河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》考试试卷(4090)

1、河南农业大学考研专业课现代分子生物学课程试卷（含答案）学_年第 _学期考试类型：（ 闭卷）考试考试时间 ： 90 分钟年级专业学号姓名1、分析题（ 5 分，每题5 分）1. 写出从组织中抽取RNA勺关键步骤，并解释如何判断 RNA质量。答案：1）从组织中提取 RNA 的步骤如下： 将组织在液氮中磨碎，每 50 100mg组织加入1ml TRIzol 裂解液溶解样品,充分吹打混匀。 每 1ml TRIzol 加入 2.0ml氯仿，剧烈震荡 15s ，室温放置5min 。 4 C, 10000g 离心 15min,此时 RNA 大多集中在水相中。 将水相转移至新的离心管中，加入等体积异丙醇,室温放

2、置10min 。 4C, 10000g 离心 10min,此时可在离心管底部观察到白色沉淀,即为 RNA 。 用 75 冷勺乙醇洗涤沉淀,475C0,0g 以下,离心 5min ,弃上清。 超净台中吹干，加入无 RNase的水溶解。（2）检测 RNA 质量的方法如下： 凝胶成像：取适量RNA氯化钠加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖凝 胶电泳，如果 28S 和 18S 条带明亮、清晰，并且 28S 的亮度在 18S 条带的两倍以上，则认为 RNA 的质量是好的。 吸光度检测：使用紫外分光光度计检测 RNA样品在260nm、 280nm 处的吸光度，若两者的比值在 1.82.0时，可认为RNA纯 度良好，

3、蛋白质等污染物其他物质的污染可以接受。解析：2、判断题（ 55 分，每题 5 分）1. 蛋白质的磷酸化和去磷酸化是可逆反应，该可逆反应是由同一种 酶催化完成的。（ ）答案：错误解析：蛋白质蛋白激酶是由蛋白激酶催化的，而芳基去磷酸化是由蛋 白质羧酸酶催化。在能识别一个细胞的分化以前，有一个预先保证细胞怎样变化的 时期，这一阶段被称为细胞决定。（ ） 答案：正确解析：细胞决定是指细胞在发生可识别的形态变化之前，就已受到约 束而向特定方向分化， 这时细胞内部已有所改善，确定了未来的发育 命运。2. 在遗传作图中，1厘摩（cM相当于1Mb的碱基长度。（）答案：错误解析：厘摩（ cM ），重组频率的测量

4、单位。 1 个厘摩定义为重组频率100 次中发生 1 次。对于人类来说，平均来说， 1 厘摩相当于 100 万 个碱基对。3. 在真核生物中转录和翻译分别在细胞核和细胞质中进行。（）答案：正确解析：真核生物中，转录在细胞核中需要进行，而翻译在细胞质中进 行。4. 根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针，可从DNA文库筛选到相应的基因。（）答案：错误解析：筛选 DNA 文库的探针必须是根据 DNA 序列制备的，而不是蛋 白质。癌基因仅存在于肿瘤细胞中，正常细胞一旦表达即引起细胞的恶 变。（ ） 答案：错误解析：癌基因不仅仅存在肿瘤细胞中，在正常细胞也恒定有存在和表 达，只有在

5、多种诱因存在时，细胞才会发生癌变。5. 由于遗传密码子的简并性，一个氨基酸可以有几种tRNA但通常只有一种氨酰tRNA合成酶。（）答案：正确解析：许多氨基酸的碱基的第 1和第 2个碱基相同，只有第 3个碱基 不同，即为密码子的简并性。由于遗传密码子的简并性，一个氨基酸 可以有几种tRNA，但通常只有一种氨酰tRNA合成酶。6. 当细菌DNA受到紫外光照射时，细菌细胞内会启动一个被称为SOS勺诱导型DNA修复系统。参与SOS DNAI复系统的许多基因都同时 受RecA阻遏蛋白的抑制。（）答案：错误解析：当细菌 DNA 受到紫外光照射时，细菌细胞内会启动一个被又称 为被称作SOS的诱导型DNA修复

