氡暴露对大鼠气管

1、在人类生活环境的天然本底辐射中，由于吸入氡及其子体所产生的辐射剂量约占 54%，氡暴露导致的健康危害，已成为近年来的研究热点。大鼠气管 - 支气管上皮细胞是研究氡暴露生物效应的良好模型，但由于受到染毒装置等条件的限制，过去多进行体外研究。本实验利用多功能移动式氡室对大鼠动态吸入染毒，利用建立的动物模型，采用消化后刷洗法分离得到大鼠气管 - 支气管上皮细胞 1，观察氡染毒后靶细胞体外发生转化的过程，探讨氡暴露对细胞的损伤效应。1材料与方法11实验动物处理实验用 Wistar 雄性大鼠， 78 周龄 ( 上海斯莱克实验动物有限责任公司) 许可证号： SCXK(沪 )2003-0003 。采用自制

2、HD-3 型多功能移动式氡室，对大鼠动态吸入染毒。按照氡染毒的累计暴露量，分为60，90，120 工作月 (Working Level Month,WLM)和对照组共 4 组，每组 6 只动物。染毒时间每天 8h，每周 6d，染毒期间动物自由活动饮食。12选择性培养基制备选择性 F12 培养基为 Hams F12 培养基，含有 2%胎牛血清， 5mg/L 胰岛素， 03 mol/L 氢化可的松。13气管 - 支气管上皮细胞的分离和培养实验组及对照组大鼠气管 -支气管上皮细胞的分离和培养采用本实验室建立的消化后刷洗法，见文献 1。1 4 细胞集落形成率 收集大鼠气管 - 支气管上皮细胞，制成细胞

3、悬液，以 1×105 个/60mm培养皿接种于无血清完全 F12 培养基中 375%CO2培养箱中培养， 78d 后计数其形成的细胞集落数，并根据接种的细胞量计算细胞集落形成率 (CFE)。一个细胞集落的标准是含有 15 个细胞以上的细胞团， CFE= 细胞集落数 / 接种的细胞量× 100%。1 5 细胞存活率 根据 CFE得出的结果，计算出大鼠气管 - 支气管上皮细胞存活率。其计算公式为：细胞存活率 =氡暴露组细胞集落形成率 / 对照组细胞集落形成率× 100%。16转化细胞筛选上述细胞集落计数后，即转入选择性 F12 培养基对气管 - 支气管上皮细胞进行筛选

4、。4d 换液 1 次，选择性培养 5 周，计数转化细胞集落并统计转化率 (TF) ，TF=转化细胞集落数 / 进入选择的细胞集落数×100%。17转化细胞系的建立大鼠气管 - 支气管上皮细胞经选择性培养 5周后，根据 Kitamural 2报道的形态学标准，细胞小而密集的或型集落是具有转化趋向的集落，倒置显微镜下鉴定后，用消毒棉签除去其他的集落细胞，使每皿只含有一个转化集落，继续培养，对或型集落扩增，然后转移到培养瓶中，进行传代培养。- 28 焦灵利，倪孟祥，陈日，等 . 头孢唑林钠联合舒巴坦钠对产酶和非产酶菌的体内抗菌活性 J. 中国药师， 2000,3(5):266 29 Gavalda J, Torres C, Tenorio C, et al. Efficacy of ampicillinplus ceftriaxone in treatment of expeimental endocarditis due to Enterococcus faecalis strains highly resistant to aminoglycosides J . Antimicrob Agents Chemother,1999,43(3):639 30 Hopefl A W. Overview of synergy with refer