微生物实习报告汇总

1、实习报告实习名称食品微生物检验实习系别生物与化学工程系年级专业学生姓名指导老师王瑶琼、吴菲菲、黄大川邵阳学院2013年12月10日一、实验时间与地点时间：2013年下学期第1315周地点：邵阳学院李子园校区生物与化学工程系微生物实验室二、实习过程概述11.18下午在2栋教学楼204室举行动员大会11.18至12.19查找资料并设计实验方案。11. 20上午提交实验方案并通过了，下午再去领实验器材，清洗实验器材，烘干，包扎。11.21 配制牛肉膏蛋白陈培养基，做无菌检查11.22 样品中细菌的检测进行十倍稀释、接种11.23 细菌菌落的观察及计数11.24 配制察氏培养基，做无菌检查11.25

2、样品中酵母菌的检测进行十倍稀释、接种11.26 11.28观察酵母菌落及计数11.29 配制察氏培养基，做无菌检查11. 30样品中霉菌的检测进行十倍稀释、接种12. 0112.05观察霉菌菌落及计数12.06配制乳糖发酵培养基，做产气实验12. 07观察产气情况12. 0812.10数据的处理分析，完成实习报告。三、实习内容（一）香干中细菌含量的测定：I、实验材料（1）、实验器材及试剂设备：电热恒温培养箱37c±1、电磁炉、电子天平、PH试纸、吸管hnl、10ml6个、烧杯（1000ml）一个、三角瓶（500ml、250ml）各一个、培养皿（直径90mm）9个、试管9个、试管架、酒

3、精灯、研钵、剪刀、灭菌镜子、75%酒精棉球、量筒（500ml）、玻棒、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布试剂：75%乙醇、生理盐水、Imol/L氢氧化钠溶液(2)、牛肉膏蛋白陈培养基配方：牛肉膏3g、蛋白陈10g、NaCl5g、琼脂1520g、无菌水1000ml.pH7. 47.6配置步骤：称量溶化调pH分装加塞包扎灭菌倒平板(3)、检样稀释及培养以无菌操作，将检样豆干25g剪碎、研磨以后，放于盛有225nli无菌水的三角瓶内，并在三角瓶中放入玻璃珠，经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。用1ml无菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁缓慢注入含有9ml无菌水的无菌试管内，

4、振摇试管混合均匀，做成1：100的匀液。另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支hnl灭菌吸管。根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移0.3ml稀释液于无菌培养皿内，每个稀释度作三个培养皿。同时做好空白对照组。稀释液移入培养皿后，应及时用涂布器在培养基表面将样品均匀涂布。等琼脂凝固后，翻转培养皿，置(36±1)C恒温箱内培养24h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g样品所含菌落总数。1【、菌落计算方法(1)菌落计数方法做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要

5、时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。（2）菌落计数的报告平板菌落数的选择选取菌落数在30100之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用三个平板，应采用三个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布乂很均匀，即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时（菌落之间无明显界线），若仅有一条链，可视为一个菌落数；如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。稀释度的选择应选择平均菌落数在30100之间的稀释度，乘

6、以稀释倍数报告之。若所有稀释度平均菌落数均大于100,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。若所有稀释度的平均菌落数均不在30100之间，其中一部分大于100或小于30时，则以最接近30或100的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。I 37 ±UC, 24h±211（4）、下表为实验时记录的豆干中细菌的含量数据：样品中细菌的含量稀释度ICTI。”I。平板一19612738平板二18113545平板三20311447平均菌数（个/

7、g）注：每个平板加入0.3ml的稀释液其中，细菌菌落全为白色。（二）豆干中酵母菌含量检测1、实验材料（1）、实验器材及试剂设备：恒温培养箱、电子天平、锥形瓶容量（500mL、250mL）各一个、无菌吸管1mL、10mL6个、无菌培养皿9个、无菌试管20个、试管架、酒精灯、研钵、剪刀、灭菌镜子、75%酒精棉球、牛皮纸袋、塑料试剂：蔗糖3g、NaN030.3g、K2HP040.1g、KC10.05g、MgSO4-7H200.05g、FeS040.001g、琼脂1.5-2g、无菌水1000ml（2）察氏培养基配方：蔗糖30g、NaN033g、K2HP040.1g、KC10.5g、MgSO4-7H20

