血清谷氨酰转移酶GGT速率法测定

1、血清- 谷氨酰转移酶(-GGT) 速率法测定1. 实验原理GGT催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以 -谷氨酰-3- 羧基-对硝基苯胺为底物，将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽，生成对硝基苯胺和 -谷氨 酰 双 甘 肽 。 在 405nm 进 行 吸 光 度 检 测 ， 吸 光 度 升 高 的 速 率 与 标 本 中 GGT 活力成正比。GGT- 谷氨酰 -3- 羧基 - 对硝基苯胺 + 双甘肽2. 标 本 ：对硝基苯胺+- 谷氨酰双甘肽2.1病人准备：无特殊。2.2类型：血清或 EDTA血浆。3. 标本存放：室温可保存 8 小时；28可保存 3 天；-20 保存至少可稳定 1周。4. 标本运

2、输：常温条件下保存运输。5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。6. 实验材料6.1试剂 利德曼 -GGT 测定试剂盒（试剂 16 64ml 试 剂 2 6 16ml ）6.1.1试剂组成试 剂 1（ R1）：Tris 缓 冲 液pH8.25100mmol/L甘氨酰甘氨酸150mmol/L试 剂 2（ R2）：-谷氨酰-3- 羧基-对硝基苯胺2.9mmol/L6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于 28，若无污染，可稳定至失效期。6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5注 意 事 项

3、 ：试 剂 中 含 叠 氮 钠（ 0.95g/L）为防腐剂。不 可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2校 准 品 ： 使 用 DiaSys公 司 提 供 的 TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文 件 。6.3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。7. 仪器：贝克曼 AU680 生化分析仪8. 操作步骤8.1项目基本参数：参见 AU680 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件8.2仪器操作步骤：参见 AU680 生化分析仪操作规程.SOP 文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把

4、非定值血清水平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以 2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。11. 计 算 方 法 ： 以 TruCal U 复 合 校 准 品 GGT 校 准 值 校 准 仪 器 后 ，在 病 人 结 果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准 品 进行 GGT活力检测，可以直接使用A/min 均 值 乘 以 计 算因子得到结果，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算 GGT 活力的计算因子见下 表 ：A/min因 子 = GGT 活 力 U/L底物起始的反应（37）样品起始的反应（3

5、7）405nm1421115812. 参考值范围3、4 ：女性 7-32U/L； 男 性 11-49U/L。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义1： -谷氨酰转移酶（GGT）又称 -谷氨酰转肽酶。存在于肝脏和胆汁中，是肝胆疾病最敏感的指示物。因为该酶对肝胆疾病具有高阴性预期值，因此 -谷氨酰转移酶的检测被广泛地用于排除肝胆疾病。结合丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、胆碱酯酶等其它酶， -谷氨酰转移酶对于肝脏疾病的鉴别诊断非常有价值。14. 操作性能14.1线 性 范 围 ： 2-500U/L。14.2 精密度：精

6、密度的评估是根据 NCCLS推荐的标准方法，AU680 批内精密度小于 3%，总精密度小于 3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。批内精密度xsCV批间精密度xsCVn=20(U/L)(U/L)(%)n=20(U/L)(U/L)(%)样 品 139.90.992.48样 品 141.50.621.49样 品 273.60.851.16样 品 272.30.610.85样 品 32061.320.64样 品 32040.740.3614.3 方 法 学 比 较 ： 本 公 司 的 试 剂 盒 (y) 与 某 商 品 化 试 剂 盒 (x) ， 同 时 对 78 个样品进行

7、 GGT 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+1.00U/L； r=0.999 。14.4灵敏度：本试剂的检测限为 2U/L。14.5病人结果可报告范围：2-500U/L。15. 超出范围结果处理：本法对 GGT活力检测的最大 500U/L ，当样品测定值超 过 上 限 时 ，应 将 样 品 用 9g/L氯 化 钠 溶 液 作 1+5 稀 释 ，重 新 测 定 ，结 果 乘 以6 。16. 病危报警值的处理17. 方法局限性17.1本 法 对GGT活力检测的最大 500U/L ，当样品测定值超过上限时，应将样 品 用 9g/L氯化钠溶液作 1+5 稀释，重新测定，

8、结果乘 6。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度 1704mol/L， 胆 红 素 浓 度684mol/L ，血 红 蛋 白 浓 度 4.00g/L ，甘 油 三 酯 浓 度22.6mmol/L时 没 有 观 察到干扰。18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献1.ThomasL.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1 sted.Frankfurt:2. Persijn JP, van der Silk W. A new method for the determination ofgamma-glutamyltranSHeraseinserum.JClinChem ClinBiochem1976;14:421-7.3. Szasz G. Gamma-Glutamyltranspeptidase. In: Bergmeyer HU. Methodender enzymatischen Analyse. Weinheim: Verlag Chemie, 1974.p. 757.4.FischbachF,ZawtaB.Age-dependen