梅毒.9.2ppt课件

1、梅毒检测亳州市人民医院检验科1;一.什么是梅毒？1.定义：梅毒是由苍白（梅毒）螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病(VD,STD)。2;2.梅毒的分型：先天梅毒和后天传染梅毒，先天梅毒就是人们常说的胎传梅毒，母体传播。3.梅毒的传播途径：梅毒病人是唯一的传染源。性接触传染占95%。未经治疗的病人在感染一年内最具传染性，随病期延长，传染性越来越小，病期超过4年者，通过性接触无传染性。先天梅毒是患有梅毒的孕妇通过胎盘血行而传染给胎儿3;3.梅毒的分期一期梅毒： 标志性临床特征是硬下疳。这时候一般在外生殖器局部形成丘疹，进而无痛性溃疡，这时候病灶中有大量螺旋体存在，此时极易传播，1月左右，下疳自然愈合

2、，但抽血检查梅毒阳性。（注：下疳：指发于男女外生殖器部位之疮疡 ）4;二期梅毒：经无症状的2-3个月进入第二期：梅毒疹期，全身皮肤粘膜出现皮疹，伴淋巴结肿大，并可累计骨、关节、眼、及中枢神经系统，梅毒疹及淋巴结中可有大量螺旋体，此期不治也可在3周到3个月内自然消退，但可反复发作。注：（一期和二期梅毒合起来叫做早期梅毒）5;6;三期梅毒：大约1/4的早期梅毒可发展为晚期梅毒，即第三期梅毒。螺旋体进入人体二年后，如未能彻底治疗，就会形成内脏损害（如心、脾、肾），同时皮肤、脑神经、五官等都会受到不同的损害，此期为晚期梅毒，如不治疗直接影响生命。 先天性梅毒可导致胎儿全身感染，螺旋体在胎儿内脏及组织中

3、大量繁殖，可引起胎儿的流产或死胎。7;4.梅毒感染人体后，人体产生的抗体有那些？（1）梅毒非特异性类脂质反应素抗体，又称为反应素，未经治疗的梅毒患者血清中反应素可长期存在，经适当治疗后可逐渐减少，直至消失。（2）抗密螺旋体的特异性抗体。8;5.梅毒的检测1.有病损者（下疳、皮疹、淋巴结穿刺液）暗视野镜检。暗视野显微镜检查是一种检查梅毒螺旋体的方法。暗视野，顾名思义即是显微镜下没有明亮的光线，它便于检查苍白的螺旋体。这是一种病原体检查，对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。 2.梅毒血清学检测：由于潜伏期和晚期梅毒不出现皮肤粘膜病损，得不到直接检出的标本，因此血清学实验非常重要。9;10;6.梅毒免

4、疫测定一：使用类脂质抗原的血清学实验：梅毒螺旋体在破坏机体组织的过程中，体内释放一种心磷脂抗原，这种抗原可刺激机体产生相应的抗体.即抗心磷脂抗体。常用于临床筛选及判定治疗的效果 ，此类试验主要包括性病研究所实验室试验（VDRL）不加热血清反应素试验（USR）快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）.11;前两者用玻片，形成凝集或凝集沉淀，需要在显微镜下观察结果。不方便。RPR是USR抗原基础上加入一定量的黑色活性炭颗粒，抗原抗体反应在白色地板上出现黑色凝集颗粒，可用肉眼观察，不需要显微镜12;TURST是在RPR抗原试剂中加入特质的甲苯安红染料，在白色纸板上的抗

5、原抗体凝集反应更容易观察。所以目前TRUST是目前最常用的梅毒筛查方法。因为以上四种方法用的抗原都一样，采用的凝集方法也一样，所以测定的敏感性相似。但因为所以抗原为类脂质抗原，所以特异性较差，假阳性可见于各种疾病，如麻风、结核、SLE，类风湿关节炎、猩红热等疾病。13;由于感染梅毒后反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒反应素又可能转阴，因此这类试验不适于一期早期、三期梅毒，对隐性梅毒和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时，存在一定数量的漏检。14;（2）.使用密螺旋体抗原的血清学实验原理：以死的或活的密螺旋体或其成分为抗原检测血清中特意的抗密螺旋体抗体。为梅毒检测的确认实验。此

6、类实验主要包括荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）酶联免疫吸附试验(ELISA)等。目前ELISA的测定特异性和敏感性均高于TPHA等方法。成为梅毒血清学诊断试验的首选方法。15;7.双抗原夹心ELISA，检测血清中梅毒螺旋体抗体。1实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩洗涤液作1：20稀释。2编号；将酶标条板固定在板架上，按序编号，每板设阴性对照3孔，阳性对照2孔。空白对照1孔。（空白对照孔不加样品及酶标试剂机，其余各步相同）3加酶：每孔加100ul。4加样：分别在相应孔中加入待测标本，

7、或阴、阳对照50ul，振荡混匀。5温育：用封板膜封板后，置37孵育60分钟。6洗板：洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。7加显色剂：先加显色剂A，每孔50ul；再加显色剂B，每孔50ul；充分混匀，放置37避光孵育15分钟。8终止反应：每孔加入终止液0.05毫升，混匀。9测定：用酶标仪读数，可选择波长450nm（以空白孔校零）或双波长450/630nm，读取各孔OD值。16;8.Turst操作步骤定性试验：分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。取待检血清或血浆50ul（不需灭活）置于纸卡的另一圆圈中。用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察效价。定量试验：将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。三、结果判断：阳性反应（+）：可见中等或较大的红色凝聚物。弱阳性反应（+）：可见较小的红色凝聚物。阴性反应（-）：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。四、注意事项：本试验在2329条件下进行。TRUST试剂使用前应充分摇匀。本试验系非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需作梅毒螺旋体抗