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文档简介

1、霉菌和酵母菌检测1范围本规范规定了化妆品中霉菌和酵母菌数的检测方法。本规范适用于各种化妆品中霉菌和酵母菌的总数测定。2 定义本规范采用下列定义。霉菌和酵母菌总数是指化妆品检样在一定条件下培养后,1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落总数,藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性,在虎红培养基上,置28c培养72h,计算所生长的霉菌和酵母菌数。3 仪器和设备3.1 恒温霉菌培养箱:28。3.2 振荡器。3.3 天平。3.4 三角瓶。3.5 试管。3.6 试管架。3.7 平皿:直径90mm。3.8 刻度吸管:1mL、2mL、10mL

2、。3.9 量筒。3.10 酒精灯。3.11 高压灭菌器。4 培养基和试剂4.1 生理盐水4.2 虎xx(xxxx)§养基成分:蛋白胨5g葡萄糖10g磷酸二氢钾1g硫酸镁(含7H2O)0.5gxx20g虎红溶液100mL(四氯四碘荧光素)蒸馏水1000mL氯霉素100mg制法:将上述前5种成分加入蒸馏水中溶解后,再加入虎红溶液。分装后,103.43kPa(15lb)20min高压灭菌。另用少量乙醇溶解氯霉素,过滤除菌后,加入培养基中,若无氯霉素,可用链霉素代替,每1000mL培养基加链霉素30mg。5 操作步骤5.1 样品稀释:用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL,分别注入到两个灭菌

3、平皿内,每皿1mL。另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面),更换一支吸管,并充分混匀,制成1:100检液。吸取2mL,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿1mL。如样品含菌量高,还可再稀释成1:1000,1:100,等,每种稀释度应换1支吸管。5.2 取1:10的检液2mL分别注入2个灭菌平皿内,每皿1mL(若菌量较多时可顺序再做10倍稀释),另取1个灭菌空平皿(作空白对照),每皿分别注入融化并冷至45c左右的虎红培养基约15mL,充分摇匀。凝固后,翻转平板,置28c培养箱,培养72h,计数平板内生长的霉菌和酵母菌数。若有霉菌蔓延生长,为避免影响其它霉菌和酵母菌的计数时,于48h应及时将此平板取出计数。5.3 计算方法:先点数每个平板上生长的霉菌和酵母菌菌落数,求出每个稀释度的平均菌落数。判定结果时,应选取菌落数在550个范围之内的平皿计数,乘以稀释倍数后,即为每g(或每mL脸样中所含的霉菌和酵母菌数。其它范围内的菌落数报告应

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