安捷伦GCMSD气相质谱联用仪操作规程

1、GC/MSD气相质谱联用仪操作规程一、开机 1、打开载气（He）钢瓶控制阀，设置分压阀压力至0.5MPa。 2、打开计算机，登录进入Windows XP系统。3、打开GC、MSD主机电源，等待仪器自检完毕。4、在桌面双击图标，进入MSD化学工作站。5、查看仪器状态及真空泵运行状态。5.1 在为MSD抽真空之前，请确保您的系统满足如下全部条件：5.1.1 放空阀关闭（顺时针旋紧放空阀）5.1.2 所有其他真空垫圈和配件均被放置和紧固好（前面板手紧螺母必须上好，但不要太紧）5.1.3 连接MSD到一个接地电源。5.1.4 GC/MSD接口装入柱箱。5.1.5 老化好的毛细管柱被装在GC进样口和GC

2、/MSD接口上。5.1.6 启动GC，但并不启动GC/MSD接口加热区域、进样口部件和色谱柱箱。5.1.7 连接纯度至少为99.999%的载气到带有推荐的吸附阱的GC上。5.1.8 如果使用氢气作载气，载气流必须是关闭的。5.1.9 前置泵排气妥善排到室外。5.2在开载气流之前禁止开任何加热区域。没有载气流，加热柱子，将导致柱子的损坏。二、调谐调谐应在仪器至少开机2个小时后方可进行，若仪器长时间未开机，则建议将此时间延长至4小时。1、使用自动调谐：1.1 自动调谐：在全扫描范围内的得到最大灵敏度。1.2 标准谱图调谐：在全扫描范围内得到标准灵敏度。虽较自动调谐灵敏度稍低，但与谱库中标准谱图的匹

3、配度更高，适合与谱库检索和定性。1.3 快速调谐：调谐质量轴、峰宽和EM电压，以得到最佳灵敏度和分辨，以及精确测定质量数。当调谐的质量的同位素丰度在可接受的范围内，一般使用快速调谐做为日常调谐。2、使用手动调谐：手动调谐允许对话式的设置、修整某些参数，以便满足特殊分析的需要。用手动调谐可达到比自动调谐更高的灵敏度。三、GC配置编辑1、自动进样器配置设定：1.1进样量1.2溶剂清洗模式2、模块配置设定2.1 进样口、检测器、PCM等的气体类型。3、色谱柱参数设定3.1 添加/选择色谱柱3.2 选择进样口、检测器及加热类型。4、其他项设定4.1 压力4.2 温度4.3 阀进样/DEAN SWITC

4、H等四、数据采集方法编辑 1、调用已有方法 2、编辑整个方法2.1 进样器：手动/自动2.2 柱模式：流量（恒流）、压力（恒压）2.3 进样口: 前/后、进样体积、清洗体积、次数2.4 阀：类型和个数2.5 分流/不分流进样口：温度、分流比、隔垫/分流出口吹扫流量分流2.6 柱箱：温度、时间程序2.7 AUX参数：辅助参数设定2.8 时间表：位置、设定值2.9 信号参数：信号源、数据采集频率2.10 质谱仪：调谐文件、溶剂延迟、扫描（SIM）参数、（另）保存方法五、编辑样品数据文件名称（子目录）六、样品数据文件名称（子目录），编辑序列表。（另）保存序列七、进样分析（等待就绪）八、样品数据分析、

5、报告生成九、关机（放空）1、如果系统装有规管控制器，请关掉规管及规管控制器。2、放空程序关闭GC/MSD接口加热器，分析器加热器、真空泵加热器，且将GC炉温设置到30摄氏度。3、在关载气之前要确保GC炉和GC/MSD接口已冷却。4、如果使用氢气做载气，那么在关MSD电源之前必须关闭载气流。5、软件提示可以关闭电源时，关闭MSD电源。6、打开MSD上面的罩子。7、逆时针方向旋转放空阀，将空气放入真空室。十、操作过程中的重要提示1、为了避免突发的重写、删除以及磁盘驱动器发生的硬件问题所产生的数据丢失，请经常及时备份数据和方法。2、确保所使用的调谐文件适合所分析的样品。3、在笔记本上保存调谐报告作为

6、日后参考。4、按MSD硬件手册及GC维修和故障调试手册所指示的那样进行系统维护，并为所有维修工作做记录。5、当给MSD放空时，利用冷GC来进行维护，如重新放置进样口衬管、隔垫等。在抽真空后，要等待至少两小时以便MSD达到热平衡，这样才能调谐或采集数据。6、最佳灵敏度通常在柱流速为1.2ml/min时或者更小一些。当注入柱的样品多于1ul时，使用脉冲不分流方式并提高初始炉温10-20摄氏度。7、对于不分流进样，脉冲不分流方式把较多量样品送入柱子，脉冲进样压力为初始进样压力的2倍。8、选定恒流方式可以在多数情况下提供最有效的分离，同时，在整个温度过程中产生恒定灵敏度。9、对于一个新柱，检查柱的螺母

7、在第一次加温循环后是否依然紧固。10、使用GC键盘上的设置状态键来设置3个非常重要的项目（保留时间、炉温等），无论化学工作站是否在主视窗，这些一直都是能看到的。11、清洗并再注满自动进样其洗涤瓶，不要将小瓶中加入过满的溶剂。12、使用下表作为SIM或扫描采集方式指南。12.1 分析带有未知组分的混合物扫描12.2 分析在混合物中已知组分的含量（定量）扫描或SIM12.3 鉴定某混合物中低含量的已知化合物SIM13、当为SIM选择质量时，使用打印出的成表报告中的精确质量，而非质谱显示器上注释的标定质量，这样可提供更精确的数据。14、当进行SIM分析时，除非试图去以1个amu间隔确定质量比值，否则

