第六章第二节ppt课件

1、第六章 酶Enzyme）什么是酶？酶是生物系统的反应催化剂，是活细胞产生的具有催化活性的生物分子。酶学发展简史第一节 酶通论 Joseph Gaylussac 糖发酵1857 Pasteur 发酵在活细胞中进行1878 Khne 提出“Enzyme”1897 Bchner 细胞提取液使糖发酵,化学本质是酶的作用* 1894 Fisher 提出“锁与钥匙学说 Henri 酶-底物 中间复合物学说 1913 Michaelis and Menten 米氏方程 1926 Sumner 脲酶具有蛋白质性质* 30年代，“酶是蛋白质被普遍接受。 60年代 酶测序、三维结构 80年代 Cech and A

2、ltman 发现核酶* 酶功能、分子机制、酶工程一、酶催化作用的特点 （一催化效率高碳酸酐酶酶高效催化是通过降低活化能实现的。比一般催化剂，酶能更显著地降低反应活化能。（二酶具有高度专一性specificity） 酶对催化的反应和反应物有严格的选择性 （底物、产物） （三温和的反应条件 常温、常压、 pH近中性的水溶液 酶易失活（四酶活性受到调节和控制 浓度、激素、反馈抑制二、酶的化学本质及其组成（一酶的化学本质是蛋白质（二酶的化学组成 氨基酸, 辅因子 结合蛋白质类的酶由蛋白质部分和非蛋白质部分组成。非蛋白质部分称为 辅因子cofactor）蛋白质部分称为脱辅酶apoenzyme）脱辅酶和辅

3、因子结合的完整分子称为全酶holoenzyme） 有三类辅因子：1 金属离子2 辅酶coenzyme） 与脱辅酶结合松弛的小分子，用透析方法可以除去。3 辅基prosthetic group） 以共价键与脱辅酶结合，不能通过透析除去。酶的新概念 绝大多数酶为蛋白质。近年发现有的核酸也是酶，称为核酶Ribozyme）。准确地说，酶是生物体内一类具有催化活性的生物大分子，包括蛋白质和某些核酸。第二节 酶的分类与命名 一、酶的种类（一按组成分为 简单蛋白质类 结合蛋白质类（二按分子结构分为单体酶monomeric enzyme） 只有一条多肽链组成，分子量较小。寡聚酶oligomeric enzym

4、e） 由两个以上蛋白质亚基组成。多酶复合体multienzyme complex）多酶复合体: 由多种酶靠非共价键彼此嵌合而成。它们连续依次催化一个代谢过程中的各个反应。（三按酶的合成与代谢的关系分为结构酶structural enzyme） 细胞中天然存在的酶。含量较稳定，受外界影响较小。诱导酶induced enzyme） 指细胞在某些诱导物的存在下产生的酶。（四按国际系统分类六大类）1.氧化还原酶类Oxidoreductase） AH2+BBH2+A2.转移酶类Transferases） AX+B A+BX3.水解酶类Hydrolases） AB+HOH AOH+BH4.裂合酶类Lyas

5、es） 加基团到双键或去基团形成双键。5.异构酶类Isomerases） 异构体相互转变。6.连接酶类Ligases） 与ATP分解相偶联。 X + Y + ATP XY + ADP + Pi二、酶的命名（一习惯命名法1.根据底物命名2.根据催化反应性质命名3.结合底物和催化性质命名4.说明酶的来源与特点（二国际系统命名法己糖激酶系统名称：ATP:glucose phosphotransferase酶分类号：（EC 2.7.1.1） 每一种酶用一个系统名称systematic name和一个酶分类号enzyme classification number表示。乳酸脱氢酶EC 1.1.1.27）

6、 第一大类氧化还原酶），第一亚类被氧化基团为CHOH基），第一亚亚类氢受体为NAD+），在亚亚类中的顺序号为27。Enzyme Handbook第三节 酶活力测定一、酶活力enzyme activity）指酶催化一定化学反应的能力。用单位时间内或单位体积内底物的减少量或产物的增加量来表示。二、测定酶活力的基本原则（一测定酶促反应速度的初速度initial velocity ）酶促反应产物浓度与反应时间进程曲线：1. 随着反应时间延长，产物增加，加大了逆反应的进行；2. 有可能产生产物抑制反馈抑制）；3. 酶部分失活。只有初速度才代表酶的催化活力。（二在最适条件下进行测定 （pH，T，离子强度）

7、（三反应体系中底物浓度要大大超过酶量三、酶活力的表示1 转换数turnover number;TN）一定条件下,每秒钟每个酶分子转换底物的分子数.常用转换数表示酶的催化效率2 酶的活力单位activity unit， U ） (IU)一个酶活力单位，是指在最适条件下25C，最适pH，充足底物），每分钟内能催化1 mol底物所需要的酶量。常用酶活力单位数表示酶量.3 酶比活specific activity） 每mg酶所具有的酶活力单位数。 U/mg U/ml mol/min.mg 常用酶比活表示酶的纯度与活性.四、酶活力的测定方法分光光度法(spectrophotometry) (产物显色光吸收) nmol荧光法(fluorometry)同位素测定法 fmol电化学法(electrochemical method)五、酶的分离与纯化总活力=U/ml X 总体积比活力=U/mg纯化倍数=比活(n)/比活(1)回收率=总活力(n)/总活力(1)有50g 酶制剂，5分钟内催化生成了10 mol 产物，计算：一个酶活力单位相当于多少 g酶制剂？25