实验一红细胞和白细胞计数.

1、红细胞和白细胞计数红细胞和白细胞计数临检教研室临检教研室一、红细胞计数一、红细胞计数l目的目的 掌握显微镜手工计数的方法。掌握显微镜手工计数的方法。l原理原理 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，冲用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数。一、红细胞计数一、红细胞计数（一）器材：（一）器材： 显微镜、改良计数板、试管、显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球微量吸管、移液管、洗耳球（二）试剂：（二）试剂： 生理盐水生理盐水（三）标本：

2、（三）标本： EDTAEDTA盐抗凝血盐抗凝血6（四）操作（四）操作l1.1.加稀释液加稀释液: : 取小试管取小试管1 1支，加稀释液支，加稀释液2.0ml2.0ml。l2.2.加血：加血： 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血10l10l，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，擦去管外余血，轻轻加至红细胞稀释液底部，再轻再轻吸上清液清洗吸管吸上清液清洗吸管2 23 3次，立即混匀。次，立即混匀。l3.3.充池：充池： 混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数混匀后用微量吸管将红细胞悬液冲入计数池，室温下平放池，室温下平放3 35 5分钟，待细胞下沉后于显微镜分钟，待细胞下

3、沉后于显微镜下计数。下计数。l4.4.计数：计数： 用高倍镜依次计数中央大方格内用高倍镜依次计数中央大方格内4 4角和正角和正中中5 5个中方格内的红细胞数。个中方格内的红细胞数。 5.5.计算：计算： RBC/L=NRBC/L=N25/525/5101020120110106 6 N N10101010 =N/100 =N/10010101212（五）注意事项（五）注意事项 1. 1. 将红细胞稀释液充入计数池时要一次完将红细胞稀释液充入计数池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。成，不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。 2. 2. 红细胞在计数池中若分布不均，每个中红细胞在计数

4、池中若分布不均，每个中方格之间相差超过方格之间相差超过2020个以上时要重新充池计数。个以上时要重新充池计数。正常参考区间范围内，正常参考区间范围内，2 2次红细胞计数相差不次红细胞计数相差不得超过得超过5%5%。二、白细胞计数二、白细胞计数1.目的：目的： 掌握显微镜白细胞计数的方法。掌握显微镜白细胞计数的方法。2.原理：原理： 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数。经

5、换算求出每升血液中的白细胞数。3.3.器材器材: : 显微镜、改良计数板、试管、微量吸显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球管、移液管、洗耳球4.4.试剂试剂: : 白细胞稀释液白细胞稀释液5.5.标本标本: EDTA: EDTA盐抗凝血盐抗凝血二、白细胞计数二、白细胞计数（1 1）加稀释液：用吸管准确吸取白细胞稀释液）加稀释液：用吸管准确吸取白细胞稀释液0.38ml0.38ml于小试管中。于小试管中。（2 2）加血：用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血）加血：用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l20l，擦，擦去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部

6、，再轻吸上清液清洗吸管清液清洗吸管2 23 3次，混匀。次，混匀。（3 3）充池：混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细）充池：混匀后用微量吸管将完全变为棕褐色的细胞悬液冲入计数池，室温下平放胞悬液冲入计数池，室温下平放3 35 5分钟，待细胞下分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。沉后于显微镜下计数。（4 4）计数：低倍镜依次计数）计数：低倍镜依次计数4 4个大方格内白细胞数个大方格内白细胞数（5 5）计算：）计算：WBC/L=N/4WBC/L=N/41010202010106 6=N/20=N/2010109 9/L/L 5.5.操作操作l(1)(1)在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。或充池不足及充液后玻片移动的现象。l(2)(2)白细胞在计数池中若分布不均，大方格间细白细胞在计数池中若分布不均，大方格间细胞计数相差一般不超过胞计数相差一般不超过10%10%。l(3)(3)白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的