现代技术检测重点

1、样品前处理（小结）1、样品前处理的定义？指样品的制备和对样品中待测组分进行提取、净化、浓缩的过程2、样品前处理的原则？u 样品必须完全溶解，不能有待测组分的流失；u 不能污染，或引入待测组分、干扰物质；u 方法简单易行、快速、实惠、安全、污染小；u 所用器皿与样品量相适3、样品提取的方法有哪几种？液-液萃取(LLE)、液-固萃取、柱色谱萃取4、凝胶渗透色谱的原理及洗脱顺序？基于物质分子大小不同来实现分离的一种色谱技术。样品中的大分子先被洗脱下来，小分子后被洗脱下来。5、固相萃取的原理？固相萃取（ SPE）是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰物分离，然后再用洗脱液洗脱

2、或加热解吸附，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。6、固相萃取的过程？（1） 吸附剂的预处理：为保证萃取良好的再现性，固相柱在使用前必须用适当的溶剂清洗。（2） 添加样品（3） 固相柱的洗涤（4） 固相柱的干燥（5）分析物的洗脱液质联用（小结）1、质谱仪有哪几部分组成？进样系统离子源质量分析器检测器2、 离子源有哪几种？（电子）EI电离源、（化学）API电离源3、大气压电离源有哪几种及它们各自的适用范围？APCI不能生成一系列多电荷离子，所以不适合分析大分子。ESI 能生成一系列多电荷离子，特别适用于蛋白，多肽类等生物分子。4、质量分析器有哪几种及适用范围？四极杆分析器：多用于定量，最常用离子阱

3、质量分析器：推断结构飞行时间析器：精确于分子量毛细管电泳（小结与上届重点）1、什么是电泳？在电解质溶液中，位于电场中的带电离子在电场力的作用下，以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现象，称之为电泳。2、什么是电渗流？电渗现象中整体移动着的液体叫电渗流（电渗现象：当固体与液体接触时，固体表面由于某种原因带一种电荷，则因静电引力使其周围液体带有相反电荷，在液-固界面形成双电层，二者之间存在电位差。当液体两端施加电压时，就会发生液体相对于固体表面的移动，这种液体相对于固体表面的移动的现象叫电渗现象。）3、什么是电泳淌度，电渗淌度和表观淌度？电泳淌度：单位场强下，离子的电泳速率为电泳淌度(&#

4、181;ep )。电渗淌度：电渗流的迁移速率ueof和电场强度E成正比。单位电位梯度的电渗速率为电渗淌度µeof表观淌度：单位场强下，离子在实际分离过程中的迁移速度（表观迁移速度）4、各种电性离子在毛细管柱中的迁移速度是怎么样的？（石英毛细管，带负电）阳离子运动方向与电渗流一致，最先流出中性粒子运动方向与电渗流一致阴离子运动方向与电渗流相反，在中性离子后流出；5、 改变电渗流方向的方法有哪些（1）毛细管改性（2）加电渗流反转剂6、电渗流受哪些因素影响？电场强度的影响 电渗流速度和电场强度成正比，当毛细管长度一定时，电渗流速度正比于工作电压。毛细管材料的影响 不同材料毛细管的表面电荷特

5、性不同，产生的电渗流大小不同； 溶液PH的影响对于石英毛细管，溶液pH增高时，表面电离多，电荷密度增加，管壁zeta电势增大，电渗流增大； pH<3，完全被氢离子中和，表面电中性，电渗流为零。分析时，采用缓冲溶液来保持pH稳定。 温度的影响毛细管内温度的升高，使溶液的黏度下降，电渗流增大。温度每变化1，将引起背景电解质溶液黏度变化2%3%； 添加剂的影响（1）加入浓度较大的中性盐，如K2SO4，溶液离子强度增大，使溶液的黏度增大，电渗流减小。（2）加入表面活性剂，可改变电渗流的大小和方向； 加入不同阳离子表面活性剂来控制电渗流。 加入阴离子表面活性剂，如十二烷基硫酸钠（SDS），可以使壁

