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医院检验中心TdT(MRD白血病残留病灶) 测定操作规程( 1)试剂1) TdT (pool)FCat No11362 )同型对照F IgG 2a + F IgG1( 2)方法1) 取 50ul 全血或 5×10 5 个细胞到测定管和对照管2) 每管加入透膜剂I( Intraprtp Reagent I)100ul ,混匀( 18OC-25OC)室温放置15 分钟1)BS4ml 洗一次,( 300g 离心 5 分钟),弃上层2)管加入透膜剂II (Intraprep ReagentII)100ul室温放置 5 分钟后,轻摇1-2 秒钟5)分别加10ul TdT-F单抗和同型对照至测定管和对照管中,轻轻摇匀,室温避光放置15 分钟6)各管加入PBS 4ml 300g离心 5 分钟,洗一次,弃上层7)各管加入PBS 0.5ml ,在 FCM仪上计数10000 个以上细胞,记录百分率及平均荧光强度和荧光峰值强度8)必要时结合白血病的免疫标志双色分析(方法见膜/膜内同时直标法)( 3)参考范围0 0.86%

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