()A.低
10、速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析:选Bo高速或长时间离心,会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀,得不到纯净的红 细胞,进而影响后面血红蛋白的提取纯度。13 .将猪的红细胞分别放在 9%的NaCl溶液和蒸储水中,表现出的现象分别是 ()A.都发生质壁分离B.无变化、涨破C.无变化、无变化D.皱缩、涨破解析:选D。动物细胞由于没有细胞壁,不会发生质壁分离。9%的NaCl溶液浓度已很高,红细胞会失水皱缩,在蒸储水中则会吸水涨破。14 .将处理破裂后的红细胞混合液以2000 r/min的速度离心10 min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是()A.血红蛋白
11、、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层B.甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层C.脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层D.甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层解析:选D。混合液经离心后按密度大小排列,在离心管中从上到下的顺序依次是:第 1层为无色透明的甲苯层,第 2层白色薄层固体是脂溶,f物质沉淀层,第3层红色透明液体是血红蛋白水溶液,第 4层暗红色沉淀物主要是红细胞破碎物沉淀。15 .人们用鸡的红细胞提取 DNA不用人的红细胞提取血红蛋白的原因是()A.鸡的红细胞无血红蛋白,人的红细胞有血红蛋白B.鸡的红细胞有线粒体,人的红细胞无线粒体C.鸡的红细胞有细胞核,人
12、的红细胞无细胞核D.鸡的红细胞有氧呼吸,人的红细胞无氧呼吸解析:选C。鸡(鸟类)的红细胞具有完整的细胞核,含有核DNA,便于进行 DNA的提取;人的成熟红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富,便于提取血红蛋白。16 .在提取血红蛋白的样品处理阶段,洗涤红细胞十分重要,其目的是 ()A.让红细胞破裂,释放血红蛋白B.洗去血浆蛋白C.防止血液凝固D 保证红细胞的正常形态解析:选Bo本题考查血红蛋白的分离中样品处理的原理。血液中含有多种蛋白质,除红细胞内的血红蛋白,血浆中还含有多种蛋白质,这些蛋白质在血红蛋白释放出后会与其混合,需要在红细胞破裂前将其除去。17 凝胶色谱法操作正确的是()A.将橡
13、皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B 将橡皮塞下部切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D 将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片解析:选A。凝胶色谱柱制作时,首先选择合适封堵玻璃管口的橡皮塞,将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴;插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面;把尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片。18 在实验室中,做PCR 通常使用的微量离心管是一种薄壁塑料管,此过程可以使用玻璃离心管吗?为什么()A.可以,玻璃离心管、塑料微量离心管都可以使用B 不可以,玻璃离心管易碎,使用不安全C.不可以,玻璃离心管一般较大,不适合作为微量离心管D 不可以,玻璃离心管容易吸附DNA解析
14、:选Do本题考查多聚酶链式反应扩增DNA片段的有关知识。DNA亲和玻璃,在进行 DNA 操作时应用塑料器皿。19 某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中,发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的肌肉,他想了解该巨型动物的DNA 与现今印度大象的DNA 的相似性,于是做了如下检测工作,其中正确的操作步骤及顺序是()降低温度,检测处理后的杂合DNA双链通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA 把巨型动物的DNA 导入大象的细胞中在一定温度条件下,将巨型动物和大象的 DNA 水浴共热A.B.C.D.答案: D20下面说法不 正确的是()A.在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH
15、基本不变B.缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D 透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内解析: 选 D 。透析袋一般是用硝酸纤维素制成的。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。二、非选择题(本题共4 小题,满分50 分 )21. (12 分 )回答下列有关“DNA 的粗提取和鉴定”实验的问题。(1)下列有关“DNA 的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是 ()A DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随NaCl 溶液浓度的降低而减小B 利用DNA 不溶于
16、酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNAC DNA 是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D 在沸水中,DNA 遇二苯胺会出现紫色反应(2)如下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。折出粒地中的找我翻一张枳分收为二售酒精富也溶解的正确的操作顺序是 O上图C、E步骤都加入蒸储水,但其目的不同,分别是和 O图A步骤中所用酒精必须是经过 才能使用,该步骤的目的是(3)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA ,可滴加 试剂,沸水浴,如果出现,则该丝状物的主要成分为DNA。答案:(1)B (2)C- B-E-D - A 加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出 充分
17、预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA(3)二苯胺蓝色22. (12分)近20年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规 实验手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图),在短时 间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,从而使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。隹 IAA ? <-(1)加热使DNA双链间的 键完全打开,称为 ;而在细胞中是在 酶的作用下进行的。(2)如果只需要大量克隆模板 DNA中间的某个特定区段, 应该加入 种特定的引物。当温度降低至 55 c时,引物与两条“舒展”的模板的特定位置结合,在 DNA聚合酶 的作
18、用下,只能在引物的 端连接脱氧核甘酸,两条子链的延伸方向都是(3)PCR技术的必需条件,除了模板、原料、酶之外,至少还有三个条件,即液体环境、 适宜的 和,前者由 自动调控,后者则靠 来维持。(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制,如果将一个用15N标记的DNA分子放入试管 中,以14N标记的脱氧核甘酸为原料,连续复制四次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是 。解析:(1)PCR技术利用热变性原理使 DNA双链之间的氢键断裂, 称为解旋,而在细胞 内是在解旋酶的作用下使氢键断裂。(2)PCR分为三个基本反应步骤:变性 (95 C)、复性(55 C)、延伸(72 C),其
19、特异性依赖于与靶序列互补的引物,引物是两段与待扩增DNA序列互补的片段,两引物之间的距离决定扩增片段的长度。由于 DNA聚合酶不能从头开始合 成DNA ,只能从引物的3'端延伸DNA链,则DNA的合成方向总是从子链的 5'端向3' 端延伸。(3)PCR技术与细胞内的 DNA复制不完全相同,除了需要模板、原料、酶以外,至 少还需要液体环境(稳定的缓冲溶液),每一个步骤需要适宜的温度和酸碱度等。(4)一个DNA分子连续复制四次之后,形成16个DNA分子,15N标记的DNA分子有2个,则15N标记的DNA分子占全部 DNA分子总数的比例为 1/8。答案:氢解旋解旋(2)两 3
20、' 从子链的5'端向3'端延伸(3)温度酸碱度 PCR仪缓冲液(4)1/823. (12分)商品化植酸酶主要来自微生物,首先筛选出产酶的菌株,然后制备植酸酶, 请根据下面的流程图回答问题:国状土睚透机液(1庚除百漉T船厂发麻液F透,摊峰T 化IT常曜嬴口)(1) I中的主要成分有哪些?;(2)请写出一种纯化得到植酸酶的方法: ;解析:本题考查蛋白质粗提取和分离的方法。植酸酶是蛋白质,属于大分子有机物,含酶的发酵液经过透析后,能够除去小分子杂质,这样就能够得到植酸酶。对于粗提取的植酸 酶可以用凝胶色谱法进行提纯,由于蛋白质带有电荷,亦可用电泳法进行纯化。答案:(1)小分子
21、杂质 含植酸酶等多种蛋白质(2)凝胶色谱法 根据蛋白质之间分子大小、吸附性质等差异进行纯化(或电泳法根据蛋白质之间电荷、分子大小等差异进行纯化)24. (14分)某生物兴趣小组开展 DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 go剪碎后分成两组,一组置于20 C,另一组置于20 C条件下保存24 hoDNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入 15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布 过滤,取滤液备用。第二步:先向6只小烧杯中分别注入 10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷 酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的 2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入 4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min , 待试管
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