肽核酸技术对猪场病毒持续侵染良好控制方案的研究(猪病篇)

1、我们致力于我们致力于养殖场病毒感染良好控制与净化保健方案推广养殖场病毒感染良好控制与净化保健方案推广肽核酸技术对猪场病毒持续侵染良好肽核酸技术对猪场病毒持续侵染良好控制方案的研究控制方案的研究( (猪病篇猪病篇) )韩健葆韩健葆 博士博士 15950558961595055896南京农业大学动物科技学院南京农业大学动物科技学院楠森兽医诊断技术研究中心楠森兽医诊断技术研究中心报告人简介：韩健葆报告人简介：韩健葆 楠森集团运营总监，毕业于南京农业大学，从事畜禽场健楠森集团运营总监，毕业于南京农业大学，从事畜禽场健康管理研究和兽用肽核酸（基因）抗病毒药物及多肽类功康管理研究和兽用肽核酸（基因）抗病毒

2、药物及多肽类功能性免疫调节剂研究推广多年能性免疫调节剂研究推广多年 ，兼任国内多家动物保健，兼任国内多家动物保健品企业新药研发顾问，常年为国内规模化养殖场提供技术品企业新药研发顾问，常年为国内规模化养殖场提供技术培训及疫病诊断服务。培训及疫病诊断服务。 应对愈渐复杂的病毒性疾病发生应对愈渐复杂的病毒性疾病发生现状，在行业内率先提出现状，在行业内率先提出“规模化养殖场病毒感染控制与规模化养殖场病毒感染控制与净化保健方案净化保健方案”的兽医传染病综合控制专家。的兽医传染病综合控制专家。森楠生物技术研究有限公司简介森楠生物技术研究有限公司简介 森楠生物隶属于楠森集团公司，专注于动物用核酸和多森楠生物

3、隶属于楠森集团公司，专注于动物用核酸和多肽类抗病毒免疫增强药物及功能性饲料添加剂研究开发肽类抗病毒免疫增强药物及功能性饲料添加剂研究开发的高新技术企业，公司以的高新技术企业，公司以“致力于推广规模化养殖场病致力于推广规模化养殖场病毒感染良好控制与净化保健方案毒感染良好控制与净化保健方案”为核心经营价值，秉为核心经营价值，秉承承“以创新思路成就未来、以优异品质创造价值以创新思路成就未来、以优异品质创造价值”的经的经营理念，以营理念，以“专业、敬业、善学、奋进专业、敬业、善学、奋进”的企业文化，的企业文化，以服务全球畜牧业为己任，用心为客户提供系统的现代以服务全球畜牧业为己任，用心为客户提供系统的

4、现代养殖技术解决方案。养殖技术解决方案。楠森资质与荣誉楠森资质与荣誉 “我们致力于为我们致力于为规模化养殖场提供病毒感染良规模化养殖场提供病毒感染良好控制与净化保健方案好控制与净化保健方案” “ “We will dedicate to eradicate the viral dieases in large-scaled farms”楠森现阶段核心价值楠森现阶段核心价值猪场病毒感染控制与净化方案的创造猪场病毒感染控制与净化方案的创造 疫百特注册商标疫百特注册商标拥有国家发明专利，技术世界领先拥有国家发明专利，技术世界领先 发明创造名称：猪瘟病毒特异性抗病毒肽核酸药物，专利号： ZL 2010

5、10159652.1 发明人或专利权人：韩健宝 在临床流行性的疾病所导致在临床流行性的疾病所导致的损失中的损失中, ,约有约有70%70%疾病损失是疾病损失是由病毒性疾病导致由病毒性疾病导致, ,所以病毒性所以病毒性疾病是影响养殖业健康发展和疾病是影响养殖业健康发展和盈利的关键因素。盈利的关键因素。病毒性传染病在养禽业中所扮演的角色病毒性传染病在养禽业中所扮演的角色关于病毒关于病毒 病毒是一类超显微的、不具有细胞结构的、专性活细胞内病毒是一类超显微的、不具有细胞结构的、专性活细胞内寄生的实体。它由一种核酸寄生的实体。它由一种核酸(DNA(DNA或或RNA)RNA)和蛋白质组成和蛋白质组成, ,

