外源核苷酸对多代大鼠血清尿酸水平及肾脏损伤的影响

1、百度文库-好好学习.天天向上外源核昔酸对多代大鼠血清尿酸水平及肾脏损伤的影响作者：马奕徐琳琳许雅君李勇【摘要】目的通过三代繁殖试验，观察外源性核甘酸对于啮齿类大鼠血清尿酸水平、肾脏损伤的影响。方法断乳大鼠(F0代)喂饲核甘酸含量分别为0、%、%的受试物饲料90d后，雌、雄1：1交配，所产仔鼠为Fl、F1断乳后喂养90d后进行二代繁殖试验，重复上述实验方法直到多代繁殖实验结束，F3代出生;每一代大鼠在断乳后90d,留取血液样本进行血清尿酸、尿素氮、肌酢含量及肾脏病理检查。结果外源核甘酸使Fl、F2、F3代雄性大鼠血清尿酸含量显著下降，对雌性大鼠无显著影响。4代大鼠均未见肾脏的病理改变。结论在本实

2、验剂量下，补充外源性核甘酸可降低后代雄性大鼠血清尿酸含量，且未见肾脏损伤。【关键词】外源核甘酸;血清尿酸;肾脏损伤AbstractObjectiveToobservetheeffectofserumuricacidlevelsandrenalfunctionbyexogenousnucleotidesinmultigenerationrats.MethodsWeanlingrats(F0)werefedtoexogenousnucleotidesatthedoseof0,%,%,%,%,%for90daysandthenmaleandfemaleratsmatedfor1:1pattern.-

3、1百度文库-好好学习.天天向上TheoffspringofFOwasFl.Flratswerefedtoexogenousnucleotidesfor90daysaftertheywereweaned.Andthengoontothesecondreproductiveexperiment.RepeattheprogressaboveuntilF3ratswereborn.Aftereverygenerationfedfor90days,bloodsampleswerecollectedtodetectthecontentsofserumuricacid,ureanitrogen,creati

4、nine,andthenthepathologicexaminationofkidneywasperformed.ResultsSerumuriclevelsofFl,F2,F3maleratsindosegroupsweresignificantlylowerthanthoseofcontrolgroup,butthesameresultdidn'tappearinfemalerats.NorenalinsufficiencyandPathologicalchangeswerefoundinthefourgenerationrats.ConclusionAtthedoseofthee

5、xperiment,supplementingexogenousnucleotidescoulddecreaseserumuricacidlevelsofmaledescendantratsandrenalinjurywasnotbeenfound.KeywordsExogenousnucleotides;Serumuricacid;Renalinjury近年来，外源核苜酸以其促进胃肠道发育与修复1,2、维持肝脏正常功能3,4、增强免疫能力5等方面的优势已成为医学研究的热点，目前国内外市场上出现了许多核酸保健食品以及核甘酸药品。但是对于外源摄入核甘酸是否会造成血清尿酸升高，进而导致高尿酸血症、

6、痛风等疾病，目前还存在争议。本研究通过大鼠三代繁殖试验，观察外源性核苜酸对于啮齿类大鼠血清尿酸水平及肾脏的影响，从而分析判断摄食外源核甘酸是否会导致近期或远期的高尿酸血症及肾脏的损害，进而为核甘酸的安全性评价及核甘酸添加产品的开发提供科学依据。材料与方法一、材料1、外源核昔酸:4种核昔酸比例为5'AMP：5,CMP：5,GMPNa2:5'UMPNa2=：的混合样品（由大连珍奥生物工程股份有限公司提供）。2、实验动物：健康断乳SPF级SD种大鼠雌雄各60只，由北京大学医学部实验动物中心提供，动物合格证号，SCXK（京）20060008o饲养在SPF级动物室（动物实验环境设施（SP

7、F）合格证书为医动字第012055）,饲养环境温度2123,相对湿度50%-60%o二、方法1、动物分组：大鼠适应性喂养3d后，随机分为6组，即对照组和5个外源核甘酸剂量组，每组雌雄各10只。对照组喂饲普通基础饲料，5个核甘酸剂量组喂饲核苜酸含量分别为%、%、%、的特殊加工饲料。实验期间各组动物自由进食、饮水。2、实验方法：120只断乳大鼠(F0),喂含受试物饲料90d后雌、雄1：1交配，所产仔鼠为Fl。F1断乳后以与其亲代相同的饲料继续喂养90d,然后进行第二代繁殖试验，所产仔鼠为F2,重复上述实验方法直到F3代出生。F0、Fl、F2代大鼠90d喂养结束后，均取雌雄各8只股动脉放血处死，留取

8、血液标本，进行血清尿酸、尿素氮、肌酢含量的检测。检测方法分别为尿酸酶法、苦尿酸法和服酶紫外法，采用日立7180全自动生化分析仪进行。试验结束时所有动物均作系统解剖，制作肾脏组织病理标本HE染色，在显微镜下检查病理改变。3、统计学处理：数据均采用软件进行处理分析。方差齐的数据采用单因素方差分析(onewayANOVA)与SNK、LSD两两比较法进行分析，方差不齐的数据转换后用Tamhane'sT2检验进行组间比较。一、血清尿酸水平F0代雄性大鼠各剂量组血清尿酸与对照组比较，差异均无统计学意义（P>。Fl代雄性大鼠、组血清尿酸含量比对照组低，差异有统计学意义（P&lt

