常见蛋白酶抑制剂

1、当前位置：生物帮 实验技 巧 生物化学技术 正文创作：欧阳计时间：2021.02. 11蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期：2012-06-13 来源：互联网标签：相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要：破碎细胞提取蛋白质的同时可释放岀蛋白酶，这些蛋 白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提 取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列 举了 5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为 各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整 各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销！ Ibidi细胞灌流培 养系统模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统

2、广州赛诚 生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白 酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取 过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举 了 5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各 种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各 种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极 低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀 以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到 更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。常用抑制剂PMSF2）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血 酶）和疏基蛋S酶（如木瓜蛋

3、白酶）；2）10mg/ml溶于异丙醇中；3）在室温下可保存一年；4）工作浓度:17：174ug/nil（0.：l20mmol/L）;5）在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中 加入新鲜的PMSFoEDTA2）抑制金属蛋白水解酶；2）0.5mol/L 水溶液，pH89;3) 溶液在4C稳定六个月以上；4) 工作浓度:0.51.5mmol/L. (0.20.5mg/ml);5) 加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解。胃蛋白酶抑制剂(pepstantin)1) 抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋 白酶D和凝乳酶；2) lmg/ml溶于甲醇中；3储存液在4工一周内稳

4、定，20工稳定6个月；4) 1 作浓度:07u g/ml(lumol/L)5) 在水中不溶解。亮抑蛋白酶肽(leupeptin)1) 抑制丝氨酸和毓基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和组 织蛋白酶B;2) IOmg/ml 溶于水；3) 储存液4C稳定一周，20C稳定6个月；4) 工作浓度0.5mg/mlo胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)2)抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶 和胰凝乳蛋白酶；2)IOmg/ml 溶于水,pH783储存液4C稳定一周，20C稳定6个月；4) 工作浓度:0.062.0ug/ml(0.010.3umol/L);5) 避免反复冻融：6) 在pH12.8时失

5、活。蛋白酶抑制剂混合使用35ug/ml PMSF丝氨酸蛋白酶抑制剂0.3mg/ml EDTA金属蛋白酶抑制剂07ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)酸性蛋白酶抑制剂0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)广谱蛋白酶抑制剂常用蛋白酶抑制剂表抑制剂靶蛋白酶有效浓度储藏溶液注解An 廿 pain木瓜酶和胰酶50jig/mllmg/ml水溶液对胰凝蛋白酶，胃 液素，纤溶酶无影响APMSF胰蛋白酶样幺攵氨酸蛋白酶10-40pg/ml 或10-20pM100mmol/L水溶液毒性比PMSF低，不 能抑制胰凝蛋白酶 或乙酰胆碱酯酶抑肽酶丝氨酸蛋白酶0.06-2ng/ml10mg/mlPB

6、S 溶液避免反复动冻融抑氨肽酶B氨基肽酶40jig/ml溶于甲醇不能抑制竣肽酶Calpain抑制剂I、nCalpain (钙依赖性 半胱氨酸蛋白酶)1:17|ig/mln：7pg/ml溶于乙醇可渗透薄膜抑糜阮酶素胰凝乳蛋白酶6-60ng/ml溶于DMSOB.M.综合酶片线氨酸，半胱氨酸 和金属蛋白酶每10-50ml细胞提 取液内加一片不含EDTAEDTA金属蛋白酶0.2-0.5mg/ml 或0.5-1.3pmol/L500mmol/L水溶液 pH=8.0抑蛋白酶醛肽线氨酸蛋白酶，疣 基蛋白酶0.5-2ng/ml10mg/ml水溶液a2-巨球蛋白广谱lU/ml100 U/ml PBS 溶液避免接