6、系统。参与SOS DNA修复系统的 许多基因都同时受 LexA 阻遏蛋白的抑制。7. 弱化作用这种调控模式不可能出现在真核生物基因表达调控中。（）答案：正确解析：弱化作用是指通过操纵子前导区内类似终止子的一段 DNA 序列 （衰减子）实现的细菌辅助阻遏作用的一种精细调控，因此不可能出 现在真核生物基因表达调控中。8. 同源重组主要用于修复胸腺嘧啶二聚体。（） 扬州大学2019研答案：错误解析：9. B 型双螺旋DNA是左手螺旋，而Z型是局部右手螺旋。（）答案：错误解析：DNA的第三级结构包括右手螺旋（如 ADNA和BDNA ）和左 手螺旋（如 ZDNA ）。3 、名词解释（ 50 分，每题 5

7、 分）1. 基因芯片答案：基因芯片又称 DNA 芯片，是指采用原位合成（或显微打印手 段），把数以万计的 DNA 探针黏合于支持物表面上，产生二维 DNA 探针阵列，然后和标记的仪器样品进行杂交，通过检测杂交信号来实 现试样对生物样品并行、快速、高效地检测或临床医学诊断，因为闪 存常见硅芯片作为固相支持物，且在制备过程运用了计算机芯片的制 备技术。解析：空DNA 文库答案： DNA 文库是指某生物基因组中所有可表达的基因组片段，经 mRNA 反转录后获得相应的 cDNA 的集合，将这些 cDNA 的集合分 别与克隆载体重组，贮存在一种受体菌克隆子群体之中，这样群体称 为 cDNA 文库。由于

8、cDNA 文库包含了该生物所有的可表达基因岩波 片段，因此可随时筛选出需要的目的基因片段。不必再通过 PCR 制备， 可以节省开支和成本，提高效率。解析：空2. microsatellite DNA宁波大学 2019 研答案： microsatellite DNA的中文名称是微卫星 DNA ，是指对一类高度重复序列 DNA ，是指在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度 可以高达每分钟几万转)时， DNA 分子将按其大小分布在离心管内不 同密度的氯化铯介质中，不同层面的 DNA 形成的不同的条一个或多 个小的卫星带中的 DNA 。这种 DNA 的视频含有异常高或低的 GC 含量，常会在主要 DN

9、A 带附近有缘一个次带，其浮力密度曲线出现 在主带的前面或后面。解析：空3. 全能性( totipotency )答案：全能性是指经分裂和分化后生物的细胞或组织，依旧可以分化 成该物种的所有组织和器官，产生完整有机体的潜能或特性。植物植 物高度背离的体细胞仍保持全能性，动物中受精卵具有全能性，随着 其用光个体发生的进行和决定之后全能性便逐渐丧失掉。解析：空4. 基因组答案：基因组是指生物体内遗传信息的集合，是某个单个物种这类细 胞内全部 DNA 分子的总和。包括核中的染色体 DNA 和线粒体、叶绿 体等亚细胞器中的 DNA 。大小不一基因组大小与原核生物和低等真核 生物的形态复杂性呈正相关，在

10、软体动物和其他高等真核细胞生物中， 由于重复 DNA 的存在，基因组大小不再与可不生物的形态复杂性呈 正相关。解析：空5. 复制叉答案：复制叉是指 DNA 复制时在 DNA 链上通过解旋、解链和单链结 合蛋白的结合等过程形成的 Y 字型结构。双链 DNA 解开成两股链分 别进行已成复制时候，在复制叉处作为模板格式化的多肽 DNA 解旋， 同时合成新的 DNA 链。复制盗蛛从复制起始点开始沿着 DNA 链连续 移动，起始点可以实施单向复制或抹除双向复制。解析：空6. 结构基因答案：结构基因是编码任何蛋白质或非调控因子的 RNA 的基因，是操 纵子的一部分。它编码的内容呈现广泛的功能和结构，包括结