8、0.5g、FeS040.01g、琼脂15-20g、无菌水1000ml、自然pH配制步骤：称量及溶化量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaN03、K2HP04、KC1、MgS04o依次逐一加入水中溶解。按每100ml培养基加入1ml0.1%的FeS04溶液。定容待药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。分装、加塞、包扎。高压蒸汽灭菌0.103MPa,121°C灭菌20min。倒平板I【、操作步骤（1）、样品的稀释样品预处理：以无菌操作，将检样香干25g剪碎、研磨以后，放于盛有225ml无菌水的三角瓶内，经充分振摇做成

9、1：10的均匀稀释液。取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中，另换一支1mL无菌吸管反复吹吸,此液为1:100稀释液。按上步操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管。根据对样品污染状况的估计，选择3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取0.3mL样品匀液于3个无菌平皿内。同时作好空白对照。稀释液移入培养皿后，应及时用涂布器在培养基表面将样品均匀涂布。等琼脂凝固后，翻转培养皿，置（28±1）C恒温箱内培养3-5天取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g样品所含菌落总数。山、结果与报告

10、（1）、计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。若所有平板上菌落数均大于150CFU,则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。若所有平板上菌落数均小于10CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算；如为原液，则以小于1计数。（2）、报告菌落数在100以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。菌落数大于或等于100时，前3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0代替位数来表示结果：也可用10的指数形式来表示，此时也按“四舍五

11、入”原则修约，采用两位有效数字。称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告，报告酵母数。实验具体流程如下：下表为实验时记录的香干中酵母菌的含量数据：样品中酵母菌的含量稀释度10HICTIO"平板一17123平板二022平板三21175平均菌数（个/g）注：每个平板加入0.3ml的稀释液酵母菌菌落呈白色，且表面很潮湿。（三）豆干中毒菌霉菌含量检测1、实验材料（1）、实验器材及试剂设备：恒温培养箱、电子天平、锥形瓶容量（500mL、250mL）各一个、无菌吸管1mL、10mL6个、无菌培养皿9个、无菌试管20个、试管架、酒精灯、研钵、剪刀、灭菌镣子、75%酒精棉球、

12、牛皮纸袋、塑料试剂：蔗糖30g、NaN033g、K2HP041g、KC10.5g、MgSO4-7H200.5g、FeS040.01g、琼脂15-20g、无菌水1000ml（2）察氏培养基配方：蔗糖30g、NaN033g、K2HP04lg>KC10.5g、MgSO4-7H200.5g、FeS040.01g、琼脂15-20g、无菌水1000ml、自然pH配制步骤：称量及溶化量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaN03、K2HP04、KC1、MgS04。依次逐一加入水中溶解。按每1000ml培养基加入10ml0.1%的FeS04溶液。定容待药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加

13、水至所需体积。加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。分装、加塞、包扎。高压蒸汽灭菌0.103MPa,121°C灭菌20min。倒平板(3)、检样稀释及培养以无菌操作，将检样香干25g剪碎、研磨以后，放于盛有225nli无菌水的三角瓶内，并在三角瓶中放入玻璃珠，经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。用1ml无菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁缓慢注入含有9ml无菌水的无菌试管内，振摇试管混合均匀，做成1：100的匀液。另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支hnl灭菌吸管。根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择3个适宜稀释度

14、，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移0.3ml稀释液于无菌培养皿内，每个稀释度作三个培养皿。同时做好空白对照组。稀释液移入培养皿后，应及时用涂布器在培养基表面将样品均匀涂布。等琼脂凝固后，翻转培养皿，置(28土1)C恒温箱内培养5-7天取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g样品所含菌落总数。实验具体流程如下:选二个金迪的稀释度，杵以0.3ml量加入火困的培养基中均为涂布28±1,72h±2h菌落计数数据处理分析，报告下表为实验时记录的豆干中霉菌的含量数据:样品中霉菌的含量稀释度10HI。-'10-6平板一305平板二221平板三822平均菌数