8、请使用低分辨方式，低分辨可提供最大灵敏度及重复性。15、选择小范围的扫描，它能产生较好的库检索结果，并且它能导致色谱峰获得更多的质谱，以便更好地定量。十一、日常维护保养1、在系统提供的硬件手册中描绘了维护任务。经常进行系统维护可能会改变您的系统，所以请保留一份维护记录。2、每日2.1 检查，如果需要则替换隔垫。2.2 检查进样口套管松紧度。2.3 检查柱螺母的松紧度。3、每周3.1 检查前级泵油水平线。3.2 更化进样口套管和密封圈。4、每月4.1 清洁分流/不分流进样口放空管阀门。4.2 检查泄露（进样口、柱连接）。5、每三个月5.1 更换高压气瓶（当低于500psig时）6、每六个月6.1

9、 更换前级泵油6.2 检查，如有必要则重新注满校准瓶。7、每年7.1 检修或更化GC内部和外部阱及化学过滤器。7.2 如果需要7.2.1 调谐MSD7.2.2 清洁离子源7.2.3 更换载气阱7.2.4 更换老化不见（灯丝、EM等）7.2.5 更换柱子。7.2.6 润滑密封垫圈。十二、安全须知1、禁止在MSD开机或连接电源时进行检修，除非MSD提供的文件明确指出。2、即使MSD关机，GC/MSD接口也可能处于危险高温状态。在关机后，GC/MSD接口冷却十分缓慢，在对其进行维护之前要确保所有部件均已冷却。3、在GC背部工作时要十分小心。在冷却循环中，GC将释放热消耗，这可能会导致燃烧。4、为前级

10、泵提供的油阀仅用于停止前级泵注油，如果正在分析有毒化合或正使用有毒溶剂，则请卸下油阀，并从前级泵中用管把其从实验室排出。5、当更换泵油时，请使用防腐蚀化学手套以及防护镜，避免接触液体。6、进样口、检测器、阀门箱的绝缘体以及绝缘环由耐熔陶瓷纤维板（RCF）构成，避免吸入RCF微粒。注意工作间通风，穿着长袖衣物，带手套以及防护镜及呼吸面罩，在一个密封塑料包中除去绝缘体。在处理RCF之后，用软性香皂和冷水洗手。1.打开氦气钢瓶减压阀。保证钢瓶出口压力在合适的范围（0.4-0.6mpa）。检查是否需要更换GC进样垫（绿色， 红色耐高温或低流失进样垫），衬管，色谱柱。保证MS放空阀拧紧，机械泵油位及颜色

11、正常。2.接通GC和MS电源，如果长时间没有开机。需要手推MS侧板。等仪器自检通过，进入仪器控制界面。如果通讯有故障。请检查网络是否正常。如果通讯正常，可以将GC的电源关闭，重新启动GC。 MS 需要点击reset键（具体位置见附件）。自检通过后再次启动软件。3.系统初始化：（主要目的：抽真空）a)设定离子源及四级杆温度b)柱流量不要高于2ml/min (标准型高真空泵)c)推荐开机两小时后再开始调谐，测定进样。如果条件允许，长期开机可以保持良好的真空。节省开机等待时间，降低背景例如水峰等干扰。进一步提高灵敏度4.在仪器控制界面，编辑方法，运行方法。方法的默认路径为C:MSDchem1meth

12、od. 根据实验室的具体情况。路径可以在D盘等。数据在Data文件夹下。如果有自动进样器，可以编辑序列批量进样。序列路径在Sequence下。编辑一个完整的方法（Edit Entire Method）方法信息（Method Information）：描述性文字采集参数（Instrument/ Acquisition）：?进样口：进样模式（分流，不分流等），温度，压力，载气等?色谱柱：恒流，恒压，流量，柱信息等?炉温：恒温，程序升温等?自动进样塔：洗针程序?MS：调谐文件，溶剂延迟，质量范围，sampling, 阈值或SIM 分组时间，停留时间等数据分析参数（Data Analysis）：?谱图

13、优化：鼠标右键，左键及左右键的功能?积分优化：自动积分，设参数做积分（化学工作站积分&RTE积分），手动积分?建立校正表：第一个浓度标样，New Calibration Table，输入名称、含量、目标离子、限定离子第二个浓度标样：Add new Level，输入含量第三个浓度标样：Add new Level，输入含量第一个浓度标样第2针数据：Recalibrate，选择级别1，平均或取代第二个浓度标样第2针数据：Recalibrate，选择级别2，平均或取代校正设置：浓度单位、曲线/原点? 设定报告：百分比报告，谱库检索报告，定量报告，用户自建报告、输出目的地（屏幕，打印机或保存为文

14、件）5975MSD   reset 键气相色谱法（GC）是一种应用非常广泛的分离手段，它是以惰性气体作为流动相的柱色谱法，其分离原理是基于样品中的组分在两相间分配上的差异。气相色谱法虽然可以将复杂混合物中的各个组分分离开，但其定性能力较差，通常只是利用组分的保留特性来定性，这在欲定性的组分完全未知或无法获得组分的标准样品时，对组分定性分析就十分困难了。质谱仪（MS）的基本结构质谱系统一般由真空系统、进样系统、离子源、质量分析器、检测器和计算机控制与数据处理系统（工作站）等部分组成。质谱仪的离子源、质量分析器和检测器必须在高真空状态下工作，以减少本底的干扰，避免发生不必要的分