11、构蛋白、 酶类（如催化酶）或不继续执行调控功能的 RNA 分子。这些基因是细 胞球技竞技状态形态和功能特征所必需的。在真核细胞中，结构基因 被内含子和外显子所分隔；而在原核细胞中则是连续的。与调控基因、 编码启动子的基因不同，结构基因在蛋白质的翻译中起到实质性的作 用。编码蛋白质（或酶）或 RNA 的基因。功能是转录把佩带的遗传信 息转录给 mRNA ，再以 mRNA 为模板合成具有特定氨基酸序列的蛋 白质。解析：空7. 染色体结构域（ domain of a chromosome ）答案：染色体结构域是指一个连续的整体整体，其中超螺旋结构独立 于其他结构域。也可指包含表达基因的一个广泛区域，

12、这个基因对 DNase I有高度敏感性。是放大观察的程度达到可以观察染色体整体 结构的程度，放大倍数再大的尚佩县就可以看到染色体的具有功能的 基因。解析：空8. 染色质免疫沉淀技术答案：染色质免疫沉淀技术（ CHIP ）是研究体内蛋白质与 DNA 相互 作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的介导，唾液可以真实地反映 体内蛋白因子与核酸 DNA 结合的状况。解析：空9. 鸟枪法答案：鸟枪法又称“霰弹法”，是指随机先将整个基因组打碎成小片 段成功进行测序，最终利用计算机根据序列之间的重叠关系进行排序 和组装，并确定它们在基因组中的正确中曾位置的方法。优点是速度快，简单易行，成本较低，可以在较短的时间

13、内通过集中机器和人力的方法电脑程式获得大量的基因片段。但是要用它来测序，最终排序 结果的拼接组装更为困难，尤其在部分重复序列较高的地方难度较大， 此外有许多序列片段难以定位在确切的染色体上，成为游离片段，同 时又会有许多地方由于没有足够的覆盖率而形成空缺，影响其准确性。解析：空4、填空题（ 40 分，每题 5 分）1. 半乳糖对细菌有双重作用：一方面；另一方面。所以需要一个不依赖于cAMPCR的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一 个依赖于cAMPCR的启动子S1对高水平合成进行调节。有 G时转录从 开始，无G时转录从开始。答案：可以作为碳源供予细胞生长 |它又是细胞壁的成分 |S2

14、|S1解析：半乳糖既可以作为细菌线粒体的碳源供细胞生长，又是细菌细 胞壁的成分。有 G 时转录从 S2 开始，即不依赖于 cAMPCRP 的启动 子 S2 进行本底水平的永久型合成。无 G 时转录从 S1 开始，即依赖于 cAMPCRP 的启动子 S1 对高水平合成。2. H型限制性内切核酸酶相对分子质量较小，通常由个亚基所组成，这类酶的识别序列特点是。答案： 2|回文序列解析：限制酶巯基是指识别特定的脱氧核苷酸序列，并对每条链中特 定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。根据限制线粒体的结构，辅因子的消费市场切位辅因子与作用方式，可将限制酶分为三种类型，分别是第一型（Ty

15、pe I）、第二型（Type H）及第三型（Type皿）。其中H型限制性内切多肽核酸酶相对分子质量较小，通常由 2 个亚基所组成，这类酶的识别序列特点 是回文类型序列。3. 碱解法和清亮裂解法是分离质粒的两种常用的方法，二者的原理 是不同的，前者是根据，后者则是根据。答案：质粒和染色体顺式的差异 |质粒和染色体 DNA 分子质量的差异 解析：碱裂解法是基于染色体 DNA 和质粒 DNA 的变性和复性的差异 达到达致分离目的。 pH 让质粒 DNA 和染色体 DNA 变性，然后沉淀 蛋白质。接着把 pH 值调至中性，质粒 DNA 较小，很容易复性成双链。 染色体 DNA 较大，不会复性，缠结成网

