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文档简介
1、大肠菌群计数是一种估计悬浮在水溶液中活菌数的方法。一般分几组进行,每一组各有数重复,分别以渐次的方式加入不同量的待测水溶液于培养液中进行培养,随后观察每一组中的试管是否有菌生长,然后再利用统计表估计菌数。 例如水中coliform数的测定,将待测水溶液以10ml,1ml 及 0.1ml 的量分别加入各组,每组三重复,经培养后观察 coliform 是否有生长,统计有菌生长的管数,以统计表统计菌数。活菌的浓度可利用 MPN 的方式来估计,方式简单,可分为下列两步骤: 在培养基中作数个重复稀释; 记录有菌生长的试管。 若试管中无生长,则可能代表连一支菌都没有生长。 从统计观点, MPN 这个方法是
2、一种非常没效率的方式,因为每一试管与培养皿表面生长的菌数只有很小部分符合。然而 MPN 的好处有以下: 若菌无法长在固态培养基时,便可使用; 若菌的生长的动力学具有很大变化,便可使用:假设某些菌会会立即且迅速的生长,且会在固态培养基产生很大的菌落,且与我们要的菌落接触到或盖过时;因为较少且具高度游动性或快速生长的菌,可能形成小菌落,因而其数量是很多而导致无法计数; 假如非我们所要菌存在,或无筛选的方法存在时,便可使用。 虽然有污染的细菌可以大量生长,但仍可藉由我们所要看的菌产生特定的产物来估计; 假如琼脂或其他固化材料有某些因素会干扰我们计数时,便可使用大肠菌群MPN表正反应试管数MPN/ml
3、 ( g )95% 信赖界线0.1ml0.01ml0.001ml下限上限000< 30013< 590103< 513020-1004< 5201017121110712311111336120113362009136201143372101534421120789220214472212810150230-30023412030139713030264153803104372103117514230312120303803209315380321153044032221035470330240361,300331460712,4003321,1001504,80033
4、3> 1,100> 150> 4,800说明: 若稀释倍 数为 10 , 100 , 1000 倍(即每 ml LST 中 0.1 , 0.01 , 0.001 ml ( g )之检体),且 LST 均产气(正反应试管数 3-3-3 ),经接种至 EC ,而其产气试管数为3-1-0 ,对照 MPN 为 43 ,即为该检体大肠杆菌 MPN 数为 43/ml ( g )。 若稀释倍数为原液, 10 , 100 倍 ( 即每 ml LST 中含 1 , 0.1 , 0.01ml 之检体而 EC 接种之正反应试管数亦为 3-1-0 ,则该检体大肠杆菌 MPN 数为 43 ÷ 10=4. 3/ml 。 若稀释倍数为 100 , 1000 , 10000 倍时,结果同上,则该检体大肠杆菌 MPN 数为 43×10=430/ml ,其余类推。 计算公式: ×中间试管之稀释倍数 MPN g ( ml )平板计数法:采用常规涂布平板法,3724h后计数。培养基为营养琼指和伊红美兰琼脂。多管发酵法:采用五管法,培养剂为液体EC培养基。细菌总数:采用AODC法, 具体操作按徐怀恕方法进行。活菌直接计数:采用K
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