乌司他丁对galnlps引起大鼠急性肝衰竭ca spase-3、ca spase-8和bcl-2的影响

1、内科学(传染病学)专业毕业论文 精品论文 乌司他丁对GalN/LPS引起大鼠急性肝衰竭Caspase-3、Caspase-8和Bcl-2的影响关键词：乌司他丁 急性肝衰竭 细胞凋亡摘要：目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和

2、UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静

3、脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋

4、巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P&a

5、mp;amp;lt;0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.

6、7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。正文内容 目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急

7、性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在

8、腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在

9、肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有

10、统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明

11、显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-

12、氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验

13、前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿

14、瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P&a

15、mp;amp;lt;0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0

16、.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存

17、率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36

18、h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定

19、12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细

20、胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P&a

21、mp;lt;0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UT

22、I处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法：

23、1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生

24、理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LP

25、S造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P&a

26、mp;amp;lt;0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P&

27、lt;0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急

28、性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔

29、内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理

30、形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h

31、，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相

32、比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降

33、低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只

34、大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻

35、存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2

36、.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspas

37、e-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。

38、 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawle

39、y系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材

40、与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷

41、等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清

42、TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意

43、义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspa

44、se-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，U

45、TI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Cas

46、pase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低， ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P&am

47、p;amp;lt;0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。

48、 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增

49、加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-2

50、5)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实验前12h开始禁食。 2.大鼠急性肝衰竭模型的建立：腹腔内注射D-GalN/ LPS建立大鼠急性肝衰竭模型，UTI处理组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射UTI，模型组则在腹腔内注射D-GalN/ LPS后立即注射0.4ml生理盐水。正常对照组则腹腔注射2ml生理盐水。 3.取材与切片：在相应时间点处死各组大鼠，先用10水合氯醛0.35ml/kg麻醉，剖腹经门静脉采血，取出肝组织立即置于用中性福尔马林固定12h，之后脱水透明石蜡包埋。另取部分肝组织立即液氮冻存。 4.标本检测：经门静脉所采血标本，全自动生化仪检

51、测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)，ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-)。肝组织切片HE染色观察肝脏病理形态学变化；取肝组织匀浆检测Caspase-3和Caspase-8活性。采用S-P免疫组织化学方法染色组织切片，检测Bcl-2在肝组织中的表达。 结果： 1.在用D-GalN/ LPS造模后，大鼠逐渐表现为食欲明显减退、嗜睡、抽搐、昏迷等。肝病理学表现为肝小叶结构被破坏，可见不同程度的细胞凋亡及坏死，小叶内及汇管区有淋巴细胞和巨噬细胞为主的炎症细胞浸润，残存肝细胞水肿变性，这表明急性肝功能衰竭动物模型成功建立。 2.UTI处理组血清ALT、AST、TB水平明显降低，

52、ALT在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。AST在12h，24h，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。TB在24，36h，48h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 3.UTI处理组血清TNF-水平明显降低，TNF-水平在6h和12h与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。 4.UTI处理组Caspase-3和Caspase-8活性明显降低，Caspase

53、-3活性在各时间点与模型组相比均有统计学意义(P<0.01)。Caspase-8活性亦在各时间点与模型组相比有统计学意义(P<0.01)。 5.UTI处理组Bcl-2表达明显增加，Bcl-2蛋白表达在6h时已经明显增加，与模型组相比有统计学意义(P<0.05)，其他各时间点与模型组相比均有统计学意义。 6.UTI处理组大鼠生存率明显提高，UTI处理组和模型组大鼠生存率分别是66.7(10/15)、40.0(6/15)，UTI处理组较模型组大鼠生存率有显著性提高(P0.05)。 结论： 1.乌司他丁能改善急性肝衰竭大鼠的肝脏病理组

54、织学结构，改善肝衰竭大鼠的肝功能。 2.乌司他丁能提高急性肝衰竭大鼠的生存率，其机制可能与降低急性肝衰竭大鼠血清TNF-水平，降低肝组织Caspase-3和Caspase-8活性，增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。目的： 1.观察乌司他丁(UTI)对D-氨基半乳糖(D-GalN)/脂多糖(LPS)引起大鼠急性肝衰竭预后的影响。 2.初步研究乌司他丁对Caspase-3、Caspase-8活性和Bcl-2表达的影响，探讨肝细胞凋亡与急性肝衰竭的关系以及乌司他丁对其预后的相关性。 方法： 1.动物分组与喂养：健康雄性Sprague-Dawley系大鼠186只，体重200250g，随机分为对照组，模型组和UTI处理组，模型组和UTI处理组再分为6h、12h、24h、36h、48h取材5组。另模型组和UTI处理组中各取15只大鼠观察生存率和生存时间所有大鼠均在室温恒定(20-25)及灯光昼夜节律控制(8：00-20：00)下喂养，自由进食、进水，实