6、没有没有酶或酶系统极不完全酶或酶系统极不完全, ,不能进行独立的代谢作用不能进行独立的代谢作用, ,必须寄生必须寄生在宿主细胞内在宿主细胞内, ,借助于宿主细胞的代谢系统复制自身的核酸借助于宿主细胞的代谢系统复制自身的核酸和蛋白质才能繁殖。和蛋白质才能繁殖。病毒的感染机制病毒的感染机制病毒的生活史分为病毒的生活史分为5 5个基本过程：个基本过程：吸附吸附(absorption)(absorption)：病毒对细胞的感染起始于病毒蛋：病毒对细胞的感染起始于病毒蛋白外壳同宿主细胞表面特殊的受体结合，受体分子是白外壳同宿主细胞表面特殊的受体结合，受体分子是宿主细胞膜或细胞壁的正常成分。因此，病毒的感

7、染宿主细胞膜或细胞壁的正常成分。因此，病毒的感染具有特异性。具有特异性。侵入侵入(penetration)(penetration)：病毒吸附到宿主细胞表面之后，：病毒吸附到宿主细胞表面之后，将它的核酸注入到宿主细胞内。将它的核酸注入到宿主细胞内。复制复制(replication)(replication)：病毒核酸进入细胞后有两种去向，：病毒核酸进入细胞后有两种去向，一是病毒的遗传物质整合到宿主的基因组中，形成溶一是病毒的遗传物质整合到宿主的基因组中，形成溶原性病毒；第二种情况是病毒原性病毒；第二种情况是病毒DNA(DNA(或或RNA)RNA)利用宿主的利用宿主的酶系进行复制和表达。酶系进行

8、复制和表达。成熟成熟(maturation)(maturation)：一旦病毒的基因进行表达就可合：一旦病毒的基因进行表达就可合成病毒装配所需的外壳蛋白，并将病毒的遗传物质包成病毒装配所需的外壳蛋白，并将病毒的遗传物质包裹起来，形成成熟的病毒颗粒。裹起来，形成成熟的病毒颗粒。释放释放(release)(release)：病毒颗粒装配之后，它们就可从被感：病毒颗粒装配之后，它们就可从被感染的细胞中释放出来进入细胞外，并感染新的细胞。染的细胞中释放出来进入细胞外，并感染新的细胞。有些病毒释放时要将被感染的细胞裂解，有些则是通有些病毒释放时要将被感染的细胞裂解，有些则是通过分泌的方式进入到细胞外。过

9、分泌的方式进入到细胞外。有了疫百特有了疫百特TMTM，我们才能，我们才能与病毒和谐共处与病毒和谐共处 目前在兽医临床上尚无任何抗病毒化合物被目前在兽医临床上尚无任何抗病毒化合物被许可使用，许可使用，yebatonyebatonTMTM对于对于DNADNA病毒和小病毒和小RNARNA病毒病毒的控治以其良好的药代动力学特征、广谱的抗的控治以其良好的药代动力学特征、广谱的抗病毒作用、广泛的临床适应症以及良好的耐受病毒作用、广泛的临床适应症以及良好的耐受性和无毒副作用的特点性和无毒副作用的特点, ,将会为养殖业的健康发将会为养殖业的健康发展和畜禽病毒性疾病的控治做出重要的贡献。展和畜禽病毒性疾病的控治

10、做出重要的贡献。 SENNAN BIO. SENNAN BIO. 针对猪、家禽和虾的主要传染病针对猪、家禽和虾的主要传染病设计合成的设计合成的yebatonyebatonTM（反义脱氧寡核苷酸），（反义脱氧寡核苷酸），具有较强的抗病毒活性。体外实验表明本品对具有较强的抗病毒活性。体外实验表明本品对猪的（猪瘟病毒、蓝耳病病毒、口蹄疫病毒、猪的（猪瘟病毒、蓝耳病病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒）；禽的（流感病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒）；禽的（流感病毒、新城疫病毒、传支病毒、鸭肝炎病毒、法氏囊新城疫病毒、传支病毒、鸭肝炎病毒、法氏囊病毒）；对虾的（白斑综合征（病毒）；对虾的（白斑综合征（WSS