15、子离子反应。质谱仪的高真空系统一般由机械泵和扩散泵或涡轮分子泵串联组成。机械泵作为前级泵将真空抽到10-110-2Pa，然后由扩散泵或涡轮分子泵将真空度降至质谱仪工作需要的真空度10-410-5Pa。虽然涡轮分子泵可在十几分钟内将真空度降至工作范围，但一般仍然需要继续平衡2小时左右，充分排除真空体系内存在的诸如水分、空气等杂质以保证仪器工作正常。 气相色谱质谱联用仪的进样系统由接口和气相色谱组成。接口的作用是使经气相色谱分离出的各组分依次进入质谱仪的离子源。接口一般应满足如下要求： 不破坏离子源的高真空，也不影响色谱分离的柱效； 使色谱分离后的组分尽可能多的进入离子源，流动相尽可能少进入离子源

16、； 不改变色谱分离后各组分的组成和结构。 离子源的作用是将被分析的样品分子电离成带电的离子，并使这些离子在离子光学系统的作用下，汇聚成有一定几何形状和一定能量的离子束，然后进入质量分析器被分离。其性能直接影响质谱仪的灵敏度和分辨率。离子源的选择主要依据被分析物的热稳定性和电离的难易程度，以期得到分子离子峰。电子轰击电离源（EI）是气相色谱质谱联用仪中最为常见的电离源，它要求被分析物能气化且气化时不分解。质量分析器是质谱仪的核心，它将离子源产生的离子按质荷比（m/z）的不同,在空间位置、时间的先后或轨道的稳定与否进行分离，以得到按质荷比大小顺序排列的质谱图。以四极质量分析器（四极杆滤质器）为质量

17、分析器的质谱仪称为四极杆质谱。它具有重量轻、体积小、造价低的特点，是目前台式气相色谱质谱联用仪中最常用的质量分析器。检测器的作用是将来自质量分析器的离子束进行放大并进行检测，电子倍增检测器是色谱质谱联用仪中最常用的检测器。计算机控制与数据处理系统（工作站）的功能是快速准确地采集和处理数据；监控质谱及色谱各单元的工作状态；对化合物进行自动的定性定量分析；按用户要求自动生成分析报告。 标准质谱图是在标准电离条件70eV电子束轰击已知纯有机化合物得到的质谱图。在气相色谱质谱联用仪中，进行组分定性的常用方法是标准谱库检索。即利用计算机将待分析组分（纯化合物）的质谱图与计算机内保存的已知化合物的标准质谱

18、图按一定程序进行比较，将匹配度（相似度）最高的若干个化合物的名称、分子量、分子式、识别代号及匹配率等数据列出供用户参考。值得注意的是，匹配率最高的并不一定是最终确定的分析结果。目前比较常用的通用质谱谱库包括美国国家科学技术研究所的NIST库、NIST/EPA（美国环保局）/NIH（美国卫生研究院）库和Wiley库，这些谱库收录的标准质谱图均在10万张以上。A. 气相色谱的安装调试操作步骤1) 取出记录本登记使用者和开始时间。2) 打开净化器上的载气开关阀，然后检查是否漏气，保证气密性良好。3) 调节总流量为适当值（根据刻度的流量表测得）。4) 调节分流阀使分流流量为实验所需的流量（用皂膜流量计

19、在气路系统面板上的SPLIT VENT实际测量），柱流量即为总流量减去分流量。5) 调节尾吹流量控制阀使尾吹流量为适当值，并使尾吹流量与柱流量之和不低于载气总流量。6) 打开净化器的空气、氢气开关阀，调节空气、氢气流量为适当值。7) 根据实验需要设置柱温、进样口温度和FID检测器温度。8) FID检测器温度达到150oC以上，按FIRE键点燃FID检测器火焰。9) 设置FID检测器灵敏度和输出信号衰减。10) 如果基线不在零位，调节调零电位器A使FID输出信号在纪录仪或积分仪零位附近。待所设参数达到设置时，即可进行分析。11) 待所设参数达到设置时，即可进样分析。注意事项1) 详细阅读使用说明

20、由负责人考核后方可独立操作.2) 各种气体流量在摸索出最佳条件后可固定使用.3) 仪器每次使用应详细登记.一色谱仪的安装1对色谱仪分析室的要求（1）分析室周围不得有强磁场，易燃及强腐蚀性气体。（2）室内环境温度应在535度范围内，湿度小于等于85%（相对湿度），且室内应保持空气流通。有条件的厂最好安装空调。（3）准备好能承受整套仪器，宽高适中，便于操作的工作平台。一般工厂以水泥平台较佳（高0.60.8米），平台不能紧靠墙，应离墙0.51.0米，便于接线及检修用。 （4）供仪器使用的动力线路容量应在10KVA左右，而且仪器使用电源应尽可能不与大功率耗电量设备或经常大幅度变化的用电设备公用一条线。

21、电源必须接地良好，一般在潮湿地面（或食盐溶液灌注）钉入长约0.51.0米的铁棒（丝），然后将电源接地点与之相连，总之要求接地电阻小于1欧姆即可。（注：建议电源和外壳都接地，这样效果更好）。2气源准备及净化（1）气源准备 事先准备好需用气体的高压钢瓶（一般大中城市均可购到），庄某一种气体的钢瓶只能装这种气体，每个钢瓶的颜色代表一种气体，不能互换。一般用氮气，氢气，空气这三种气体，每种气体最好准备两个钢瓶，以备用。有的厂使用氢气发生器和空气压缩机也可，但空压机必须无油。凡钢瓶气压下降到12Mpa时，应更换气瓶。一般厂家使用使用以上气体99.99%即可，电子捕获检测器必须使用高纯气源99.999%以