16、状不溶物质，接着可以通过离 心除去。清亮裂解法一般是根据质粒和染色体 DNA 分子质量的差异。4. 在用SDS分离DNA寸，要注意SDS的浓度，0.1和1的SDS勺作 用效果是不同的，前者，后者。答案：只把 DNA 分离出来 |可把 DNA 和 RNA 一起分离出来解析：DNA通常或都和蛋白结合在一起形成染色质，SDS可以使蛋白质变性，从而使其与 DNA 分离。不同浓度的 SDS 的作用效果不同，0.1 的 SDS 只把 DNA 分离出来， 1 的 SDS 可把 DNA 和 RNA 一起分 离出来。5. 质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的 称为，不受宿主细胞蛋白质合成的严

17、格控制称为。答案：严紧型质粒 |松弛型质粒解析：按照质粒的复制特点，可分为严紧型质粒和松弛型质粒。严紧型质粒复制伴随着染色体复制而进行，拷贝数少，受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制。型质粒可在无寄主蛋白质合成的情况下复制，不 控管应受宿主细胞蛋白质合成的严格控制。6. PCR 的特异性取决于：和。答案：引物与模板的特异结合 | 酶对引物的有效延伸解析：PCR即聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的 DNA片段的分子生物学技术，它可比作是生物体外的特殊 DNA 复制，其最大 特点是能将化学成分的 DNA 大幅增加。 PCR 的特异性取决于引物与 酶的特异结合和模板对引物的有效延伸。7. 乳糖操纵

18、子阻遏蛋白由基因编码，与序列结合，对乳糖操纵子起 阻遏作用。答案：调节 |操纵区解析：8. 基因表达调控主要表现在两个方面：和。其中，后者又包括 mRNA 加工成熟水平上的调控和。答案：转录水平的调控 |转录后水平的调控 |翻译水平上的调控解析：基因表达调控是生物体内基因表达的调节控制，使细胞中基因表达的过程在时间、空间上处于有序状态，并对环境条件的复杂性变化作出反应的复杂过程。基因表达的调控可在多个层次上进行，主要表现在转录水平的调控和转录后水平的调控两个方面，转录后水平的 调控又包括 mRNA 加工成熟水平上的调控和翻译水平上的调控。5、简答题（ 35 分，每题 5 分）1. 简述全基因组

19、鸟枪测序的基本步骤。答案： 全基因组鸟枪测序法是在获得一定的遗传及物理图谱信息 的基础上，将基因组 DNA 分解成 2kb 左右的数百万个 DNA 小片段 进行随机测序，辅以一定数量的 10kb 的克隆和 BAC 克隆的末端测序， 利用超级计算机进行整合及序列计算机组装。该基本原理是一种广泛 使用的 DNA 测序的方法，比传统的测序法快速，但精确度较差。其 具体步骤为：（1 ）建立高度随机、插入片段大小为 2kb 约莫的基因组文库。 克隆数要达到一定数量，即经末端测序的克隆片段的碱基总数应达到 基因组 5 倍以上。（2）高效、新一轮的末端测序。对文库中每一个克隆，进行两端 测序。在完成提前完成

20、流感嗜血杆菌的基因组测序时，使用了 14 台测 序仪，用三个月时间完成了必需的 28463 个测序反应，测序总长度达 6 倍基因组。（3）序列集合。利用新的计算机软件，不断完善序列集合规则， 最大限度地排除错误的连锁匹配。（4）填补缺口。有两种待填补的资金缺口，一是没有相应模板DNA 的物理缺口，二是有模板 DNA 但却未测序的序列缺口。可以同时建立插入片段为1520kb的入文库以备缺口填补。解析：空2. 简述蛋白质的生物合成过程。 暨南大学 2018研答案： 蛋白质生物合成较为是细胞最为复杂的活动之一。参与细 胞内蛋白质生物合成的物质除原料氨基酸外，还需要 mRNA 作为模板、 tRNA 作

