脑中风微生物药物研制

1、脑中风微生物药物研制12021/4/26 前言 疾病治疗 技术方案 建议22021/4/26 定义 脑中风是一组以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病，又称脑卒中或脑血管意外，具有极高的病死率和致残率，主要分为出血性脑中风(脑出血或蛛网膜下腔出血)和缺血性脑中风(脑梗塞、脑血栓形成)两大类，以脑梗塞最为常见。脑中风发病急，病死率高，是世界上最重要的致死性疾病之一。32021/4/26 特点： 发病率高、致残率高、死亡率高和复发率高等“四高”特点 （手稿）42021/4/26 分类 按病理性 缺血性卒中 出血性卒中52021/4/26 缺血性脑卒中：包括TIA、脑血栓形成、脑栓塞 （一）

2、短暂性脑缺血发作(TIA) 是由颅内血管病变引起的一过性或短暂性、局灶性脑(或视网膜)功能障碍，临床症状在24小时内完全消失，不遗留神经功能缺损症状和体征。影像学（CT、MRI）检查无责任病灶。 TIA是由动脉粥样硬化、动脉狭窄、心脏疾患、血液成分异常和血流动力学变化等多因素促成的临床综合征。 62021/4/26 1.发病机制: （1）微栓子学说 （2）在颅内动脉严重狭窄的情况下，血压的波动可使原来靠侧支循环维持的脑区发生一过性缺血（3）血液黏度增高，如纤维蛋白原含量增高也与TIA的发病有关 （4）无名动脉或锁骨下动脉狭窄或闭塞所致的椎动脉-锁骨下动脉盗血也可引发。 TIA患者发生卒中的几率

3、明显高于一般人群，应予高度重视。72021/4/26 二）脑梗死 脑梗死是指因脑部血液循环障碍，缺血、缺氧所致的局限性脑组织的缺血性坏死或软化。 血管壁病变、血液成分病变和血液动力学改变是引起脑梗死主要原因。82021/4/261.发病机制及治疗的靶点高血糖高血压高血脂动脉粥样硬化 管腔狭窄管腔狭窄血栓形成血栓形成脑梗死脑梗死92021/4/26临床表现取决于受累的血管。 （1）颈内动脉系统：u单侧(同侧)眼睛黑矇u大脑半球症状： 一侧面部或肢体麻木或/和无力，可出现言语困难(失语)和认知及行为改变。102021/4/269、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。22.3.222.3.2Wed

4、nesday, March 02, 202210、低头要有勇气，抬头要有低气。23:51:2123:51:2123:513/2/2022 11:51:21 PM11、人总是珍惜为得到。22.3.223:51:2123:51Mar-222-Mar-2212、人乱于心，不宽余请。23:51:2123:51:2123:51Wednesday, March 02, 202213、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。22.3.222.3.223:51:2123:51:21March 2, 202214、抱最大的希望，作最大的努力。2022年3月2日星期三下午11时51分21秒23:51:2122.3.215

5、、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。2022年3月下午11时51分22.3.223:51March 2, 202216、业余生活要有意义，不要越轨。2022年3月2日星期三23时51分21秒23:51:212 March 202217、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。下午11时51分21秒下午11时51分23:51:2122.3.2 （2）椎-基底动脉系统表现： 眩晕、头昏 构音障碍 跌到发作 共济失调 复视、异常的眼球运动 交叉性运动或感觉障碍 偏盲或双侧视力丧失。122021/4/26 出血性脑卒中 主要分为：脑出血、蛛网膜下腔出血132021/4/26脑出血cerebral he

6、morrhage 是指原发性非外伤性脑实质内出血 80%以上由高血压性脑内细小动脉病变引起,固又称高血压动脉硬化性脑出血 发病率高，占全部脑卒中2030 Hypertension is the most common underlying cause of nontraumatic intracerebral hemorrhage142021/4/26 高血压性脑内细小动脉硬化 高血压性脑动脉硬化时可有脑内细小动脉透明变性、纤维素样坏死，病变管壁在血流冲击下形成微动脉瘤导致脑动脉管壁薄弱的其它疾病 血液系统疾病 肿瘤卒中 其它危险因素 1.高血压 2.心脏病 3.糖尿病 4.短暂性脑缺血与脑血