15、（个/g）注：每个平板加入0.3ml的稀释液霉菌菌落有菌丝，菌落较大，有白色、黄色、黑色的菌落。（四）、香干中大肠杆菌的检测大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中大肠菌群数系以100mL（g）检样内大肠菌群最可能数（MPN）表示。I、实验材料（1）、实验器材及试剂设备：恒温箱（36±1）、电子天平、乳钵、试管20个、吸管（1mL、10mL）6个、三角烧瓶（500ml、250ml）各一个、酒精灯、试管架、烧杯（1000ml）一个、杜氏小管试剂

16、：结晶紫1克、95%乙醇20ml、1%草酸核水溶液80ml、0.85%灭菌生理盐水、磷酸二氢钾34g、lmol/L氢氧化钠175ml、无菌水5000ml、蛋白陈30g、乳糖25g、2%伊红水溶液20ml、0.5%美蓝水溶液13nll、胰蛋白陈20g、3号胆盐1.5g、磷酸氢二钾2g、氯化钠100g、琼脂20g、0.65%美蓝溶液10ml、0.04%溟甲酚紫水溶液25ml、猪胆盐5g、0.4%溟甲酚紫水溶液2.5mlI【、操作步骤（1）、检样稀释以无菌操作将检样25g放于有225mL无菌水的灭菌玻璃瓶内（瓶内予置适当数量的玻璃珠），经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。（2）乳糖发酵试验分别

17、取1ml1:10的均匀稀释液于9个乳糖胆盐发酵管内，置36±1C温箱内，培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。（3）、分离培养将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置36±1温箱内，培养18-24h,然后取此观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。（4）、证实试验在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36±1温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。（5）、报告根据证实为:实

18、验具体:i群的MPN值。IIL结果报告乳糖胆盐发酵管现象4只试管都不产生气泡（注:每只试管加入1ml稀释液，产气的现象为杜氏小管中有气泡产生。）试验结论：香干中无大肠杆菌群、实验经验与心得总结（一）、实习体会1 .团队的重要性，一个人是不可能在三星期内完成实习内容的，必须在多人共同努力下才能完整的完成实验，才能很好的完成实验。2 .实验前必须有详细的实习计划书，熟话说的好，万事开头难，好的开始是成功的一半。制定详细的计划书可以很好的帮助我们后面实验的过程，为我们节约了很多时间。合理的规划了我们的时间.3 .实验前资料查阅的重要性，没有好的指导，就不可能做出好的结果。只有明确了我们需要做什么，我

19、们需要什么样的培养基，什么样的试剂以及仪器。只有在准备充分的前提下才能有条不紊的进行试验。4 .组长的重要性，如果狼群没有狼王，那就没有任何威能力。组长合理的分配了各个组员的任务，使大家分工明确，知道该做什么，要做什么，这样就不会出现有组员打酱油的情况发生，也不会让组员感觉无聊。让大家都参与进来，为实验做自己的一点贡献，做出实验成果时，都能有一定的收获。一分耕耘，一分收获。组长还可以协调组员有时发生的矛盾。5 .自己动手的重要性。看着别人做，好像很简单的样子，可是当自己做的时候就不是那么回事了，没有想象中的简单。实践出真知。6 .不要怕失败，没做实验前感觉实验还挺简单的，安排那么多时间，纯粹是

20、浪费。后来自己做了后才知道，事情并不是想象中的那么简单不仅耗时，而且耗力。不知道失败了多少次后才做出了实验结果。坚持到最后的都是英雄。7 .做事要有始有终，不能刚开始满腔热情，但是还没开始一半就半途而废了。微生物实验不要想做一次就能成功的。一般是要多次才能成功。所以要坚持做完。8 .操作一定要标准，微生物实验室一项精密的实验，稍微有点疏忽或者操作不当，可能实验就报废了，得重新来过。9 .细节的重要性，细节决定成败。每次试验完后，实验桌一定要整理干净，实验药品一定要放回原处，以方便下次做实验以及另外组做实验（二）、试验中存在的不足与建议：1、实验室的样品试剂需好好保存，每次用完后都需盖好放回原处好好保存，防止变质。2、样品在研磨时，要研磨充分。3、在做细