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文档简介

1、夹心法双对数向平滑曲线的转换前面提到回归拟合要求指标，2必须大于0.9。这是一个最基本的要求，尸2越接近于1,表示浓度与吸光值的线性关系越好，标本检测结果的相关性越好。我们的出厂指标要求在0.99以上。最基本的拟合方式是双对数拟合方式与logit拟合方式。这都是直线拟合的。但有时侯推荐的拟合方式并不是最适用的。本节讲的是利用曲线回归方式来改善检测结果。夹心法实验一般采用log-log双对数直线模型。如下面AFP例子所示。标准品SoSiS2S3S4S5S6浓度ng/ml010204080160320吸光值0.0050.1260.2060.3590.6881.0541.879按照第一种模型-双对数

2、直线模型进行计算。点击“回归/拟合”查看方程参数，点击“回归方程”。rA2二0.99805,拟合效果非常好。标准品SoSiS2S3S4S5S6但由于实验室条件差异，有些实验室会出现吸光值偏高。标准品吸光值如下表:浓度ng/ml010204080160320吸光值0.0100.1960.3680.6151.0281.8542.379回归方以合模型以 |直线回归三）缴据列赁据列|对黔1 0为几二|柝数（K内）1二|如果仍按照上面的双对数直线方程进行拟合，会出现下面的曲线:ELISACalc回归/拟合廿算程序-g1观察曲线，S5,S6处有点平，似乎略呈S形。检查方程参数，rA2=0.98921。如果

3、标本吸光值为0.6,计算浓度为40.99ng/mlo标本吸光值为1.8时，计算浓度为180.6ng/ml。我们可以采用曲线拟合方式来改善结果。首先选用logistic曲线lo这时左侧“X数据列”及“Y数据列”处要改作不转换。如果查看回归方程参数，可以发现rA2=0.99883。这一曲线相关性非常好，标本吸光值为0.6时，计算浓度41.5ng/ml,标本吸光值为1.8时,计算浓度为154.7ng/ml。我们可以看到,高吸光值的标本浓度变化较大，而低吸光值区的标本浓度变化较小。这是因为我们上面的畸点S5,S6属于高浓度区。ELISA Calc回归/拟合计纬程序f 0.区回归卅以合椁型M厂使用kgi朋：的一般帘式国P含有常数顼I）数'加BJrirr熔血e：J:.复用IJ©L1rmi：退出（Q）ri帮助（Hk回归方程旧）由Yv+MX由X计宜略差一些。同样也可以采用logistic曲线2（四参数）来进行拟合。效果差不多。rA2=0.99715。但用logistic曲线拟合3（五参数）时，计算出错，未能形成曲线。ELISA

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