7、管疾病史 5.吸烟和酗酒 6.高脂血症152021/4/26 多为脑动脉深穿支破裂所致 豆纹动脉最为常见，次为丘脑穿通动脉 多发于大脑半球基底核区，次为脑叶、脑桥、小脑和脑室 等 出血可直接破坏脑组织 血肿挤压周围组织，引起脑组织水肿、颅内压增高，严重 可引起脑疝162021/4/26 基底节区出血：50%60% 壳核出血 内囊外侧型出血，为高血压性脑出血最常见的类型 丘脑出血 尾状核头出血 脑叶出血：5%10% 脑干出血 脑桥出血：10% 延髓出血 小脑出血：10% 脑室出血：3%5%172021/4/26 蛛网膜下腔出血： 是多种病因所致脑底部或脑及脊髓表 面血管破裂的急性出血性脑血管病，

8、血液直接流入蛛网膜下腔，又称原发性SAH 。此外，临床还可见因脑实质内、脑室出血、硬膜外或硬膜下血管破裂等血液穿破脑组织流入蛛网膜下腔者，称为继发性SAH。182021/4/26 颅内动脉瘤： 好发于30岁以上成年人，占50%85% 脑动静脉畸形： 多见于青少年和儿童 脑底异常血管网病 其他： 高血压脑动脉硬化、血管炎等192021/4/26 内容积增加 颅内压增高 脑疝 血颅液刺激脑膜 剧烈头痛及脑膜刺激征 刺激丘脑下部和脑干 高热、植物神经功能紊乱 急慢性梗阻性脑积水、交通性脑积水 脑动脉痉挛 脑梗死202021/4/26 绝大多数颅内动脉瘤位于前循环，尤其是Wills环的动脉分叉处 青壮

9、年多见 突然起病，可有剧烈运动等诱因，少数起病前有头痛、头晕、视 物模糊或长期间歇慢性头痛史 主要症状 突然发生的头部剧烈胀痛，位于前额、枕部或全头部，常伴有恶心、喷射性呕吐，意识障碍定位体征 脑膜刺激征 眼底改变212021/4/26 并发症 再出血，4周内，第2周尤多见 脑血管痉挛，发病早期或1-2周出现 脑积水 其他：癫痫发作、低钠血症、上消化道出血，发热等222021/4/26后遗症1.麻木是脑中风后遗症中比较常见的，表现为：患侧肢体，尤其是肢体的末端、如手指或脚趾、或偏瘫侧的面颊部皮肤有蚁爬感觉，或有针刺感，或表现为刺激反应迟钝。2.嘴歪眼斜表现为鼻唇沟变浅，口角下垂，露齿。鼓颊和吹

10、哨时，口角歪向健侧，流口水，说话时更为明显。3.中枢性瘫痪主要表现为肌张力增高，腱反射亢进，出现病理反射，呈痉挛性瘫痪。4.周围性瘫痪表现为肌张力降低，反射减弱或消失，伴肌肉萎缩，但无病理反射。5.偏瘫又叫半身不遂，是指一侧上下肢、面肌和舌肌下部的运动障碍，它是急性脑血管病的一个常见症状，也是常见的脑中风后遗症。6.失语失语是脑血管病的一个常见症状，主要表现为对语言的理解、表达能力丧失。7.失认失认是指病人认识能力的缺失，它包括视觉、听觉、触觉及对身体部位认识能力的缺失，是脑中风的症状之一。8.失用失用，即运用不能，病人肢体无瘫痪，也无感觉障碍和共济失调，但不能准确完成有目的的动作。失用包括：

11、观念运动性失用、观念性失用、结构性失用、穿着失用、口面失用和肢体运动性失用。232021/4/26 诊断 头颅CT MIR（磁共振检查） 脑血管造影 MRA（磁共振血管造影）、CTA（血管成像） 、 DSA（数字减影血管造影技术） 腰穿脑脊液检查 血、尿常规、血糖、电解质等检查242021/4/26 微波检测 微波信号源产生微波激励信号，通过天线发送，经过大脑散射的微波信号有天线接收，由微波信号采集电路进行采集。采集的微波数据在工作站进行处理分析，最终得到脑中风检测和定位结果。252021/4/26 疾病治疗262021/4/26缺血性脑卒中特异性治疗缺血性脑卒中特异性治疗特异性治疗特异性治疗

12、改善脑改善脑血循环血循环神经保护神经保护中医中药中医中药其他疗法其他疗法中华神经科杂志，2010，43（2）146-152272021/4/26溶栓溶栓抗血小板抗血小板改善脑改善脑血循环血循环扩张血管扩张血管扩容扩容抗凝抗凝降纤降纤中华神经科杂志，2010，43（2）146-152282021/4/26三、降纤治疗三、降纤治疗很多证据显示脑梗死急性期血浆中纤维蛋很多证据显示脑梗死急性期血浆中纤维蛋白原和血液粘滞增高。蛇毒制剂可以显著降低白原和血液粘滞增高。蛇毒制剂可以显著降低血浆纤维蛋白原水平，有轻度抑制血栓形成的血浆纤维蛋白原水平，有轻度抑制血栓形成的作用。作用。 对不适宜溶栓、经严格筛选的