11、WSS）病毒和桃）病毒和桃拉综合征（拉综合征（TSTS） 病毒）显示出极强的抗病毒作病毒）显示出极强的抗病毒作用。用。YebatonYebatonTMTM的结构特点的结构特点 采用低聚壳聚糖控释包膜工艺将经采用低聚壳聚糖控释包膜工艺将经肽骨架修饰的反义寡核苷酸制备成肽骨架修饰的反义寡核苷酸制备成缓控释结肠溶微囊，猪口服缓控释结肠溶微囊，猪口服YebatonYebatonTMTM后，经消化道前段的溶释后，经消化道前段的溶释作用，保证绝大多数有效药物核酸作用，保证绝大多数有效药物核酸分子的生物活性不被破坏，其有效分子的生物活性不被破坏，其有效成分（反义脱氧寡核苷酸）在结肠成分（反义脱氧寡核苷酸）在

12、结肠部位吸收，具备高水平的生物利用部位吸收，具备高水平的生物利用率，这种壳聚糖修饰包膜技术和缓率，这种壳聚糖修饰包膜技术和缓释制剂工艺是保证生物活性药物经释制剂工艺是保证生物活性药物经口服后不被消化道内酶和口服后不被消化道内酶和PHPH值破坏值破坏的理想技术。的理想技术。以壳聚糖为载体的口服基因药物（摘要）以壳聚糖为载体的口服基因药物（摘要）唐明青唐明青1,刁勇刁勇1,2,许瑞安许瑞安1,2(1.华侨大学分子药物学研究所华侨大学分子药物学研究所, 2.分子药物教育部工程研究中心分子药物教育部工程研究中心,福建泉州福建泉州362021)人药研究论文案例人药研究论文案例 长期以来长期以来, ,基因

13、药物的给药以注射途径为主基因药物的给药以注射途径为主, ,是因为口服给药存是因为口服给药存在多种限制因素在多种限制因素, ,如胃中的低如胃中的低pHpH可使可使DNADNA脱嘌呤化脱嘌呤化, ,消化酶易降解治消化酶易降解治疗基因疗基因, ,常用基因载体难以被肠上皮细胞摄取等常用基因载体难以被肠上皮细胞摄取等, ,相关释药技术的发相关释药技术的发展明显滞后于基因药物本身的发展展明显滞后于基因药物本身的发展11。 作为一种天然的阳离子聚合物作为一种天然的阳离子聚合物, ,低聚壳聚糖不仅易与带负电荷的低聚壳聚糖不仅易与带负电荷的DNADNA等遗传物质结合而形成纳米微粒等遗传物质结合而形成纳米微粒,

14、,还具有无毒、易获得、生物可还具有无毒、易获得、生物可降解、稳定、生物相容、能抵抗胃肠道环境降解、稳定、生物相容、能抵抗胃肠道环境(pH(pH、核酸酶、核酸酶) )对药物的对药物的破坏、生物黏附性强、可促进药物渗透吸收等优点破坏、生物黏附性强、可促进药物渗透吸收等优点, ,日益成为口服日益成为口服基因药物的优良载体。基因药物的优良载体。YebatonYebatonTMTM结肠控释工艺结肠控释工艺保证了基因药物口服的高生物利用率保证了基因药物口服的高生物利用率 YebatonTMTM （多聚（多聚- -反义寡核苷酸肽）反义寡核苷酸肽）经口服进入体内后与特异宿主细胞结经口服进入体内后与特异宿主细胞