7、触还原剂Pefabloc SC(boe- hringer Mannheim)线氨酸蛋白酶0.1-1.0mg/ml 或0.4-4mmol/LlOOmM水溶液无毒，在中性pH下 较PMSF稳泄胃蛋白酶抑制剂酸性蛋白酶0.7ng/mllmg/ml甲醇溶液PMSF丝氨酸蛋白酶17-170pg/ml10mg/ml异丙醇溶液每一操作步骤时新 鲜加入TLCK胰蛋白酶37-50pg/mllmg/ml溶于 50mMmol/L醋酸盐 溶液,pH=5.0对胰凝蛋白酶无影响TPCK胰凝乳蛋白酶70-100pg/ml3mg/ml乙醇溶液对胰蛋白酶无影响作者：青岚点击：次 来源于生物秀知道首页实验实验中心常用蛋白酶抑制剂

8、(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度2014-06-09 23:01:02来源:浏览次数：口9网友评论0条 常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮 存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一 步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加 和蛋白酶抑制/flj(protease inhibitor)以防止蛋白质的降解。另 外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少 的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂 (protea

9、se inhibitor)PMSF, Leupeptin 亮肽素，Aprotinin 扌卬肽 酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteas 蛋白酶抑制剂分子 量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸 在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提 取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂(p otease inhibitor)以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的 研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常 用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF, Leupeptin 亮肽 素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋

10、白酶抑制剂(protease i nhibitor), EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3V 04 原矶酸钠，BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠，Na2P2O 4焦磷酸钠等。对这些蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)的溶 解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF：特性:丝氨酸蛋白酶抑制/flj(protease inhibitor),如胰凝乳蛋 白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋 白酶(可逆的地面处理)。溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果10mg

11、/mlo在 水溶液中不稳定。在100%异丙醇，+25C时稳定至少9个 月分子量：174.2使用：贮存浓度：200mM,工作浓度：ImMLeupeptin亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白 酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B溶解性：高度溶于水(lmg/ml)o 4C一周稳定，分成小份冷 冻在20C至少6个月分子量：C20H38N6O4 x 2/2 H2SO4:4756C20H38N6O4 x 2/2 H2SO4 x H2O:4936使用：贮存浓度：lmg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (ImM)Aprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibit

12、or),抑制纤维蛋 白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。不抑 制凝血酶或因子X。溶解性：易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris, 0.1M, pH8.0)o pH约78的溶液在4C可保存1周，分装保存在2 0C可至少保存6个月。避免反复冻融，pH12.8的碱性环境 可使其灭活。分子量：6,512使用：贮存浓度:lmg/ml,匸作浓度：0.06-2.0 ug/ml(0.01-0.3 uM)Pepstatin Vj 蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)特性：抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织 蛋白酶D,凝乳酶，许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇

13、约lmg/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达 到1 mg/ml；在6当量乙酸中溶解度为300ug/mlo 4C稳定 一周，分装储存于20C时可保存1个月分子量：685.9使用：贮存浓度：lmg/ml,使用浓度：0.7 ng/ml(l M)EDTA-Na2特性：金属蛋白酶抑制protease inhibitor)溶解性：溶于水至0.5M,在pH89的条件下，4C稳定至少 6个月分子量:372.24使用：工作浓度:0.2-0.5 mg/ml(0.5-1.3 mM),不需现用现配，在溶液pH值调至89时再加入。磷酸酶抑制剂NaF氟化钠溶解性：溶于水分子量：41.99使用：贮存液：5M工作浓度：10-20mMNa3VO4原矶酸钠分子量：183.91溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矶酸钠原矶酸钠需要 经过处理以后才能成为激活的矶酸钠,激活的矶酸钠才具有 抑制去磷酸化的作用原矶酸钠变成激活的矶酸钠的过程是: 100mM原矶酸钠激活储存液配制(1) 取0.183克的原矶酸钠溶解于10ml的双蒸水中，加酸调节PH至10(颜色变黄)(2) 煮至无色(3) 室温冷却(4) 重调PH至10重复(1 ) ( 2 ) ( 3 ) ( 4 )直至溶液保持无色，并且P H稳定于20,分装lOOul/管，