13、脑梗死、特对不适宜溶栓、经严格筛选的脑梗死、特别是伴有高纤维蛋白原血症的患者可选用。早别是伴有高纤维蛋白原血症的患者可选用。早期使用效果好（期使用效果好（72小时之内）。小时之内）。292021/4/26药物（国内）：药物（国内）： 巴曲酶：可显著减低纤维蛋白原，改巴曲酶：可显著减低纤维蛋白原，改善神经症状。首次剂量善神经症状。首次剂量10Bu10Bu，之后隔日，之后隔日5Bu5Bu，共用，共用3 3次。每次用药前需检测纤维蛋次。每次用药前需检测纤维蛋白原，注意出血倾向。白原，注意出血倾向。其他：降纤酶，口服蚓激酶、蕲蛇酶等。其他：降纤酶，口服蚓激酶、蕲蛇酶等。302021/4/26四、抗凝治

14、疗四、抗凝治疗 存在争议。一般急性脑梗死患者不推存在争议。一般急性脑梗死患者不推荐常规立即使用。荐常规立即使用。已进行溶栓治疗的患者，一般不推荐已进行溶栓治疗的患者，一般不推荐在在24小时内使用抗凝剂。小时内使用抗凝剂。312021/4/26五、扩容五、扩容对于脑血流低灌注所致的急性脑梗死如对于脑血流低灌注所致的急性脑梗死如分水岭梗死可酌情考虑扩容治疗，但应注意分水岭梗死可酌情考虑扩容治疗，但应注意防止加重脑水肿、心功能衰竭等并发症。防止加重脑水肿、心功能衰竭等并发症。六、血管扩张药物六、血管扩张药物 相关研究（使用钙拮抗剂）没有获得肯相关研究（使用钙拮抗剂）没有获得肯定的疗效。定的疗效。32

15、2021/4/26神经保护治疗 神经保护剂可能减少细胞损伤、加强溶神经保护剂可能减少细胞损伤、加强溶栓效果，或者改善脑代谢，但是目前尚缺乏栓效果，或者改善脑代谢，但是目前尚缺乏大样本的多中心、随机、双盲、对照临床实大样本的多中心、随机、双盲、对照临床实验结果。验结果。 目前常用的有依达拉奉、胞二磷目前常用的有依达拉奉、胞二磷胆碱、脑复康、钙通道阻滞剂等。胆碱、脑复康、钙通道阻滞剂等。332021/4/26中药治疗： 动物实验显示一些中药单成分或者多种药物组合如丹参、川芎嗪、三七、葛根素、银杏叶等制剂等可以降低血小板聚集、抗凝、改善脑血流、降低血粘滞度等作用。临床经验也显示对缺血性卒中的预后有帮

16、助。但目前没有大样本、随机对照研究显示临床效果和安全性。 342021/4/26出血性脑卒中352021/4/26治疗treatment 急性期治疗原则上是制止继续出血、降低颅内压、去除病因、防治并发症 一般治疗 避免继续出血或再出血诱因，绝对卧床4-6周(Absolute bed rest, mild sedation and analgesics for headache) 对症处理 止血治疗 脱水治疗 脑脊液置换治疗 病因治疗 防治并发症（complication） 防治脑积水(hydrocephalus) 防治脑血管痉挛(vasospasm)362021/4/26 中医 11 活血化瘀

17、法 大黄虚虫丸对脑出血大鼠脑组织(TR)mRNA的表达和IL IBmRNA、iNOSTlll A增加有下调作用，并可明显的改善大鼠脑出血模型的神经行为功能的缺损。 抵当口服液可能通过抑制脑出血后脑组织 中cfos蛋白的表达，减轻脑水肿的发生。 补阳还五汤能下调Caspase一3 的活化，减少神经元的凋亡，同时促进血肿的吸收； 补阳还五汤可通过调节脑出血后MMP一2的表达， 有利于微血管系统重建，改善出血后脑组织的微环 境。 活血通窍贴片经皮给药能 显著改善家兔急性脑出血血液流变性，提高SOD含 量，降低MDA含量。372021/4/26 12通腑化痰活血法 在脑出血急性期，黄竹清脑口服液具有抗