15、结合，在酶的催化作用下脱去肽骨架，合，在酶的催化作用下脱去肽骨架，经受体导入细胞内，识别并激活经受体导入细胞内，识别并激活22、5-5-寡腺苷酸合成酶，被活化的寡腺寡腺苷酸合成酶，被活化的寡腺甘酸可以使潜伏在体内的内源核酸酶甘酸可以使潜伏在体内的内源核酸酶（核酸内切酶（核酸内切酶-Dicer-Dicer）活化，在）活化，在RNARNA诱诱导的基因沉默复合体（导的基因沉默复合体（RISCRISC，RNA-RNA-induced silencing complexinduced silencing complex） 作用作用下，对（病毒）靶基因下，对（病毒）靶基因mRNAmRNA进行切割，进行切割

16、，引起病毒复制环节能力丧失，从而达引起病毒复制环节能力丧失，从而达到抗病毒的作用。到抗病毒的作用。YebatonYebatonTMTM的作用机制的作用机制( (抗病毒机理抗病毒机理) )YebatonYebatonTMTM的作用机制的作用机制( (免疫调节机理免疫调节机理) ) YebatonTM所独特的拟病毒结构，进入机体后可被免疫所独特的拟病毒结构，进入机体后可被免疫系统误认为是遭受到病毒攻击从而激活机体的特异性和系统误认为是遭受到病毒攻击从而激活机体的特异性和非特异性的免疫防卫机能。非特异性的免疫防卫机能。 对其免疫调节抗肿瘤机制的研究表明，其主要作用是对其免疫调节抗肿瘤机制的研究表明，

17、其主要作用是激活自然杀伤细胞（激活自然杀伤细胞（NKNK细胞）、细胞）、T T、B B淋巴细胞、巨噬细淋巴细胞、巨噬细胞活性、诱导机体产生多种干扰素、多种细胞介素，从胞活性、诱导机体产生多种干扰素、多种细胞介素，从而达到预防和治疗病毒病，修复机体免疫缺陷的作用。而达到预防和治疗病毒病，修复机体免疫缺陷的作用。YebatonYebatonTMTM实验室与临床研究实验室与临床研究 森楠生物新药研发中心的研究人员在长达森楠生物新药研发中心的研究人员在长达六年的实验室研究和众多猪、禽场进行临床六年的实验室研究和众多猪、禽场进行临床应用性研究，结果表明：疫百特应用性研究，结果表明：疫百特( (Yebat

18、onTMTM) )对对猪、禽临床常见多种病毒性疾病具有很好的猪、禽临床常见多种病毒性疾病具有很好的预防和理想、经济的治疗效果。预防和理想、经济的治疗效果。YebatonYebatonTMTM抑制蓝耳病病毒（抑制蓝耳病病毒（PRRSVPRRSV）感染细胞的试验）感染细胞的试验 结果显示：结果显示： YebatonYebatonTMTM对对PRRSVPRRSV复制有明显的抑制作复制有明显的抑制作用用对照（对照（ControlControl）组的细胞）组的细胞中形成的平均空斑数为中形成的平均空斑数为128128个。个。 YebatonYebatonTMTM组的细胞中形成组的细胞中形成的平均空斑数为的

19、平均空斑数为2727个个 YebatonYebatonTMTM与其他抗病毒药物在临床效果上的比较与其他抗病毒药物在临床效果上的比较 YebatonYebatonTMTM对对人工感染人工感染HCHC、PRRSPRRS等病毒后的发病率影响等病毒后的发病率影响 结果表明结果表明: :在适当的在适当的剂量范围内，剂量范围内， YebatonTM的添加量的添加量越大，控制病毒感染越大，控制病毒感染的效果越显著。的效果越显著。 YebatonYebatonTMTM对对抑制猪瘟病毒（抑制猪瘟病毒（CSFVCSFV）感染细胞的试验）感染细胞的试验图图1. 1. 未用未用YebatonTM转转染的感染染的感染C