21、为特异的氨基酸“搬运工具”、核糖体作为蛋白质合成的装 配场所、有关的酶与蛋白质因子参与副反应、 ATP 或 GTP 提供能量。 翻译过程包括起始、延长和终止三个阶段。生物合成过程如下：(1 )起始：该过程是指 mRNA 、起始氨基酰 tRNA 分别与核糖 体结合而形成翻译起始复合物。(2 )延长：翻译初始复合物形成后，核糖体从 mRNA的5 '端向3 '端移动，依据密码子顺序，从N端开始向C端合成多肽链。这是一 个在核糖体上重复进行的进位、成肽和转位的循环整个过程，每完成1 次，肽链上即可增加 1 个氨基酸残基。该过程也被称为核糖体循环。 这一过程除了可能需要 mRNA 、tR

22、NA 和核糖体外，还需要数十种延 长因子以及 GTP 等参与。( 3 )终止：终止密码子不被任何不够氨基酰 tRNA 识别，释放因子RF能识别终止密码子而进入 A位，这一识别过程需要水解 GTP。RF 的结合可触发核糖体构象改变，将肽基转移酶活性转变为变革酯酶 活性，水解肽链与结合在 P 位的 tRNA 之间的酯键，释出合成的肽， 促使 mRNA 、tRNA 及 RF 从核糖体脱离。 mRNA 模板和各种蛋白质 因子、其他组分都可被重新利用。解析：空3. 反转录病毒与反转录转座子有什么不同？答案： 反转录病毒是一类真核生物的 RNA 病毒，它能将自身基因 组通过反转录形成 DNA 拷贝整合进宿

23、主基因组染色体中。反转录转座子是指由通过以 RNA 为中介，反转录成 DNA 后进行 转座的可动元件。这样的转座过程称为反转座作用。 RNA 介导实现转 座的转座元件，是生物体基因组中存在的 DNA 序列。二者不同点： DNA 被转录为 RNA ，然后被反转录为 DNA ，并被 插入基因组新的位点，反转录转座子与反转录病毒的不同之处在于反 转录转座子没有一个有传染能力的（病毒）形式。解析：空4. 典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤。暨南大学2018研答案： 典型的 DNA 重组实验的主要步骤如下：（1 ）提取供体生物的目的基因（或称外源基因）片段和载体质粒。（2）选择合适的酶切位点分别对目的

24、基因片段和载体进行酶切。（3） 利用连接酶将目的基因片段和片段连接起来构成重组DNA 分子。（4）将重组 DNA 分子转进生殖细胞受体细胞并在受体细胞中复 制保存。（5）利用载体上的标记抗原对受体细胞进行筛选和鉴定，选择出 稳定表达和遗传重组 DNA 的受体细胞。解析：空5. 简述真核生物rRNA基因、tRNA基因和mRNA基因的转录机制答案：（ 1） rRNA 基因的转录机制真核生物中，由RNA聚合酶I催化前体rRNA的合成，RNA聚 合酶I转录产物是45S rRNA，经过剪接润色产生除5S rRNA外的各 种 rRNA 。真核生物的 rRNA 基因是几种中度重复的基因，拷贝数都 在数百个至

25、数万个，人类的 rRNA 基因约为 300 个拷贝。（2）tRNA 基因的转录机制RNA聚合酶皿催化产生前体tRNA，经过加工后成为未成熟的 tRNA。前体tRNA加工包括：由限制性内切核酸酶切断 tRNA两 端；外切核酸酶从5 '端逐个切去附加序列；在3 '端加上CCAOH 结构；个别碱基发生修饰反应。（3）mRNA 基因的转录机制RNA聚合酶H催化前体 mRNA的合成，mRNA转录后的加工 包括：5 '端加帽子、p6ly端加A）、选择性剪接和RNA的编辑等。解析：空6. 请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类。答案： RNA 既是信息分子，又是功能分子，它在表达过程

