610苦榆顺达灌肠液的质量标准研究

1、苦榆顺达灌肠液的质量标准研究王淑君1，刘卫红 2，张晓坚1，张国伟3（1、郑州大学第一附属医院，河南，郑州450052；2、河南中医学院第一附属医院，河南，郑州450003；3、泉州市第一人民医院，福建，泉州362000）摘要：目的 制定苦榆顺达灌肠液的制备方法及质量标准。方法 采用薄层色谱法作苦参、蛇床子的定性鉴别；采用高效液相色谱法测定灌肠液中没食子酸的含量。结果 制剂稳定，质量控制方法可行，没食子酸进样量在0.07220.3612 g浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0.9997，方法平均回收率为97.8%,（RSD=1.03%）。结论 该灌肠液制备工艺可行，质量控制方法简便

2、、准确。关键词：苦榆顺达灌肠液；制备工艺；质量控制Preparation and Quality control of Kuyushunda EnemaWANG Shujun1，LIU Weihong2，ZHANG Xiaojian1，ZHANG Guowei3(1.Department of Pharmary， the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University ，Zhengzhou450052 ，China；2.The Central Laboratory， the First Affiliated Hospital of Henan

3、 college of TCM ，Zhengzhou450003 ，China；3.Quanzhou first People，s Hospital，Fujian Quanzhou 362000，China)Abstract ： OBJECTIVE：To establish the preparation and quality control methods of Kuyushunda Enema .Methods: Radix Sophorae Flavescentis and Radix Sanguisorbae were identified by TLC and to determi

4、ne the content of Gallic acid by HPLC. Results: The preparation was stable and the methods was feasible in quality control ， The calibration curve of Gallic acid was a good linear relation within the range of 0.07220.3612µ (r=0.9997) .the average recoveries was 97.8% (RSD=1.03%） .Conclusion:The

5、 method were convenient，accurate and could be used for preparation and quatity control of Kuyushunda Enema .Key Words：Kuyushunda EnemaL；TLC；HPLC；Preparation ；Quality control 苦榆顺达灌肠液是苦参、生地榆、蛇床子、败酱草、薏苡仁等药物经适宜工艺制成的澄清液体灌肠剂，具清热利湿、化瘀解毒作用，经临床证明，对湿热毒邪蕴结之大肠癌有显著的治疗作用，现就质量控制报道如下：1 仪器与试药 日本岛津LC-10AT型高效液相色谱仪，SPD

6、-10A型紫外检测器。电子天平（Sartorius 德国）；超声提取器（KQ-5200DB，昆山超声仪器有限公司）；PBQI型薄层自动铺板仪（重庆南岸新力实验电器厂）；pHS-3C精密pH计（上海雷磁）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；苦参碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0805200203）；蛇床子对照药材（中国药品生物制品检定所，批号：10309902）；没食子酸对照品，由中国药品生物制品检定所提供，批号：110784200202；甲醇，色谱纯；水，超纯水；其余试剂均为分析纯。苦榆顺达灌肠液，由本院制剂室提供（批号分别为051102、051108、051109）；缺味阴性对照：按处方分别

7、配成相应的缺味处方药，模拟制剂工艺，加相应辅料制备。 2 质量控制2. 1 性状 本品为红棕色澄明液体，味苦、涩。2. 2 理化鉴别 取本品20 mL，水浴浓缩至稠膏状，加乙醇20 mL，加热回流20 min，滤过，滤液滴加氨试液调节pH至89，静置，过滤，取沉淀物少量，加水2 mL使溶解，加1% FeCl3 试液3滴，溶液呈兰黑色沉淀。2. 3 薄层鉴别2. 3. 1 苦参 取本品5mL，加氨试液3 mL，加水15 mL，混匀，加氯仿振摇提取3 次，每次15 mL，分取氯仿液，合并蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取苦参碱对照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为

8、对照品溶液。照薄层色谱法1试验，吸取上述两种溶液各5 µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-乙醇浓氨水（5：1：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色斑点，图1为经等高线处理的薄层色谱图1。2. 3. 2 蛇床子 取鉴别（1）项下的供试品溶液作为供试品溶液；取蛇床子对照药材1 g，加氯仿10 mL，浸渍过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法1试验，吸取上述两种溶液各5µL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（3060）-醋酸乙酯-甲酸（15：5：2）为展