18、氧化、 减轻细胞内水肿、抑制炎性反应、抗氧化等保护脑出 血急性期脑神经细胞的作用，并对中风痰热腑实证 有明显改善作用。 通腑活血汤对脑出 血大鼠脑组织有保护作用。 逐淤化痰汤 (钩藤、生大黄、水蛭、三七、郁金、红参、丹参)可减 轻出血后脑组织水肿，同时增加SOD活性。 13 清热解毒法 道羚黄汤(羚羊角粉、钩藤、菊花、贝母、生大黄)可明显降低红细胞聚集、全血和 血浆黏度，增加红细胞变形能力，减少脑组织含水 量，降低脑组织MDA含量，提高脑组织SOD活性， 对大鼠脑出血损伤具有保护作用。 382021/4/26 14 补气活血法 黄芪合丹参可改善脑出血模型大鼠神经功能缺损评 分，能抑制神经细胞的

19、凋亡，其中通过促进Bcl一2 蛋白的表达是抑制细胞凋亡的机制之一。 392021/4/26 康复 针灸 康复训练402021/4/26 单唾液酸四己糖神经节苷脂钠 主要成份为单唾液酸四己糖神经节苷脂钠，其化学名称为:单唾液酸四己糖神经节苷脂钠，系自猪脑中提取制得的对神经细胞功能损伤具有作用的物质。其结构式为:分子式:C73H130N3NaO31 or C75H134N3NaO31 分子量:1568.84 or 1597.18。辅料为氯化钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠。 单唾液酸四己糖神经节苷脂能促进由于各种原因引起的中枢神经系统损伤的功能恢复，主要用于中枢神经系统创伤性或血管性病变 单唾液酸四己糖

20、神经节苷脂对损伤后继发性神经退化有保护作用。应用单唾液酸四己糖神经节苷脂后对脑血流动力学参数的改善和损伤后脑水肿的减轻有良好的影响。单唾液酸四己糖神经节苷脂通过改善细胞膜酶的活性减轻神经细胞水肿。412021/4/26422021/4/26 微生物法酶法：利用能够分泌唾液酸酶的乳酪短杆菌（Brevibacterium casei）进行神经节苷脂的微生 物转化，考察了 pH、温度、转化体积、底物浓度对转化的 影响。结果表明乳酪短杆菌能够分泌特异性水解末端 -2, 3 和 -2, 8 糖苷键的唾液酸酶，可将神经节苷脂中的 GD 和 GT 组分有效地转化为 GM1，使粗脂中 GM1 的含量从 9%

21、提高至 45%，而且该酶并不催化水解 GM1 中的唾液酸。 唾液酸酶转化法：从海洋微生物中筛选到一株产唾液酸酶的菌株 YF-2，经鉴定为假单胞菌属（pseudomonas sp.）。YF-2 菌株分泌的唾液酸酶大小为 110 kDa，也具有 神经节苷脂 GD1a、GD1b 和 GT 的底物特异性，对 GM1 没 有水解活性。25 条件下培养 YF-2 菌株 3 d 可将 80% 90% 的神经节苷脂转化为 GM1。除了上述已经应用于神 经节苷脂转化的微生物外，绿色小单胞菌也能够高效分泌唾 液酸酶，重组绿色小单胞菌唾液酸酶蛋白产品已经用于临床 免疫学检测。我们对绿色小单胞菌分泌唾液酸酶进行了研

22、究，发现在没有聚唾液酸或神经氨酸诱导情况下，该菌也能 够高效分泌唾液酸酶，而且具有与上述研究中微生物唾液酸 酶相同的水解特性，下一步我们将用家蚕丝素凝胶固定化绿 色小单胞菌制备成柱式填充床反应器对神经节苷脂进行转 化，建立适合于工业化生产的 GM1 微生物转化和制备工艺，旨在提高神经节苷脂转化效率并实现连续化生产。 432021/4/26 基因工程疗法 基因转移 将遗传物质引入细胞以产生生物活性蛋白或肽影响内源基因表达（例如反义）的方法。 载体是在基因转移过程中包裹外源互补DNA（cDNA）并将其转运到细胞中的化合物，是基因治疗成功的关键决定因素。 腺病毒是双链DNA病毒，以高效率感染各种细胞。腺病毒进入细胞取决于与特定受体和细胞表面整合素的相互作用。 对于基因治疗，腺病毒基因组的一部分被删除以使病毒不能复制并为插入实验性基因创造空间。 将腺病毒载体递送至脑。采用侵入性的病毒给药方式。可能的途径包括