22、上。（2）气源净化 为了出去各种气体中可能含有的水分，灰分和有机气体成分，在气体进入仪器之前应先经过严格净化处理。若全部使用钢瓶气体，有的色谱仪附有净化器，且内已填有5A分子筛，活性炭，硅胶，基本可满足要求。若使用一般氢气发生器，则必须加强对水分的净化处理，故应增大干燥管面积（体积在450立方厘米以上为好，填料用5A分子筛为佳）,并在发生器后接容积较大的储器桶，以减少或克服气源压力波动时对仪器基线的影响。若使用空压机作空气来源，空压机进气口应加强空气过滤，加大净化管体积，在干燥管内应填充一半5A分子筛，一半活性炭。一般国产无油气体压缩机（天津产）可满足需要。3色谱仪成套性检查及安放 仪器开箱后

23、，按资料袋内附件清单，进行逐项清点，并将易损零件的备件予以妥善保存。然后按照仪器的使用说明书上要求，将其放置于工作平台上，并对着接线图和各插头，插座将仪器各部分连接起来，最后连接记录仪和数据处理机。注意各接头不要接错。4外气路的连接（1）减压阀的安装 有的仪器随机带有减压阀，若没有的则要购买。所用的是2只氧气，1只氢气减压阀。将2只氧气减压阀，1只氢气减压阀分别装到氮气，空气和氢气钢瓶上（注意氢气减压阀螺纹是反向的，并在接口处加上所附的O形塑料垫圈，以便密封），旋紧螺帽后，关闭减压阀调节手柄（即旋松），打开钢瓶高压阀，此时减压阀高压表应有指示，关闭高压阀后，其指示压力不应下降，否则有漏，应及时

24、排除（用垫圈或生料带密封），有时高压阀也会漏，要注意。然后旋动调节手柄将余气排掉。（2）外气路连接法 把钢瓶中的气体引入色谱仪中，有的采用不锈钢管（?2×0.5mm），有的采用耐压塑料管（?3×0.5mm）。采用塑料管容易操作，所以一般采用塑料管。若用塑料管，在接头处就要有不锈钢衬管（?2×20mm）和一些密封用的塑料等材料。从钢瓶到仪器的塑料管的长度视需要而定，不宜过长，然后用塑料管把气源和仪器（气体进口）连接起来。（3）外气路的检漏 把主机气路面板上载气，氢气，空气的阀旋钮关闭，然后开启各路钢瓶的高压阀，调节减压阀上低压表输出压力，使载气，空气压力为0.350

25、.6Mpa（约3.56.0kg/cm3）,氢气压力为0.20.35 Mpa。然后关闭高压阀，此时减压阀上低压表指示值不应下降，如下降，则说明连接气路中有漏，应予排除。B、仪器维护一、 保证汽化室密封垫的气密性a、 进样口的硅橡胶垫的寿命与汽化室的温度有关，一般可以用数十次，硅橡胶垫漏气时会引起基线的波动，分析的重现性变差，从而使结果不准。b、 由于进样器穿刺过多，使硅橡胶垫碎屑进入汽化室，如果碎屑过多，高温时会影响基线的稳定，或者形成鬼峰。因此为保证分析的正常进行请经常更换密封垫和经常检查汽化室的气密性。二、 经常清理汽化室或衬管a、 由于长期使用，汽化室和衬管内常聚集大量的高沸点物质，如遇某

26、次分析高沸点物质时就会逸出多余的峰，给分析带影响，因此要经常用有机溶剂清洗汽化室和衬管。b、 汽化室的清洗：卸掉色谱柱，在加热和通气的情况下，由进样口注入无水乙醇或丙酮，反复几次，最后加热通气干燥。三、 气路的经常性检漏a、 一般情况下，在购置新仪器时已经进行过检漏，但是在使用过程中如发现灵敏度降低、保留时间延长、出现波浪状的基线等，则应重新检漏，尤其是氢气气路更应该经常性检漏，以免发生危险。b、 有的控制阀门是用“O”形橡胶圈，由于长期磨损，可能漏气；进样口硅胶垫不经常更换、色谱柱没有接好.都可能漏气。故要经常检漏！四、 热导检测器（TCD）的清洗a、 拆下色谱柱，换上一根空的短的色谱柱，通

27、载气，升高柱温箱和检测室温度至200250度，从进样口注入2ml有机溶剂，重复数次，通气至干燥。b、 清洗时绝对不能通电桥电流。否则会损坏检测器！五、 电子俘获检测器（ECD）的清洗a、 清洗法同热导检测器。b、 清洗有机溶剂不能用电负性的有机溶剂如三氯甲烷、四氯化碳等，可用苯、正已烷等。于250度。c、 对于放射源是Ni63检测器温度在250300之间，而氚钪源温度应不高d、 在清洗ECD时必要时做好个人防护！六、 氢焰检测器（FID）的清洗a、 清洗的目的是为了提高检测器的绝缘程度。b、 污染严重时可卸下收集极、极化极、喷嘴。收集极、极化极可用无水乙醇浸泡擦洗，底座和喷嘴用有机溶剂反复冲洗

28、，通气管路也要彻底清洗，喷嘴口要平整光滑，如有毛刺可用油石或什锦锉、砂纸打磨光滑，再用乙醇反复冲洗，然后用热冷风交替吹干。c、 固定这些电极的绝缘体可在无水乙醇中浸泡1015min ，用绸子或纱布擦拭干净。烘干待安装。d、 装配时要恢复原状，做到俯视喷嘴、极化极、收极集三者同心，侧视极化极与喷嘴口二者处于同一水平。e、 注意：清洗完后，所有的配件禁止用手接触，安装时要戴干净手套，所有的工具用前要清洗干燥。七、 氮磷检测器（NPD）及火焰光度检测器（FPD）的清洗由于上述二检测器与FID结构基本相似，故清洗方法参考FID的清洗。NPD注重铷铢的清洗；而FPD则应注重光窗的清洗，但注意不要将光电管