6、表面负电荷增加，zeta电势增大，电渗流增大；（3）加入有机溶剂如甲醇、乙腈，使电渗流增大。第8章薄层色谱法（上课知识点加上届重点）1、对吸附剂的要求（1）、应不溶于所使用的溶剂以及与所使用的溶剂和样品中各组分不起化学反应（2）、应具有较大的吸附表面（吸附容量）和一定的吸附力，对被分离物质应有足够的分辨力（3）、吸附剂颗粒大小要均匀，保持良好的重复性2、分离效率与什么有关：分离效率与其粒度、孔径及表面积等有关3、常用溶剂的极性强弱顺序：（大概记一下）水酸吡啶甲醇乙醇正丙醇石油醚4、混合溶剂1、先用单一的溶剂展开2、若Rf值太小，则加入一定量的极性强的溶剂，如乙醇、丙酮等3、如果Rf值太大，则加

7、入适量极性弱的溶剂，如环已烷、石油醚等，以降低极性4、可加入一定比例的酸或碱，使斑点集中5、薄层色谱操作方法制板（均匀）、点样（集中）、展开（多种方式，预饱和）、显色6、分配薄层色谱：利用被分离组分对固体表面活性吸附中心吸附能力的差别而实现分离7、吸附薄层色谱：利用被分离组分在固定相与流动相中的分配系数不同，各组分迁移速率不同而实现分离的方法8、比移值的概念：用来表征斑点位置的基本参数是保留因子，通常称作比移值，用Rf表示。第9章紫外可见分光光度分析法（上课知识点，黑体字为上届重点）1、紫外可见区：紫外区200400nm，可见区400760nm2、吸光定律：（我找不到答案）3、紫外可见分光光法

8、是一种电子跃迁光谱4、发色团，助色团，红移，蓝移，增色效应，减色效应5、分光光度计的组成：光源单色器样品室检测器显示记录系统6、检测器有哪些：光电池、光电管、光电倍增管1、紫外可见分光光度法是一种分子吸收光谱，紫外-可见吸收光谱主要研究共轭双键结构的有机化合物2、光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长l、频率n、光速c、波数（cm-1）等参数来描述: l n = c ； 波数 = 1/ l = n /c粒子性则用能量描述,光是由光子流组成，光子的能量： E = h n = h c / l （Planck常数：h=6.626 × 10 -34 J · S ) 光的

9、波长越短（频率越高），其能量越大。3、分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级， 三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量分子的内能：电子能量Ee 、振动能量Ev 、转动能量Er 即 EEe+Ev+Er e>v>r 4、生色团，助色团生色团（和助色团）是分子产生紫外-可见吸收的条件生色团 (chromophore)：能产生紫外-可见吸收的官能团， 如一个或几个不饱和键C=C, C=O, N=N, N=O等助色团 (auxochrome)：有一些含有n电子的基团(如OH、OR、NH、NHR、X等)，它们本身没有生色功能(不能吸收>200nm的光)，但当它们与生色团相

10、连时，就会发生n共轭作用，增强生色团的生色能力(吸收波长向长波方向移动，且吸收强度增加)，这样的基团称为助色团。5、红移，蓝移由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基）或采用不同溶剂后 吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移 吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移增色效应：吸收强度增强的效应 减色效应：吸收强度减小的效应6、影响紫外-可见吸收光谱的因素（1）共轭效应的影响p电子共轭体系增大，lmax红移，e max增大空间阻碍使共轭体系破坏，lmax蓝移，e max减小。 （2） 取代基的影响 给电子基：含未共用电子对的原子的基团。如-NH2, -OH等。吸电子基：易吸引电子而使电子容易流动的基团。