26、中起着 信息提取和加工的作用。主要表现如下：（1）RNA 是信息传递的房屋中介。在中心法则中，遗传信息从 DNA 传递到 RNA ，最终传递给酵素。（2）RNA 可以用作微生物催化剂。 20 世纪 80 年代初， T.Cech 发现 RNA 也可成为生物催化剂，称为核酶。3 ） RNA 携带有遗传信息。在一些病毒中，不是 DNA ，而是RNA 携带遗传信息。（4 ）RNA 调控遗传信息。遗传信息从 DNA 到蛋白质的过程中， RNA 并非只是起简单的散播传布遗传信息作用， RNA 通过各种剪接、 编辑和再编码方式，调控基因表达的方向，调控遗传信息。如 RNAi 和反义 RNA 。包括全面开放和

27、关闭基因，增加或减少质粒，使一种数 十种基因合成出多种蛋白质。从而调控生物的多种不同发育分化新陈 代谢等。（5 ）RNA 参与蛋白质合成。 tRNA 是蛋白质合成中的接合器， rRNA 构成蛋白质合成的场所核糖体， mRNA 携带蛋白质类似物 的密码子。解析：空7. 简述tRNA mRN和rRNA的功能。答案： （1）tRNA 的功能： tRNA 在蛋白质合成投资过程中，将 活化的氨基酸搬运到核糖体上，并根据 mRNA 的遗传密码依次准确地 将它携带的氨基酸链接多肽链，可以参与蛋白质的生物合成。（2）mRNA 的功能：传达 DNA 上的遗传信息，作为蛋白质类 似物的模板，决定氨基酸的氨基酸重新

28、排列排列顺序。把 DNA 上的 遗传信息精确无误正确性地转录下来，负责将它携带的噬菌体在多核 糖体负责上翻译成蛋白质。（3）rRNA 的功能：一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖 体。核糖体是合成蛋白质多肽的场所。 rRNA 还可作为 mRNA 的支架， 使 mRNA 分子在其上展开，实现蛋白质的类似物。解析：空6、论述题（ 20 分，每题 5 分）1. 什么是蛋白质的变性作用？简述其机制，如何判断蛋白质的变性？ 如何避免蛋白质变性？答案： （ 1）蛋白质的变性作用是指蛋白质分子受到某些物理、化 学利空因素的影响时，发生生物活性丧失，溶解度降低等政治性改变， 但是不涉及一级结构中改变，而是蛋

29、白质分子空间结构消减的现象。 脂质变性变性不涉及共价键的破裂，一级结构仍保持完好。（2）蛋白质变性过程中，往往会发生下列现象，通过这些现象可 以判断蛋白质的变性：生物活性丧失。蛋白质的生物活性是指蛋白 质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体等大分子，以及其他性质如 血红蛋白的有载氧能力，肌球蛋白与肌动蛋白相互作用之时收缩能力 等。一些丝氨酸基团暴露。蛋白质在变性时，有些原来在分子内部 包藏胺基而不易与化工原料起反应的侧链基团，形态由于结构的伸展 松散而暴露出来。一些理化性质发生改变。蛋白质变性后，疏水基 外露，溶解度降低，一般在等电点区域不溶解，分子相互凝集，形成 沉淀。球状蛋白变性后，分子形状

30、也有所改善，蛋白质分子伸展，不 对称程度增高，反映在黏度增加、扩散系数降低以及旋光和红外吸收 发生变化。生化性质发生改变。蛋白质变性后，分子结构伸展松散， 易被核酸水解酶分解。（3 ）为了避免蛋白质变性要尽量少蛋白质受物理因素，如加热、 加压、脱水、搅拌、振荡、紫外照射、超声波等的风险因素影响及材料科学因素，如强酸、强碱、尿素、重金属盐、十二官能团磺酸钠等的影响。解析：空2. 试述基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义。答案： 基因芯片是指把大量探针分子固定于支持物上后和标记的 样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而样品 分子的数量和序列信息。（1）基因芯片的工作原理 应