9、开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点，图2为经等高线处理的薄层色谱图1。2. 4 含量测定2、3 色谱条件 色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6mm×150 mm，5m）；流动相：甲醇-0.1%磷酸（8：92）；流速：0.8mL/min；检测波长：273 nm；柱温：室温。 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照品0.903 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL含没食子酸0.03612mg）。 供试品溶液的制备 精密量取本品

10、5 mL，置具塞50 mL锥形瓶中，精密加入甲醇至刻度，密塞，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液，即得。 阴性对照液制备 阴性对照品溶液的制备，按处方比例及制法制备缺地榆的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法同法制成阴性对照溶液。 线性关系的考察 精密吸取上述对照品溶液2、4、6、8、10L进样，并以进样量（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y =3614.182X +39.570，r=0.9997。表明没食子酸在0.07220.3612 g的范围内与其色谱峰面积积分值呈良好的性线关系。 精密度试验 分别精密吸取上述0.03612 mg/mL的没食子酸对照品溶液，在相

11、同的色谱条件下连续进样6次，进样量5L，测得其峰面积积分值基本一致，RSD=0.82%（n=6）。表明精密度良好。 重复性试验 取同一批样品（批号：051102）6份，精密称定，按“供试品溶液制备”项下方法操作，平行制备6份样品，在上述色谱条件下进行分析测定，结果没食子酸的平均含量为0.042%， RSD为1.02%（n=6）。结果表明该方法重现性较好。 稳定性试验 取同一份供试品溶液，室温下静置，分别于0，2，4，8，12h，按上述色谱条件测定，结果五次测得的没食子酸峰面积的RSD为1.1%，表明供试品溶液在12h内,稳定性良好。 回收率试验 取含量为0.041% 的样品6 份，精密量取2.

12、5 mL并分别精密添加浓度为每1mL含0.565 mg的没食子酸对照品溶液2 mL，按供试品的制备与测定方法在上述色谱条件下进行含量测定，测得平均回收率为98.44%,RSD为0.98%（n =6）。结果见表1表1 回收率实验结果(n =6)Table 1 Result of recovery test( n =6)序号取样量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)11.0251.1302.12597.321.0251.1302.14198.831.0251.1302.12096.997.81.0341.0251.1302.13598.251.0251.13

13、02.14599.161.0251.1302.11896.7 样品的测定 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5L,注入液相色谱仪,测定3 个批号样品,测定结果分别为0.042%、0.044%、0.041%。3 结果与讨论31 处方组成为苦参200g，生地榆200g，蛇床子150g，薏苡仁300 g，吐温-80、甲壳素、明胶等适量。32 预试时做处方中药物的配伍及苦参与生地榆、蛇床子的沉淀物在人工肠液中的溶解性试验，结果可知：苦参不宜与其他药物共煎，制备中沉淀剂甲壳素、明胶的使用可除去大分子可溶性鞣质，之后再次醇沉较顺利地解决了细小沉淀的祛除问题，并且稳定性大为提高，制剂在一年内澄明度合格。有

14、关本制剂稳定性研究，有待今后进一步讨论。33 经筛选试验结果吐温-80 以0.5% 做溶剂最佳。34 因苦参中所含苦参碱、氧化苦参碱及蛇床子所含蛇床子素均不稳定，以此为指标制定含量测定方法稳定性较差，故选择地榆中没食子酸做为含量测定指标。参考文献1 陈忠东，雷颂.多功能薄层层析用紫外检测灯的制作及薄层图谱处理J。中国药业，2007，16（8）：35.2 郑文媛，刘法锦.地榆配方颗粒质量标准研究J .中华医学研究杂志，2006，6（7）：737738.3.王汉平，杨志灵，蒋军.高效液相色谱法测定蝎子七中没食子酸的含量J.中国药房，2005,16（10）：780781. 图 1 苦参的薄层色谱图1、阴性对照品 2、苦参碱对照品 3、供试品 Fig 1 TLC chrom