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文档简介
1、生物制药工艺学重点知识1、 名词解释1、物理吸附:吸附剂和吸附物之间的作用力是通过分子间引力产生的吸附。2、盐析 :向溶液中加入一定量的中性盐,使目的物或杂蛋白以沉淀的形式析出。3、双水相 :由两个水相组成的分层体系。4、浓差极化:外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜,而使大分子被截留在薄膜表面,并逐渐形成浓度 梯度。5、超临界流体:指处于超临界温度和超临界压力以上的特殊液体。6、萃取 :利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度的不同,使化合物从一种溶剂中转移到另一溶剂。7、临界胶束浓度:胶束形成时所需表面活性剂的最低浓度。8、亲和层析:利用生物体中多数大分子物质具有与某些相应的分子专一性可逆结
2、合的特性而建立的分离纯 化技术。9、过饱和溶液:溶质浓度超过溶解度时,该溶液称为过饱和溶液。2、 填空题1、 发酵液常用的固液分离方法 -过滤 -和-离心分离。2、 离心分离的类型可分为-萃取分离法-、固相析出分离法-和-吸附分离法-。3、 影响盐析的因素-无机盐种类-、-溶质种类-、-蛋白质浓度-、-温度-、PH-。4、 离子交换层析中,洗脱方法是-静态洗脱-、-动态洗脱-。5、 在分子筛凝胶层析中,当Kd=0 时,为-全排阻-,Kd=1时,为-全渗透-,当Kd=(01)时,为 部分渗透。6、 离子交换剂的组成分为:-骨架部分-、活性基团-、-可交换例子-。7、 盐析操作的常用方法-分层盐析
3、法-、-重复盐析法-、反抽提法-。8、 采用离心沉降进行分离时,离心机转速为1800r/min,则距转轴20cm处的离心强度为-2012.4g-。9、 超临界流体的特点是:与气体有相同的-黏度-,和液体有相同的-密度-。10、 常见的膜分离方法:-透析-、超滤技术-、-微孔膜过滤技术-。3、 不定项选择1、 当两种不同聚合物的溶液相混合时,有可能存在哪些情况( AC )【答案不确定】 A.完全混溶 B.相分离 C.凝聚 D.不确定 E.与两者比例有关 2、 离心沉降设备有( BDE )【答案不确定】 A.瓶式离心机 B.管式离心机 C.多室式离心机 D.碟片式离心机 E螺旋离心机3、 在膜分离
4、过程中,采用非对称膜,其优点是( ABE )【答案不确定】 A.提高通量 B.增加机械强度 C.容量赌塞 D.提高分离精度 E.提高收率4、 乙醇作为有机溶剂沉淀蛋白过程中,哪些因素影响沉淀效果( ABCDE ) A.温度 B.乙醇浓度 C.PH D.蛋白质种类 E.蛋白质浓度5、 影响高速晶体大小的因素有( ACD )【答案不确定】 A.过饱和度 B.温度 C.搅拌速度 D.晶种 E.压力6、 浓度为0.3 mol/L 的(NH4)2SO4溶液的离心强度为( A )【答案不确定】 A. 0.9 mol/L B. 0.6 mol/L C. 0.3 mol/L D. 1.8 mol/L E.不确
5、定7、 Cohn 公式中,与K有关的因素为( DE ) A.温度 B.PH C.离子强度 D.蛋白种类 E.盐的种类9、 反胶束萃取过程中,影响效率的因素有( ABCDE )【答案不确定】 A.PH B.温度 C.表面活性剂种类 D.离子强度 E.亲和反胶束萃取10、 以静压力差为推动的膜分离过程有( ABD )【答案不确定】 A.微滤 B.超滤 C.纳滤 D.反渗透 E.膜蒸馏12、影响粒子在离心力场中沉降速度的因素有( )【答案不确定】 A.粒子大小 B.粒子形状 C.料液黏度 D.转速 E.转轴半径13、 在有机萃取过程中,为消除乳化现象可采用的措施有( ABDE )【答案不确定】 A.
6、稀释 B.加热 C.搅拌 D.改变PH E.加热电解质 16、盐析公式中,与K有关的因素为( DE ) A.温度 B.PH C.离子强度 D.蛋白种类 E.盐的种类20、采用密度梯度离心的作用是( ABCD ) A.提供良好的分离环境 B.增加分离层次 C.提高分辨率 D.减弱对流影响 E.增加密度4、 问答题1、说明发酵液预处理的目的,并说明其主要方法。2、常见的细胞破碎方法有哪些? 目的:1、改变发酵液的物理性质和降低溶液的粘度,增加固体粒子机械法:高速匀浆法、高速珠磨法、超声波震荡法的粒度等,促进从悬浮液中分离固形物的速度,实现工业规模的过滤;生物法:酶解法、组织自溶法 2、尽可能使产物
7、转入便于以后处理的相中;物理法:干燥法、反复冻融法、渗透压冲击法 3、去除发酵液中部分杂质,以利于后续各步操作。化学法:加入化学试剂破坏细胞壁、制成丙酮粉方法:1、加热法;2、调节悬浮液的pH值;3、去除杂蛋白;4、凝聚和絮凝技术; 3、结合图示,简述分子筛层析的分离原理。4、简述离子交换层析的操作步骤。(使用平衡排除)一个高聚物分子的流出体积是由在宏观的流动相 1、了解样品的理化性质;和微观的孔体积中的平衡分配系数所决定的,即扩散平衡。即溶2、选择填料;质分子扩散进入一个填料颗粒的孔中且再出来所需要的时间远小 3、树脂的选择;(根据被分离物质和分离目的)于溶质区段在此停留的时间。即当溶质流过
8、一个填料颗粒这段距 4、树脂预处理;(去杂过筛,酸碱酸或碱酸碱处理)离时,溶质分子已多沉进出于填料的孔,达到平衡。 5、装柱、上样、洗脱、分离5、写出三级逆流萃取工业流程图。 6、绘制结晶过程中的饱和曲线和过饱和曲线图,并简述其意义。结晶过程中的饱和温度曲线和不饱和温度曲线的简图 如右图所示S-S曲线为饱和温度曲线,在其下方为稳定区,在该区域溶液为不饱和溶液,不会自发结晶;T-T曲线为过饱和温度曲线,在其上方为不稳定区,能够自发形成结晶;S-S曲线和T-T曲线之间为亚稳定区,在该区域,溶液为过饱和溶液,但若无晶种存在,也不能自发形成晶体。7、简述分子筛层析操作步骤。1、样品浓度控制;2、凝胶选择(粒度);3预处理(溶胀);4、层析柱选择;5、凝胶柱装填6、 上柱;7洗脱;8、收集。5、 计算题1、 青霉素在0和PH=2.5 时的分配系数(醋酸丁酯/水)为35,若用1/4体积
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