11、如：-NO2, -CO等a) 给电子基未共用电子对流动性大，形成p-p共轭，降低能量，lmax红移。b) 吸电子基的存在产生p电子的永久性转移，lmax红移。c) p电子流动性增加，吸收光子的吸收分数增加，吸收强度增加。d) 给电子基与吸电子基同时存在，产生分子内电荷转移吸收，lmax红移，e max增加。 （3） 溶剂的影响a) 溶剂极性增大，p®p*跃迁波长红移b) 溶剂极性增大，n®p*跃迁波长蓝移7、朗伯比尔定律（定量依据）朗伯比尔定律：在一定条件下，物质的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。 A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：光程长度，单位cm； c

12、：溶液的量浓度，单位mol·L-；：摩尔吸光系数，单位L·mol-·cm-；c：溶液的浓度，单位g·L-a：吸光系数，单位L·g-·cm- a与的关系为： a =/M （M为摩尔质量） 8、关于摩尔吸光系数的讨论· 摩尔吸光系数在数值上等于浓度为1 mol·L-1、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度；· 吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数· 不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；· 可作为定性鉴定的参

13、数；· 同一吸收物质在不同波长下的值是不同的。在最大吸收波长max处的摩尔吸光系数，以max表示。· max表明了该物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。· max越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。>105：超高灵敏；=(610）×104 ：高灵敏；<2×104 ：低灵敏。9、单色器的作用将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出任一波长单色光的光学系统。 入射狭缝：光源的光由此进入单色器； 准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； 色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜

14、或光栅；聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； 出射狭缝。10、显色剂的类型（知道有哪几类）无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵、过氧化氢等几种。有机显色剂：种类繁多偶氮类显色剂：本身是有色物质，生成配合物后，颜色发生明显变化；具有性质稳定、显色反应灵敏度高、选择性好、对比度大等优点，应用最广泛。偶氮胂、PAR等。 三苯甲烷类：铬天青S、二甲酚橙等11、吸光度读数范围用仪器测定时应尽量使溶液透光度值在T %=1565% (吸光度 A = 0.800.20)。12、双波长分光光度法不需空白溶液参比；但需两个单色器获得两束单色光(1和2)；以参比波长1处的吸光度A1作为参比，来消除

15、干扰。 AA2A1(21)bc优势：在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度高第10章红外吸收光谱（上届重点）1、红外吸收光谱概念：是利用物质分子对红外光的吸收，得到与分子结构相应的红外光谱力，从而来鉴别分子结构的方法。2、振动形式：双原子分子只有一种振动形式，多原子分子引起偶极炬变化的振动，一般可分为两大类，即伸缩振动、变形振动3、产生光谱的条件（1）红外辐射的能量必须与分子的振动能级差相等（2）分子振动过程中其偶极矩必须发生变化。4、特征区域的概念：有机化合物的分子中一些主要官能团的特征吸收多发生在红外区域，40001333cm-1。该区域吸收峰比

16、较稀疏，容易辩论，帮通常把该区域叫特征谱带区。5、指纹区的意义，概念概念：红外吸收光谱上1333400cm-1的低频区，该区域中出现的谱带主要是C-X（X=C、N、O）单键的伸缩振动及各种弯曲振动，由于这些键的键强差别不大，原子质量又相似，所以谱带出现的区域也相近，互相间影响较大，加之各种弯曲振动能级差小，所以这一区域谱带特别密集，犹如人的指纹，故称指纹区。意义：各个化合物在结构上的微小差异在指纹区都会得到反映，因此，在核对和确认有机化合物时用处很大。6、两种红外光谱的优缺点？（不知道问什么）色谱型红外光谱仪：价格低，速度慢，分辨率低，一般采用双光束，（与紫外不同的是色谱型的样品是放在光源和单