20、 CSFVFV的牛睾丸的牛睾丸细胞（细胞（100100） 图图2. 2. 用用YebatonTM转转染的感染染的感染CSFVCSFV的牛睾的牛睾丸细胞（丸细胞（100100）结果表明，结果表明， 被被YebatonTM转染转染细胞细胞可以显著的抑制病可以显著的抑制病毒对细胞的感染。毒对细胞的感染。猪场实施病毒性传染病良好控制的原则猪场实施病毒性传染病良好控制的原则系统的免疫检测系统的免疫检测定期的有效产品定期的有效产品保健（保健（YebatonYebatonTMTM）科学的疫苗接科学的疫苗接种程序种程序 三位一体三位一体只有尽快实施只有尽快实施“三位一体三位一体”的健康管理模式（系统的的健康管

21、理模式（系统的免免疫检测、科学的疫苗接种程序、疫百特策略性保健方疫检测、科学的疫苗接种程序、疫百特策略性保健方案），才是猪场重大病毒性疾病控制及清除计划的最案），才是猪场重大病毒性疾病控制及清除计划的最佳手段！佳手段！“三位一体三位一体”的健康管理模式的健康管理模式影响猪群免疫效果的主要因素影响猪群免疫效果的主要因素 病毒性传染病的控制，一直以来都是依赖疫苗的免疫接种，不可否认，对病毒性传染病的控制，一直以来都是依赖疫苗的免疫接种，不可否认，对于传染病的控制，疫苗的免疫接种是最基础的、最经济的、最主动的措施，但是于传染病的控制，疫苗的免疫接种是最基础的、最经济的、最主动的措施，但是面对当前畜禽

22、传染病的发生现状，仅仅依赖疫苗的免疫接种来控面对当前畜禽传染病的发生现状，仅仅依赖疫苗的免疫接种来控制传染病已明显感到不足。制传染病已明显感到不足。 免疫受体（猪群）的免疫状态（如免疫受体（猪群）的免疫状态（如: :免疫抑制、免疫麻痹、免疫缺陷、免免疫抑制、免疫麻痹、免疫缺陷、免 疫遗漏）。疫遗漏）。 这种现象通过疫苗（特异性抗原）是消除或缓解不了的，必须要通过非这种现象通过疫苗（特异性抗原）是消除或缓解不了的，必须要通过非特异性免疫增强剂参与抗原协同工作，先将免疫受体的免疫状态调节正特异性免疫增强剂参与抗原协同工作，先将免疫受体的免疫状态调节正常，这样机体免疫系统才能对抗原产生正常的免疫应答

23、。常，这样机体免疫系统才能对抗原产生正常的免疫应答。野毒的免疫干扰和免疫占位现象野毒的免疫干扰和免疫占位现象 我国猪场的猪瘟为什么总是防不好？追究其根本原因就是猪群普遍遭受我国猪场的猪瘟为什么总是防不好？追究其根本原因就是猪群普遍遭受野毒持续侵染导致带毒密度过大，与疫苗弱毒竞争宿主细胞后致使免疫野毒持续侵染导致带毒密度过大，与疫苗弱毒竞争宿主细胞后致使免疫状态不稳定。状态不稳定。在免疫接种前后各在免疫接种前后各5 5天连续使用天连续使用, ,可解除猪群免疫制、可解除猪群免疫制、改善免疫状态、弥补免疫遗漏、减轻病毒感染压力、改善免疫状态、弥补免疫遗漏、减轻病毒感染压力、提升灭活疫苗及活疫苗免疫效

24、果的完美方案！提升灭活疫苗及活疫苗免疫效果的完美方案！YebatonYebatonTMTM做为免疫增强剂提高疫苗免疫效果做为免疫增强剂提高疫苗免疫效果YebatonYebatonTMTM抗病毒又为何提高活疫苗免疫效果抗病毒又为何提高活疫苗免疫效果1 1 活病毒感染的第一个阶段是在机体的淋巴系统（在淋巴系统完成细胞活病毒感染的第一个阶段是在机体的淋巴系统（在淋巴系统完成细胞免疫应答）。弱毒苗是人工致弱的病毒，正常情况下在机体免疫应答）。弱毒苗是人工致弱的病毒，正常情况下在机体淋巴系统淋巴系统完成完成细胞免疫应答后，致弱活病毒都会被抗原递成系统转化成抗体，即使有细胞免疫应答后，致弱活病毒都会被抗原