29、暴露于强光下如何防止FID收集极上的积垢清除收集极积垢，拆洗FID时，常把喷嘴拆断造成了不可挽回的损失。依据FID工作原理，收集极对地为高阻，一般都在107欧姆以上，所以收集极的一般污染或收集极和静电计连接不良，除非在限制灵敏度操作外不会造成严重的噪声。所以当操作FID遇到尖峰噪声（基线毛刺）不提倡首先拆洗FID检测器，而应先寻找其它引起噪声的原因如：1.气流比是否合适; 2.汽化室严重污染; 3.柱流失严重(老化不够); 4.静电放大器不稳定; 5.极化电压不稳定; 6.有关信号连接接触不良; 7.市电不稳定; 8.接地不正确; 9.数据处理机有故障或参数设置不合理; 10.气体纯度欠佳(特

30、别是使用各种气体发生器时); 11.色谱柱连接以后各接头有严重漏气。我们经常看到检测器特别是收集极内沉积的白色粉末壮物质，均是硅酮型固定相流失经FID 中燃烧后生成的二氧化硅所致。为防止二氧化硅在检测器中积聚要注意以下几点：谱柱在连接检测器使用前充分老化。最好应用纯度较高（如色谱级纯）的固定相OV-101；少用纯度差的DC-200。在满足分析对FID灵敏度要求的情况下，尽量选择大一些的空气流量，以便把各种燃烧物排出FID。在确认可能是FID污染引起某种脉冲尖峰干扰噪声后。其清除积垢方法有以下三种供大家参考使用。：注射若干微升氟里昂，燃烧形成氟化氢，氟化氢和二氧化硅反应后形成可挥发性物质。：拆下

31、检测器的有关部分如：收集极，喷嘴，壳体，绝缘体等。在超声波浴中清洗两小时，用蒸馏水漂洗。装入检测器之前，再用丙酮清洗一次。：若相关部分特别是收集极积垢太多时，可以用细颗粒砂纸打磨清洗也是一种好方法。气相色谱仪器故障排除方法（定量重复性差）引起定量不重复的原因是多方面的，一般可以归结为两大类：一类为单纯性灵敏度变化型，即除了定量重复性不合格外，其它指标未发现异常；另一类为伴随性灵敏度变化型，即除灵敏度变化之外还伴随有其它异常现象出现，包括基线不稳定性、峰保留时间变化及产生峰形畸变等异常现象。属于第一类型故障的原因，主要是：进样技术不佳，注射器有堵漏，样品制备不均匀，进样口污染物堆积以及气路存在漏

32、气现象等。属于第二类型故障的原因，主要是：载气流量变化，检测器玷污、过载，柱温变化以及检测器操作条件（如氢气、极化电压、脉冲电压等）发生变化。考虑到各种故障产生可能性的大小以及故障鉴别的方便性，制定出下述检测方案：（1）进样技术检查：进样技术不佳是造成色谱峰不重复的最可能原因。它通常表现为峰高/峰面积忽大忽小，峰高/峰面积大小变化无规则。提高进样重复性的关键，在于始终保持进样操作各个步骤的重复性。这包括取样操作，取样到进样期间的空闲时间，进针快慢及拔出注射器的早晚。通常操作人员在经过较多地进样重复性训练之后，可以达到所需的要求。（2）注射器检查：操作人员进样技术提高后，色谱峰灵敏度仍然无显著改

33、观，需认真检查注射器本身是否有堵塞或泄漏现象。必要时更换一个好的注射器重新进样试验。（3）样品均匀性检查：制备的样品在样品瓶中混合不均匀或每次取样时注射器对样品产生玷污以及样品挥发等都会影响出峰灵敏度的重复性（不能漏过此项检查）。定量不重复由上述三种原因引起的可能性很大，而且都和进样操作密切相关，因此可一起进行检查。只有在上述检查后无异常发现时才转入接下的检查步骤。（4）伴随现象观察：在检查灵敏度情况的同时注意是否有下述异常现象发生，包括基线是否稳定，出峰保留时间是否重复，峰形是否有畸变三种情况，如果出现其中一种，应先按所出现的故障进行排除，再重新进行定量重复性测试。没发现伴随异常现象时，应转

34、入下面的检查步骤。（5）进样口污染及系统漏气检查：关断桥电流（对TCD而言）后，取下进样口隔垫，观察进样口内是否有污染或堆积物，如果有，需进行清除和清洗。清洗完毕装上隔垫后需对气路系统进行试漏：堵住检测器出口，观察转子流量计中的转子应能下降为零，否则说明气路有泄漏。在确信进样口无严重污染及气路无漏气的情况下进行（6）的检查。（6）特种原因检查：对有些检测器而言，某些原因所伴随的故障异常不太明显，易被忽略掉，因此应按照此项进行检查，以便不漏过可能发生故障的因素。a）对FID来说，极化电压较低及氢气流量不稳，有可能导致灵敏度变化而无其它明显异常。对此可首先测试极化电压大小以确定极化电压是否太低，过

35、低的极化电压以及无极化电压都属于故障。正常时极化电压为150300V。如极化电压正常，则应转入放大器的灵敏档观察氢焰基始电流的变动情况，在氢气流不稳定时基流应能呈现出摆动和漂移现象。b）对于任何检测器，样品中的某些组分在检测器中逐渐冷凝并累积，将会影响下一次进样后的灵敏度，情况严重时还会造成气路堵塞。通常的解决方法也是适当提高检测器的温度，以减少或消除样品室的冷凝现象.来源：药物分析网2、测试条件的如何确定气相色谱仪使用气体的纯度和选择原则操作气相色谱仪如何选用不同气体纯度的气源做载气和辅助气体，虽然是一个老的技术问题，但是对于刚刚接触气相色谱仪的用户，目前很难找到有关这方面的综合资料，所以他