31、用已知核酸序列作为靶基因和互补的探针核苷酸序列杂交，通 过的信号检测进行定性和定量分析。 即将把许多特定的寡核苷酸片段或 cDNA 基因片段作为靶基因， 有规律地排列浮动上支持物上。 样品 DNARNA 通过 PCR 扩增、体外转录等技术掺入荧光标记 分子或放射性同位素作为。 按碱基配对原理把两者进行组织培养杂交。 再通过荧光同位素检测系统对芯片或进行扫描，由计算机系统上对每一探针上的信号做出比较和检验，从而得出所可能需要的信息。 （2）基因芯片在生物学研究中的意义 基因芯片以其无可比拟的信息量、快速、高通量、准确地分析基因的能耐，在临床诊断、基因功能研究及新药开发等显示了很大的作 用。基因芯

32、片可以用于以下几个方面： 绘制基因缺失图谱和进行基因表达分析。 用作基因突变研究。 能了解某些基因对特定生长发育阶段的重要性。 用于细菌检测。 用于病毒疟原虫的检测和基因表达分析。 用不同相同转录发育阶段的 cDNA 作探针系统性地研究细胞中 任意时期特异表达的基因。用病人的可疑 cDNA 做探针和杂交，检查哪些基因的表达受抑 制或激活。 基因芯片还可用于基因诊断，可建立正常人特定组织机构、器 官的基因芯片，给出标准杂交信号图。解析：空3. 为什么细菌的RNA聚合酶能在恰当的区域停止转录？浙江海洋 大学 2019 研答案： 因为细菌的各个转录单位中存在促进转录终止的终止子序 列，转录出的终止子

33、序列形成发夹结构延宕了 RNA 聚合酶的前进，进 而在富含 A 的序列或终止因子的作用下让从 DNA 模板链上释放下来， 终止转录，原核生物的转录终止有两种类型：(1 )赖于p因子的终止，p因子能催化NTP水解促使新生的RNA 链从三元转录复合物中解离出来，从而终止转录。(2 )不依赖于p因子的终止，模板DNA上存在终止转录信号终 止子，终止位点暂缓上游一般都存在一个富含 GC 的二重对称区，该 段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式结构。新生 RNA 中的发卡 式结构会导致RNA聚合酶的暂停，破坏 RNADNA 杂合链5 '端的正 常结构。终止位点前有一段由48个A组成的序列

34、，因此，转录物 的3 '端为寡聚U ,寡聚U的存在使杂合链的3 '端部分出现不稳定的 rUdA 区域。这两者共同积极作用使得 RNA 从三元转录复合物中解离 出来。解析：空4. 请说明一种原位杂交技术的基本原理并简述其在生物学领域的应用。答案： 原位杂交是指用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射 自显影体系，在组织、细胞及染色体水平对核酸进行定位和相对定量 研究的一种手段。根据探针的标记方法，分为同位素原位杂交技术和 荧光原位杂交技术。(1)同位素原位杂交技术 运用核酸分子碱基顺序配对的互补性，用同位素标记的梅西县核酸(探针)和染色体上时经过变性后的 DNA (RNA )杂交，

35、结合形 成专一性的核酸杂交分子，用放射自显影王丽强方法显示其在基因型 上的位置，即把原位具有特定碱基顺序的基因在染色体上各种地确定 下来。( 2 )荧光原位杂交技术 荧光原位杂交技术是指根据核酸分子碱基互补配对的原则，用特 殊的荧光素标记 DNA 探针，然后在染色体、细胞或组织切片标本上 进行 DNA 杂交，来检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列是否存在的一 种非放射性原位杂交方法，具有安全、快速、检测的信号强、杂交特 异性高和可多方面多重染色等特点。（3）原位杂交技术在植物遗传育种方面的应用 异源染色质及多种染色体畸变检测。通过远缘杂交把有用基因的异源染色质渐渗到植物中。如带有几种抗病基