25、递成系统转化成抗体，即使有少量的弱毒在淋巴系统增殖后逃逸到血液循环系统并出现一过性的轻微少量的弱毒在淋巴系统增殖后逃逸到血液循环系统并出现一过性的轻微临床症状（轻微的病毒血症）也会很快的被血液系统里存在的特异性抗临床症状（轻微的病毒血症）也会很快的被血液系统里存在的特异性抗体；巨噬细胞、体；巨噬细胞、NKNK杀伤细胞等构成非特异免疫系统细胞所控制住。而野杀伤细胞等构成非特异免疫系统细胞所控制住。而野毒（非致弱活病毒）往往会在淋巴系统内大量的增殖并涌入血液循环系毒（非致弱活病毒）往往会在淋巴系统内大量的增殖并涌入血液循环系统，并随着血液循环直接进入实质性脏器（如肺脏、肾脏、肝脏、脾脏统，并随着血

26、液循环直接进入实质性脏器（如肺脏、肾脏、肝脏、脾脏等）并将这些脏器上的特定健康细胞作为第二宿主细胞而进行再次的破等）并将这些脏器上的特定健康细胞作为第二宿主细胞而进行再次的破坏，导致脏器的坏死、出血等病变从而引起脏器的代谢功能紊乱等一系坏，导致脏器的坏死、出血等病变从而引起脏器的代谢功能紊乱等一系列临床表现从而发病甚至死亡。列临床表现从而发病甚至死亡。 YebatonTMYebatonTM抗病毒是发生在血液循环系统，主要在受病抗病毒是发生在血液循环系统，主要在受病毒感染的宿主细胞内阻断病毒基因表达复制从而达到抗毒感染的宿主细胞内阻断病毒基因表达复制从而达到抗病毒目的。而对存在淋巴系统的病毒（弱

27、毒或野毒）作病毒目的。而对存在淋巴系统的病毒（弱毒或野毒）作用不到，所以不会影响弱毒疫苗所诱导的细胞免疫应答用不到，所以不会影响弱毒疫苗所诱导的细胞免疫应答过程。过程。YebatonYebatonTMTM抗病毒又为何提高活疫苗免疫效果抗病毒又为何提高活疫苗免疫效果2 2病毒性疾病的难以治疗！病毒性疾病的难以治疗！疫苗免疫效果的难以保证！疫苗免疫效果的难以保证！抗生素保健观念的片面性！抗生素保健观念的片面性！ 猪场应用猪场应用YebatonYebatonTMTM之母猪阶段式病毒控制方案之母猪阶段式病毒控制方案 据调查资料显示，我国目前母猪年贡献成品肉猪的生产水据调查资料显示，我国目前母猪年贡献成

28、品肉猪的生产水平不到发达养猪国家的平不到发达养猪国家的70%70%，大量的母猪存在不同程度的繁，大量的母猪存在不同程度的繁殖障碍，由于母猪的生产性能低下，又加上疾病的频频发生，殖障碍，由于母猪的生产性能低下，又加上疾病的频频发生，猪场的盈利危机四伏。在猪场中有着相当多的母猪表现出的猪场的盈利危机四伏。在猪场中有着相当多的母猪表现出的屡配不孕、死胎、流产、产弱仔、便秘、奶水不足、采食量屡配不孕、死胎、流产、产弱仔、便秘、奶水不足、采食量不正常等亚临床现象。存在的这些现象中，有不正常等亚临床现象。存在的这些现象中，有80%80%是由于母是由于母猪的野病毒持续感染所致。在生产中，采用猪的野病毒持续感染所致。在生产中，采用YebatonTMTM每个月每个月连用连用1010天的阶段式病毒控制方案是解决这些问题的关键！天的阶段式病毒控制方案是解决这些问题的关键！ 猪场应用猪场应用YebatonTMTM之保育仔猪三段式病毒控制方案之保育仔猪三段式病毒控制方案 猪群生长过程中在哺乳后期猪群生长过程中在哺乳后期-保育中期这保育中期这5050天左右的时间是最天左右的时间是最容易感