9、;0F2代雄性大鼠、%组血清尿酸含量比对照组低，差异有统计学意义（P<,其余各剂量组血清尿酸也有下降的趋势。F3代雄性大鼠%组血清尿酸含量比对照组低，差异有统计学意义（P<,其余各剂量组血清尿酸也有下降的趋势。FO、Fl、F2、F3代雌性大鼠各剂量组血清尿酸含量与对照组比较，差异均无统计学意义（P>。见表1。表1雄、雌性4代SD大鼠断乳90d喂养后血清尿酸检测结果注：*与对照相比，P<,*与对照相比,P<二、尿素氮、肌酎含量F0、Fl、F2、F3代雄性与雌性SD大鼠各剂量组尿素氮、肌酢含量与对照组比较，差异均无统计学意义（P

10、>。见表2。表2雄、雌性4代SD大鼠断乳90d喂养后血清尿素氮、肌酎检测结果三、组织病理检查大鼠肾脏组织石蜡切片，HE染色结果显示：FO、Fl.F2、F3代雄、雌SD大鼠核甘酸剂量组肾脏组织结构均未见明显异常。讨论本研究显示，在本实验剂量下，额外补充膳食核甘酸并未发现实验动物血尿酸升高，相反在Fl、F2、F3代雄性动物核甘酸剂量组中出现血尿酸下降的趋势。尿酸是人体内喋吟核甘酸的分解代谢产物，80%是内源性的细胞分解代谢的核酸与其他喋吟类化合物经酶的作用分解转化而来，20%则来源于食物。每天代谢产生的尿酸主要由肾脏排出体外，摄入过多含喋吟核甘酸的食物或者喋吟代谢异常的人，易患高尿酸

11、血症，而高尿酸血症和痛风、肿瘤裂解综合征、心血管系统疾病、肾脏疾病等均相关610。本研究发现长期补充外源性核甘酸的各剂量组各代大鼠均未见血尿酸明显升高,反而在雄性大鼠出现血尿酸水平降低，分析其原因，可能由于大鼠体内存在尿酸酶,当外源摄入核甘酸导致动物体内尿酸生成增多时，则会激活尿酸酶,将体内尿酸分解从肾脏排出体外11；另外，也可能与补充外源性核苜酸反馈性减少肝脏对于核苜酸的从头合成有关12,具体是上述哪种机制在起作用，有待在进一步探讨。本研究中血尿酸水平的降低只出现在后代雄性动物中，而对雌性动物的血尿酸水平没有显著影响，这可能与雌性动物体内不同的激素水平有关。YahyaouiR等13研究发现，

12、雌激素有促进尿酸通过肾脏排泄的作用。SuminoH14与HakAE15的研究发现，绝经后的妇女血尿酸水平升高，而雌激素治疗有效。分析本实验中核甘酸剂量组的雌性大鼠并未像雄性大鼠一样出现血尿酸变化的原因可能为雌激素促进肾脏排出尿酸，尿酸在短时间内的体内蓄积不明显，因此，对于尿酸酶的激活作用不明显，从而没有出现尿酸的大量降解。本研究显示，在本实验剂量下，额外补充膳食核甘酸并未使4代大鼠的血清尿素氮、肌酎含量升高，而且组织病理检查也并未发现肾组织细胞的结构异常，侧面提示没有出现明显的肾功能损伤。综上所述，通过三代繁殖实验发现，木实验剂量的外源核甘酸添加没有导致各代大鼠血尿酸升高的作用，且没有造成明确

13、的肾脏损伤，这一发现对于核甘酸保健品和药品的开发具有现实意义。【参考文献】IHolenE,Jonssonnucleotidesandintestinalcelllines:ofgrowthJ.NutritionResearch,2004,24(3)：197207.2BeloA,MarchbankT,FitzgeraldA,GhoshS,etal.Gastroprotectiveeffectsoforalnucleotideadministration.Gut,2006,55(2):165171.3Perez MJ, Suarez A,Gomez Capilla JA, et al.Dietar

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15、dulateantigenspecifictype1andtype2tcellresponsesinyoungc57bl/6micelJ.Nutrition,2000,16(6):442446.6VogtB.Urateoxidase(rasburicase)fortreatmentofseveretophaceousgoutJ.NephrolDialTransplant,2005,20(2):431433.7DavidsonMB,ThakkarS,HixJK,et,clinicalconsequences,andtreatmentoftumorlysissyndromeJ.AmJMed,200

16、4,116(8):546554.SIshizakaN,IshizakaY,TodaE,etal.Associationbetweenserumuricacid,metabolicsyndrome,andcarotidatherosclerosisinJapaneseindividualsJ.ArteriosclerThrombVaseBiol,2005,25：10381044.9KleinBE,KleinR,LeeKE.ComponentsofthemetabolicsyndromeandriskofcardiovasculardiseaseanddiabetesinbeaverdamJ.Di

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