17、色器之间）。傅立叶变换型红外光谱仪：扫描速度快，适合食品联用；不需要分光，信号强，灵敏度高；仪器小巧。7、红外的样品（可以是固、液、气态）质谱法（上届重点）1、 质谱法的主要组成（六部分）进样系统、离子源、质量分析器、检测器、真空系统和工作站2、 离子源有哪几种电子轰击源（EI）、化学电离源（CI）、场致电离源（FI）、光致电离源（PI）3、 质量分析器有哪几种，用于？四极杆分析器：多用于定量，最常用离子阱质量分析器：推断结构飞行时间析器：精确于分子量4、 最常有的串联质谱（最常用的，扫描方法，多反应监测，是如何扫描的）气质联用技术已发展成为最完善，最成熟的色谱联用技术。全扫描模式（Scan）

18、：扫描的质量范围覆盖被测化合物的分子离子和碎片离子的质量是化合物的全谱可用于谱库检索选择离子监测模式（SIM）：跳跃式地扫描某几个选定的质荷比，获得的质谱图不是化合物的全谱子离子扫描：-扫描指定母离子的子离子碎片，所得到的质谱图只能是由指定的母离子经碰撞产生的母离子扫描：扫描能丢失指定质谱碎片的母离子，所得到的母离子质谱峰一定是能丢失指定质谱碎片的母离子。多反应监测（Multiple Reaction Monitor, LC/MS/MS)：监测特定母离子产生特定子离子碎片的化合物，目标化合物的跟踪，提高采集灵敏度，是灵敏度最高的定量采集方式上届气相色谱法重点R=1.5是两个相邻色谱峰完全分离的

19、标志。峰形的扩张。碳有机化合物射线载气（N2或Ar）电离电场恒定基流。电负性组分倒峰氮气分离效能主要受固定相的性质的影响基本原则指载气、色谱柱、温度以及进样操作（对于同系物，f可消去）即1、 外标法用组分的纯品为对照物质，以对照物质和试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法。 外标法的优点： 简便，不用校正因子，不必加内标物只需待测组分出峰。外标法的缺点： 结果的准确度与进样量的重复性和操作条件的稳定性有关。2、 内标法以一定量的纯物质（内标物），加入到准确称定的试样中再进样分析，根据试样和内标物的质量及峰面积和相对校正因子，求出某组分的百分含量。（可以看看薄的那本复印本的206页的计算题

20、帮助理解）优点：1、只需内标物及目标组分出峰;2、 操作条件变化而引起的误差小3、适合于复杂样品和微量组分的定量分析缺点： 1、 内标物选择难 2、 需要准确计量样品和内标的量内标物的选择：（1）试样中不存在的纯物质，与样品中的组分完全分离； （2）内标物质与待测组分的结构和性质相近（3）内标物质为纯物质或含量已知（4）内标物与样品互溶，不发生不可逆化学反应内标标准曲线法：先将待测组分的纯物质配成不同浓度的系列的系列标准试样，分别加入等量的内标物，进样分析，测得Ai和As,以Ai/As对Xi作图得到一直线即内标标准曲线法。液质联用 APCI（大气压化学电离 ）和ESI（电喷雾电离）的不同点（主

21、要看一下应用范围）¨ 离子产生的方式 APCI利用电晕放电离子化，气相离子化。 ESI利用离子蒸发，液相离子化。¨ 能被分析的化合物类型不同 APCI弱极性，小分子化合物，且具有一定的挥发性 ESI极性化合物和生物大分子。¨ 流速 ESI0.001到0.25 ml/min。 APCI0.2到2 ml/min。¨ 多电荷 APCI不能生成一系列多电荷离子，所以不适合分析大分子。 ESI 能生成一系列多电荷离子，特别适用于蛋白，多肽类等生物分子。正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的称为正相色谱法。用于分离在有机溶剂中有较高溶解度的化合物，如脂溶性维生素等。反相色谱法：流动相极性大于固定相极性的称为反相色谱法。主要用于分离非极性至中等极性的各类分子型化合物。高效液相色谱的组成高压输液系统进样系统分离系统检测系统数据记录和处理系统质谱法质谱图（大概了解一下，下面的