36、因的黑麦 1R 染色体已 被整合到许多高产的品种中。原位杂交技术则是鉴定外源染色体（质） 的有效手段。 在植物及基因表达研究上的应用。由于转基因表达的不稳定性（基因沉默和基因凋亡）极大地阻碍了遗传转化系统的应用。转基因 表达的一个重要影响因素传达就是位置效应，即转基因在受体细胞基 因组中的位置。用原位杂交技术便可以确定转基因在基因组中的位置 位置来研究物理效应。 在构建植物基因物理图谱上的应用。 DNA 序列在染色体上的定 位和分子图谱的构建是克隆目的基因的基础。 FISH 技术能直接完成基 因开放性在染色体上的定位，对基于图谱的基因克隆意义重大。 其他方面的应用：原位杂交特征向量技术已在高度

37、重复序列、 中度重复序列、单拷贝序列作探针的杂交中偏齿取得成功。为物种的 起源和进化、基因表达行为的揭示以及基因组进化、结构、共同组成 和空间排列的研究提供了新的途径。解析：空7、选择题（ 12 分，每题 1 分）1. 基因表达时的顺式作用元件包括（ ）。A 转录因子B. RNA聚合酶C 启动子D. 结构基因答案：C解析：顺式积极作用元件是指 N 上影响基因活性的 N 序列，如启动子、 增强子、操纵基因、终止子等。启动子是用来启动基因转录必需的一 段 N 序列，包括 RN 聚合酶的识别、结合和转录起始，以及激活该酶 转录功能若要线粒体的序列。2. IFFG 能够诱导B半乳糖苷酶的表达是因为（）

38、。A. IPTG 与乳糖操纵子结合诱导转录B. 抑制 B 半乳糖苷酶的降解C. IPTG 与 lacI 基因的产物结合，抑制它的活性D. 刺激乳糖操纵子阻遏蛋白的活性答案： C解析：3. 在原核生物蛋白质合成过程中，核糖体小亚基与mRNA勺结合主要依靠（ ）。A. 范德华力B 疏水相互作用C 氢键D 离子键答案：C解析：在原核生物中，mRN上的S序列与核糖体16S RN之间依靠肽 键结合，从而为蛋白质类似物蛋白质提供模板。4. 下列 mRNA'5端序列中，具有典型的原核生物 ShineDalgamo (SD) 序列特征的是( )。A. 5 GCCCG3B. 5 UUAAG3C. 5 C

39、UCCA3D. 5 AGGAG3答案： D解析：信使核糖核酸( mRN )翻译起点沿河与原核 16S 核糖体 RN 或 真核18S rRN 3端富含嘧啶7勺核苷酸序列互补的富含脂质的37个核苷酸序列(GGGG)，是核糖体小亚基与 mRN结合并形成正确 的前起始复合体的一段序列。5. 细胞分化是由于( )中某些或某种基因选择性地表达的结果。A. 转录调控因子基因家族B. 管家基因C. 结构基因D 奢侈基因 答案：D解析：项，奢侈基因，或称组织特异性基因，是指相异指对的细胞类 型进行特异性表达的基因，其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构 特征与特异的生理功能。项，管家基因又称持家基因，是指所有中均 要稳定表达的一类基因，是一类始终保持着低水平的甲基化并且一直 处于活性转录状态的基因，其产物是对维持细胞细胞核基本生命活动 所必需的。项，结构基因组是编码蛋白质或 RN 的基因。项，转录调 控因子基因家族是指调控转录的一系列基因。细胞分化是指林宏吉的 细胞逐渐产生出形态结