36、们总是到处询问究竟选择什么样的气体纯度最好的这类问题。根据每一家用户具体使用的那一类（高，中，抵挡）仪器，选择什么样纯度的气体，确实是一个比较复杂的问题。原则上讲，选择气体纯度时，主要取决于 分析对象；色谱柱中填充物；检测器.我们建议在满足分析要求的前提下，尽可能选用纯度较高的气体。这样不但会提高（保持）仪器的高灵敏度，而且会延长色谱柱，整台仪器（气路控制部件，气体过滤器）的寿命。实践证明，作为中高档仪器，长期使用较低纯度的气体气源，一旦要求分析低浓度的样品时，要想恢复仪器的高灵敏度有时十分困难。对于低档仪器，作常量或半微量分析，选用高纯度的气体，不但增加了运行成本，有时还增加了气路的复杂性，

37、更容易出现漏气或其他的问题而影响仪器的正常操作。另外，为了某些特殊的分析目的要求特意在载气中加入某些“不纯物”，如：分析极性化合物添加适量的水蒸气，操作火焰光度检测器时，为了提高分析硫化物的灵敏度，而添加微量硫。操作氦离子化检测器要氖的含量必须在525ppm，否则会在分析氢，氮和氩气时产生负峰或“W”形峰等。本文就不在此做详细讨论了。 气体纯度低的不良影响根据分析对象，色谱柱的类型，操作仪器的挡次和具体检测器，若使用不合要求的低纯度气体，不良影响有以下几种可能：1. 样品失真或消失：如H2O气使氯硅样品水解；2. 色谱柱失效：H2O，CO2使分子筛柱失去活性，H2O气使聚脂类固定液分解，O2使

38、PEG固定液断链。3. 有时某些气体杂质和固定液相互作用而产生假峰；4. 对柱保留特性的影响：如：H2O对聚乙二醇等亲水性固定液的保留指数会有所增加，载气中氧含量过高时，无论是极性或是非极性固定液柱的保留特性，都会产生变化，使用时间越长影响越大；5. 检测器：TCD：信噪比减小，无法调另，线性变窄，文献中的校正因子不能使用，氧含量过大，使元件在高温时加速老化，减少寿命；FID：特别是在Dt110/秒下操做时，CH4等有机杂质，会使基流激增，噪声加大不能进行微量分析；ECD：载气中的氧和水对检测器的正常工作影响最大，在不同的供电工作方式中，脉冲供电比直流电压供电影响大，固定基流脉冲调制式供电比脉

39、冲供电影响大。这就是为什么目前诸多在操作固定基流脉冲调制式ECD时，在载气纯度低时必须把载气纯度选择开关从“标准氮”拨到“一般氮”位置的原因。大家会发现在此情况下操作，不但灵敏度变低，而且线性亦变窄了。实践证明：在操作ECD时载气中的水含量低于0.02ppm,氧低于1ppm时可达到较理想的性能.值得指出的是,我们多次发现由于仪器的调节气路系统被污染而造成的对载气的二次污染至使ECD基频大幅度增加使信燥比减小.FPD NPD等常用检测器,由于他们属于选择性检测器,操做时要根据分析要求,特别注意被测敏感物质中杂质的去除.6、在做程序升温操作时,载气中的某些杂质,在低温时保留在色谱柱中,当柱温升高时

40、不但引起基线漂移,还可能在谱图上出现比较宽的"假峰"。7、仪器影响a. 各类过滤器加速失效;b. 调节阀(稳压阀,稳流阀,针形阀)被污染,气阻堵塞,调节精度降低或失灵；c. 气路系统被污染,若要恢复仪器在高灵敏度情况下操做,有时要吹洗很长时间(可能一周以上)污染严重时有时再也无法恢复。d. 检测器的寿命实践表明,对ECD和TCD的寿命最明显，这点应引起用户特别注意。对气体纯度选择的一般原则1. 从分析角度讲,微量分析比常量分析要求高,也就是说,气体中的杂质含量必须低于被分析组分的含量,如果用TCD分析10ppm的CO,则载气中的杂质总含量不得超过10ppm,因为99.999

41、%纯度的气体则含0.001%的杂质,相当于10ppm所以对于10ppm的痕量分析,载气的纯度应高于99.999%;对于FID使用气体,碳氢化合物含量必须很低,载气中的大量氧杂质只要不对色谱柱造成影响,就不影响FID的性能,而操作ECD，载气中的氧气和水的含量必须很低等.2. 毛细管柱分析比填充柱分析要求高;3. 程序升温分析比恒定温度分析要求高;4. 浓度型检测器比质量型检测器要求高;5. 配有甲烷装置的FID比单FID操作的对载气中的微量CO,CO2要求要高的多.6. 从仪器寿命和保持仪器的高灵敏度讲,中高档仪器比低当仪器要求高。操作不同检测器推荐使用的气体纯度我们推荐气体纯度的技术要求,通

42、常用于常规分析,对于特殊高灵敏度的痕量分析应采用高一级纯度的气体,如果不在意色谱柱和仪器的使用寿命,或分析样品组分浓度很高时,也可以不使用过高纯度的气体,由于各个制气厂设置不同，其杂质含量将有所不同;为满足不同的使用要求,选用不同厂家不同纯度的气源后,可以通过气体净化处理满足分析要求,对于不同杂质的气体采用何种净化方法和装置有机会在加以讨论.综上所述,新气相色谱仪接入气源时一定要做到心中有数,决不能随意接入,否则会造成ECD,甲烷化装置等的损坏,信噪比减小的无法使用,下表给出了用于常规分析时,推荐使用的气体纯度气象色谱时,气体纯度的选择:1.从分析角度讲,微量分析比常量分析要求高,也就是说,气

