初始污染菌检测操作规程

1、For personal use only in study and research; not for commercial use有限公司文件编号：版本号：B 0支持性文件初始污染菌检测方法页码：第1页 共2页1. 目的测定样品细菌总数可用来判明样品细菌污染的程度，以及生产单位工具设备、工艺流程、生 产人员的卫生状况，是对样品进行卫生学评价的综合依据，确定灭菌前产品中微生物的数量 和性质，为下一步灭菌提供参考依据。2. 适用范围适用于所有需要消毒灭菌前的产品、洁净车间3. 作业条件：3.1无菌检测在洁净度为 100级单向流空气区域内进行，严格遵守无菌操作，避免污染。3.2超净台及工作台面，

2、必须进行洁净度验证。4. 作业方法与步骤4. 1制作营养琼脂培养基（参见培养基制作作业指导书），培养基需按要求培养16-18H后，检查无菌生长方可使用。4. 2无菌室洁净度验证4. 2. 1取3只培养皿在超净工作台平均位置打开上盖，暴露30min后盖好置3035C培养48h后检查，3只培养皿上生长的菌落数平均应不超过1个4. 3产品采集与样品处理（制备供试液）,放入100ml灭菌生理盐水中充分振荡，保温于 45C水浴中510min，不时振摇。作为 1: 10 供试液。，被采表面积100cm2.加入灭菌生理盐水 100ml。保温于45C水浴中510min，不时振摇。作 为1: 10的供试液。，加

3、入9ml生理盐水，制备1 : 100的供试液。制备过程中尽量避免碎片等杂物的混入。4.4接种检验，取4个培养皿，每个稀释级各吸取1ml至每个灭菌平皿，每个稀释级注2个平皿。C时，倾注上述各个平皿15ml，另倾注一个不加样品灭菌空平皿作空白对照。以顺时针或逆时针方向快速转动平皿，使供试液与培养基充分混匀。4.5培养将已经凝固的平板倒置于 37C培养箱中，一般培养 48± 2h。计算平板上的菌落数。4.6结果与判定，以投射光衬以暗色背景，仔细观察，计数。必要时可以借助于放大镜、菌落计数器。菌落层片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按下式计算结果 平均菌落数X稀释倍数菌数菌

4、数/每件次（或 g）=件次或重量（g） 如只有1个稀释级平均菌落数在 30300之间，则将稀释级的菌落数乘以稀 释倍数报告。，则先计算两稀释级菌落数的比值。高稀释级的平均平板菌落数X稀释倍数比值=低稀释级的平均平板菌落数X稀释倍数当比值w 2时，则以2个稀释级的平均菌落数均值报告。当比值 >2时，则以低稀释级的平均 菌落数乘以稀释倍数报告。，则按最高平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在30以下，则按最低平均菌落数乘以稀释倍数报告。，则以最接近30或300的稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告。 均菌落数小于1时，应报告菌数为<10个/g或ml。，则以后2级计算级间比值报

5、告。，菌落数在10以内时，按实有数值报告。大于100时，采用二位有效数字，在两位有效数值后面，应以四舍五入法计算。在报告菌落数为“不可计”时，应表明样品的稀释度。，按（将留存的复检样品依前法稀释复测两次，两次结果平均值都达到标准的规定，则判定检验样 品合格；其中有任何一次结果平均值超过标准规定，则判定被检样品不合格。5. 相关表单、测试报告6. 引用标准：GB7918.2、GB8368 GB8369中华人民共和国药典、一次性使用卫生用品卫生标准GB15979-2002 ?GB15980-1995 次性使用医疗用品卫生标准仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途For personal use only in study and research; not for commercial use.Nur f u r den pers?nlichen f u r StUFtieschung, zu kommerziellen Zwecken verwendet werden.Pour l ' e tude et la recherche uniquementa des fins personnelles; pasa des fins commerciales.to员bko gA.nro