范氏测定纤维素含量法

1、范氏测定纤维素含量法原理采用范氏（ Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF ）和酸性洗涤纤维（ ADF ） 原理 : 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分， 其中包括半纤维素、 纤维素、 木质素和硅酸盐。植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。 酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72% 硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将 72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ ADL ）的含量。试剂的配制中性洗涤剂（3% 十二烷

2、基硫酸钠）：准确称取18.6g 乙二胺四乙酸二钠（EDTA ，C10H14O8Na2?2H2O ，分析纯）和 6.8g 硼酸钠 （Na2B4O7?10H2O ，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水， 加热溶解后，再加入 30g 十二烷基硫酸钠 （ C12H25NaO4S ，分析纯）和 10ml 乙二醇乙醚（ C4H10O2 ，分析纯）；再称取 4.56 g 无水磷酸氢二钠（ Na2HPO4 ，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml ，其中 pH 值约为 6.97.1 （ pH 值一般勿需调整） ； 1N 硫酸：量取约 27.87 ml

3、 浓硫酸（分析纯， 比重 1.84，98%），徐徐加入已装有 500ml 蒸馏水的烧杯中， 冷却后注入 1000ml 容量瓶定容，标定； 酸性洗涤剂（ 2%十六烷三甲基溴化铵） ：称取 20g 十六烷三甲基溴化铵（ CTAB ，分析纯）溶于 1000ml1N 硫酸，必要时过滤；操作步骤中性洗涤纤维测定准确称取1.0000g 样品（通过 40 目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml 中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g 无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在510min 内煮沸，并持续保持微沸60min 。煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，

4、将烧杯中的残渣全部移入， 并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。用20ml 丙酮冲洗二次，抽滤。将玻璃坩埚置于105烘箱中烘 2h 后，在干燥器中冷却 30 min 称重，直称至恒重。酸性洗涤纤维测定准确称取1.0000g 样品（通过40 目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml 酸性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g 无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在510min 内煮沸，并持续保持微沸60min 。趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。将玻璃坩埚置于 105烘箱中烘 2h 后，在干

5、燥器中冷却 30 min 称重，直称至恒重。酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA ）测定将酸性洗涤纤维加入 72%硫酸，在 20消化 3h 后过滤，并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。结果计算中性洗涤纤维含量的计算：NDF （%）=（ W1 W2） / W100式中：W1 玻璃坩埚和 NDF 重（ g） W2 玻璃坩埚重（ g） W 试样重（ g）酸性洗涤纤维含量的计算：ADF （%）=（ G1 G2） /G100式中：G1 玻璃坩埚和 ADF 重（ g） G2 玻璃坩埚重（ g） W 试样重（ g）半纤维素含量的计算：半纤维素（%）=NDF （%） ADF （%）纤维素含量的计算：纤维素=ADF （ %）经 72%硫酸处理后的残渣（ %）酸性洗涤木质素（ ADL ）含量的计算： ADL （ %） =残渣（ %）灰分（硅酸盐,%）1酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA ）测定的优化：把酸性洗涤纤维置于50ml 烧杯中，加入 5ml 72%硫酸，20 水解 3h ，然后加水 45ml ，室温过夜，次日用已称恒重的3 号砂芯漏斗过滤， 水洗残渣至pH6.5 ，于60 烘干，称重。