43、体中的杂质含量必须低于被分析组分的含量,如果用TCD分析10ppm的CO,则载气中的杂质总含量不得超过10ppm,因为99.999%纯度的气体则含0.001%的杂质,相当于10ppm所以对于10ppm的痕量分析,载气的纯度应高于99.999%;对于FID使用气体,碳氢化合物含量必须很低,载气中的大量氧杂质只要不对色谱柱造成影响,就不影响FID的性能,而操作ECD，载气中的氧气和水的含量必须很低等.2. 毛细管柱分析比填充柱分析要求高;3. 程序升温分析比恒定温度分析要求高;4. 浓度型检测器比质量型检测器要求高;5. 配有甲烷装置的FID比单FID操作的对载气中的微量CO,CO2要求要高的多.

44、6. 从仪器寿命和保持仪器的高灵敏度讲,中高档仪器比低当仪器要求高。气相色谱柱长,口径的选择:1.柱长的选择：由于分辨率与柱长的平方根成正比。柱子长，则提高分辨率。15m的短柱用于快速分离较简单的样品，也适于 快速成分扫描分析；30m的色谱柱是最常用的柱长，大多数分析在此长度的柱子上完成；50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。2.口径的选择：柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效，但柱容量更小。0.25mm：具有较高的柱效，柱容量较低。分离复杂样品较好。0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色谱柱，但柱容量约高60%。0.53mm：具有类似于填充

45、柱的柱容量，可用于分流进样，也可用于不分流进样，当柱容量是主要考虑因素时（如痕量分析），选择大口径毛细管柱较为合适。 专家认为，对于普通用户，可选30米或50米长的毛细管，口径选0.32mm较为便利。相色谱分离操作时载气种类及流速的选择 1.对于确定的色谱柱和试样，有一个最佳的载气流速，此时柱效最高，根据公式：H AB/UC用在不同流速下测得的塔板高度H对流速u作图，得H-u曲线图。在曲线的最低点，塔板高度H最小（H最小）。此时柱效最高。2.对于填充柱，N2的最佳实用线速为1012cm/s；H2为1520cm/s。通常载气的流速习惯上用柱前的体积流速（mL/s）来表示，用转子流量计测量；也可通

46、过皂膜流量计在柱后进行测定。若色谱柱内径为3mm,N2的流速一般为4060L/min，H2的流速为60-90mL/min。气相色谱分离操作条件的选择气相色谱条件主要受载气种类、流速、柱温、汽化温度、柱长、柱内径、进样时间和进样量等因素影响。根据范第姆特方程，流速是影响塔板高度的重要因素，通常选择稍高于最佳流速的载气流速；载气流速大时，应选择相对分子量小，扩散系数大的H2，Ne等作载气，反之选择相对分子量大，扩散系数小的N2，Ar等作载气；提高柱温可以提高传质速率，提高柱效，但柱温过高又会使组分间分离度减小。采用较低的柱温，减少固定相的用量和适当增加载气的流速，可在短时间内获得良好的分离效果；汽

47、化温度应以能使试样迅速汽化而不产生分解为准，通常比柱温高20-70，柱温应比试样中各组分的平均沸点低20-30, 对于沸点范围较宽的试样，宜采用程序升温；增加柱长会提高分离度，但分析时间增长，因此，一般在满足一定分离度的条件下尽可能用短柱子；进样应在1秒以内完成，以减小峰变宽；最大允许的进样量应该控制在使峰面积或峰高与进样量呈线性关系的范围内。气相色谱分离操作时柱温的选择 柱温是一个重要的操作参数，直接影响分离效能和分析速度。首先要考虑到每种固定液都有一定的使用温度。柱温不能高于固定液的最高使用温度，否则固定液挥发流失。柱温对组分分离的影响较大，（1）提高柱温使各组分的挥发靠拢，不利于分离，

48、所以，从分离的角度考虑，宜采用较低的柱温。（2）柱温太低，被测组分在两相中的扩散速率大为减少，分配不能迅速达到平衡，峰形变宽，柱效也会下降，并会延长分析时间。 柱温的选择原则是：应使难分离的两组分达到预期的分离效果，峰形正常的前提下，尽可能采用较高的柱温。一般柱温应比试样中各组分的平均沸点低2030，具体的选择可通过试验决定。3、具体物质的分析方法气相色谱定性与定量分析方法 各种色谱分析方法的定性与定量分析的基本方法都是一样的。色谱定性分析1. 保留时间定性2. 利用不同检测方法定性3. 保留指数定性4. 柱前或柱后化学反应定性5. 与其他仪器联用定性1. 保留时间定性在一定的色谱系统和操作条

49、件下，每种物质都有一定的保留时间，如果在相同色谱条件下，未知物的保留时间与标准物质相同，则可初步认为它们为同一物质。为了提高定性分析的可靠性，还可进一步改变色谱条件（分离柱、流动相、柱温等）或在样品中添加标准物质，如果被测物的保留时间仍然与标准物质一致，则可认为它们为同一物质。2. 利用不同检测方法定性同一样品可以采用多种检测方法检测，如果待测组分和标准物在不同的检测器上有相同的响应行为，则可初步判断两者是同一种物质。在液相色谱中，还可通过二极管阵列检测器比较两个峰的紫外或可见光谱图。3. 保留指数定性在气相色谱中，可以利用文献中的保留指数数据定性。保留指数随温度的变化率还可用来判断化合物的类

