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文档简介
1、红细胞膜蛋白结构测定(红细胞抗体)方法流式细胞仪 (BeckmanCoulter,贝克曼库尔特 )原理:直接免疫荧光法。 FITC 标记的各型多克隆抗体,加到全血中,与红细胞膜上的相应的 IgG-Fc 片段结合,经过洗涤 ( 和固定 ) 等步骤后,在流式细胞仪上进行分析。标本采集与处理受检者的准备检查对象生活饮食处于日常状态,空腹采血。采集部位静脉采血抗凝剂EDTA或肝素抗凝血要求1样本量至少 1ml。2 样本应在采集后 6 小时内处理,冷冻的标本不能用。3 溶血样本不能用。试剂品牌剂型规格贮存联科成分1 :单克隆抗体液体1ML282:全血溶血试剂液体A:甲酸液体70ML室温B:碳酸钠等液体3
2、2ML室温C:多聚甲醛液体14ML室温3:鞘液液体20L室温4:清洗液液体5L室温5:荧光微球液体10ML2-8质控品BEKAMANCOULTER产品,未开瓶的试剂于 2-8 保存,可在有效期内保持稳定,稀释的试剂于 2-8 可稳定 2 周;每天校准一次:遇特殊情况随时进行校准。仪器BeckmanCoulter EPICS XL/FC500/Altra操作:1) 按照要求,分别向已编好号的试管中加入10 ul单克隆抗体和同型对照(IgG-FITC)2) 分别向试管中加入混匀的 100u1 抗凝血( 1: 200 稀释后)。3) 混匀,避光,室温孵育 20-30 分钟4) 上机测样报告结果报告百分数操作性能精密度批内五次重复 CV<2灵敏度500 1000 个荧光素分子参考值IgA<2.78%IgG<2.98%IgM<2.52%IgD<
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