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文档简介
1、河南师范大学河南师范大学环境科学与工程实验教学中心环境科学与工程实验教学中心 显微镜测微尺操作及原生显微镜测微尺操作及原生动物、藻类个体形状察看动物、藻类个体形状察看 实验目的实验目的学习运用目镜测微尺和镜台测微尺在显学习运用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。微镜下测定微生物大小的方法。学习运用血球记数板测定微生物数量的学习运用血球记数板测定微生物数量的方法。方法。学会察看常见水体中藻类及原生动物。学会察看常见水体中藻类及原生动物。实验资料实验资料显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、血球记数板、酵母菌悬液、盖玻片、
2、无菌滴管、吸水纸、擦镜纸,原生动无菌滴管、吸水纸、擦镜纸,原生动物及藻类。物及藻类。实验步骤实验步骤测定酵母菌细胞的大小测定酵母菌细胞的大小测定的工具:目镜测微尺测定的工具:目镜测微尺 镜台测微尺镜台测微尺目镜测微尺每格实践代表的长度随物镜的放大倍数而改动,也会因运用不同的显微镜而产生误差,因此在运用前必需用镜台测微尺进展校正。 目镜测微尺的校正:在目镜测微尺的校正:在40镜下,看清镜台测镜下,看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,挪动载物台,使目镜测台测微尺的刻度平行,挪动载物台,使目镜测微尺的微尺的0点与镜台测微尺的某
3、一刻度重合,然点与镜台测微尺的某一刻度重合,然后,仔细寻觅两尺第二个完全重合的刻度。计后,仔细寻觅两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10m,所以可得所以可得目尺每格长度目尺每格长度(m)=台尺格数台尺格数10/目尺格目尺格数数菌体大小的测定:制造一片酵母菌的盖片,取菌体大小的测定:制造一片酵母菌的盖片,取下镜台测微尺,将盖片置于载物台上,然后在下镜台测微尺,将盖片置于载物台上,然后在40镜下用目镜测微尺丈量菌体的长和宽。镜下用目镜测微尺丈量菌体的长和宽。酵母
4、菌显微直接计数酵母菌显微直接计数 方法:活菌计数法方法:活菌计数法平板菌落计数法;总菌计数平板菌落计数法;总菌计数法法血球计数板或霍瑟血球计数板或霍瑟Peroff Hausser细菌计细菌计数板二者原理和部件一样,只是厚薄不同而已。数板二者原理和部件一样,只是厚薄不同而已。 取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加取清洁无油的血球计数板,在计数室上面加盖血盖片。盖血盖片。 取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有一小滴,使菌液自行渗入,计数室内不得有气泡。气泡。用用10镜察看并将计数室移至视野中央。镜察看并将计数室移至视野
5、中央。 在在10镜下计数:计数镜下计数:计数4个或个或5个中格的个中格的平均值,然后求得每个中格的平均值。乘上平均值,然后求得每个中格的平均值。乘上16或或25就得出计数区总菌数,最后再换就得出计数区总菌数,最后再换算到每算到每mL菌液中的含菌数。菌液中的含菌数。本卷须知:计上不计下,计左不计右。出芽本卷须知:计上不计下,计左不计右。出芽计一半计一半实验结果实验结果目镜测微尺标定结果:40镜下 倍目镜测微尺每格长度是 m。菌号酵母的直径大小测定结果 目镜测微尺格数 实践直径/m1 2 3 4 5 均值 将显微计数结果记录于下表中。T表示五个中方格中的总菌数;D表示菌液稀释倍数。 各中格中菌数TD二室平均值个/ml12345第一室 第二室 问题与讨论问题与讨论为什么目镜测微尺必需用镜台测微尺来为什么目镜测微尺必需用镜台测微尺来校正
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