50、型，因为不同类型化合物的保留指数随温度的变化率不同。4. 柱前或柱后化学反应定性在色谱柱后装T型分流器，将分离后的组分导入官能团试剂反应管，利用官能团的特征反应定性。也可在进样前将被分离化合物与某些特殊反应试剂反应生成新的衍生物，于是，该化合物在色谱图上的出峰位置或峰的大小就会发生变化甚至不被检测。由此得到被测化合物的结构信息。5. 与其他仪器联用定性将具有定性能力的分析仪器如质谱（MS）、红外（IR）、原子吸收光谱（AAS）、原子发射光谱（AES，ICP-AES）等仪器作为色谱仪的检测器即可获得比较准确的定性信息。定量分析色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积（或峰高）成正比

51、。数据处理软件（工作站）可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常情况是采用峰面积进行定量分析。1. 校正因子定量2. 归一化法3. 外标法4. 内标法5. 标准加入法1. 校正因子定量绝对校正因子 ：单位峰面积所对应的被测物质的浓度（或质量），即样品组分的峰面积与相同条件下该组分标准物质的校正因子相乘，即可得到被测组分的浓度。绝对校正因子受实验条件的影响，定量分析时必须与实际样品在相同条件下测定标准物质的校正因子。相对校正因子 :某物质i与一选择的标准物质S的绝对校正因子之比。即 相对校正因子只与

52、检测器类型有关，而与色谱条件无关。2. 归一化法归一化法是将所有组分的峰面积 分别乘以它们的相对校正因子后求和，即所谓"归一"，被测组分X的含量可以用下式求得：采用归一化法进行定量分析的前提条件是样品中所有成分都要能从色谱柱上洗脱下来，并能被检测器检测。归一法主要在气相色谱中应用。3. 外标法直接比较法： 将未知样品中某一物质的峰面积与该物质的标准品的峰面积直接比较进行定量。通常要求标准品的浓度与被测组分浓度接近，以减小定量误差。标准曲线法： 将被测组分的标准物质配制成不同浓度的标准溶液，经色谱分析后制作一条标准曲线，即物质浓度与其峰面积（或峰高）的关系曲线。根据样品中待测

53、组分的色谱峰面积（或峰高），从标准曲线上查得相应的浓度。标准曲线的斜率与物质的性质和检测器的特性相关，相当于待测组分的校正因子。 4. 内标法内标法是将已知浓度的标准物质（内标物）加入到未知样品中去，然后比较内标物和被测组分的峰面积，从而确定被测组分的浓度。由于内标物和被测组分处在同一基体中，因此可以消除基体带来的干扰。而且当仪器参数和洗脱条件发生非人为的变化时，内标物和样品组分都会受到同样影响，这样消除了系统误差。当对样品的情况不了解、样品的基体很复杂或不需要测定样品中所有组分时，采用这种方法比较合适。内标物应满足的要求： 在所给定的色谱条件下具有一定的化学稳定性； 在接近所测定物质的保留时

54、间内洗脱下来； 与两个相邻峰达到基线分离； 物质特有的校正因子应为已知的或者可测定； 与待测组分有相近的浓度和类似的保留行为； 具有较高的纯度。为了进行大批样品的分析，有时需建立校正曲线。具体操作方法是用待测组分的纯物质配制成不同浓度的标准溶液，然后在等体积的这些标准溶液中分别加入浓度相同的内标物,混合后进行色谱分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积（或峰高）的比率为纵坐标建立标准曲线（或线性方程）。在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时同样体积的样品溶液和同样浓度的内标物，用样品与内标物峰面积（或峰高）的比值，在标准曲线上查出被测组分的浓度或用线形方程计算。 5. 标准加

55、入法标准加入法可以看作是内标法和外标法的结合。具体操作是取等量样品若干份，加入不同浓度的待测组分的标准溶液进行色谱分析，以加入的标准溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制如图7-24所示的工作曲线。样品中待测组分的浓度 即为工作曲线在横坐标延长线上的交点到坐标原点的距离。由于待测组分以及加入的标准溶液处在相同的样品基体中，因此，这种方法可以消除基体干扰。但是，由于对每一个样品都要配制三个以上的、含样品溶液和标准溶液的混合溶液，因此，这种方法不适于大批样品的分析。其他色谱相关HP-5890A气相色谱仪操作规程一、开机1、首先打开氮气钢瓶总阀门、调节减压阀压力为0.50.6Mpa2、打开HP589

56、0A的电源开关，当屏幕上显示出Passed Selftes后，即可设测试参数，设定柱温时，一定要注意柱子的最高使用温度。3、当温度达到设定温度时，打开空气压缩机开关，氢气钢瓶阀门调节氢气分压表为0.30.4Mpa。再打开仪器面板上空气、氢气开关，用点火器点火，稳定大约30min后，待HP-5890面板上Not-Ready灯熄灭后，即可测定。4、数据处理机HP-3392内容的设定，最小峰面积一般200。去掉倒信号：InT01 8 Time 0 纸速：一般设CHT SP 0.20.3二、测试条件的设定：色谱条件的设定要根据不同化合物的不同性质选择柱子，一般情况极性化合物选则极性柱。非极性化合物选择非极性柱。色谱柱柱温的确定主要由样品的复杂程度决定。对于混合物一般采用程序升温法。柱温的设定要同时兼顾高低沸点或溶点化合物。以下提供几种方法，仅供参考。1、柱温 6080 恒温5min 升温速率1015/min 最终温度 200进口温度 200 检测温度 2202、柱温 100160 速率不变 最终温度230进样口温度 250 检测器温度 2503、对于