XXXX年careHPV产品培训

1、Sample & Assay Technologies12013年年careHPV 产品培训产品培训 Sample & Assay Technologies2HPV与子宫颈癌HPV致癌过程致癌过程2008年诺贝尔医学奖获得者：楚尔年诺贝尔医学奖获得者：楚尔.豪森豪森Sample & Assay Technologies3确定疾病疾病病理预防疾病子宫颈癌的预防史组织细胞分子2003年1925年1942年1996年2001年2006年2012年一级预防二级预防三级预防宫颈癌阴道镜PAPLBCTBSHC2careHPVGardasilHPVCervarixSample &am

2、p; Assay Technologies4阴道镜+组织活检1925年德国学者HansHinselman发明了阴道镜（colposcope）Sample & Assay Technologies5阴道镜+组织活检CT=结缔组织 BM=基底膜L1=基底细胞（1层）L2= 副基底细胞（2层）L3=中间层细胞（约8层）L4=表层细胞（约5至6层）L5=脱落的表层鳞状细胞 ）正常宫颈上皮结构Sample & Assay Technologies6阴道镜+组织活检CIN 宫颈上皮内瘤变（ Cervical intraepithelial neoplasia ）CIN1：上皮层的下1/3细

3、胞成熟紊乱，伴细胞核异型。CIN2伴挖空细胞变化：上皮层下1/2的结构紊乱并出现符合恶性和病毒感染的细胞学标准。CIN3：几乎全层的上皮细胞结构紊乱，细胞和胞核显著异型，可见典型和不典型核分裂。正常宫颈上皮 宫颈管（A=宫颈外口，B=宫颈峡部，C=宫颈腺体的分布区域）Sample & Assay Technologies7阴道镜+组织活检 根据Hamperl的分类：I=CIN2，II=原位癌累及腺体，III=早期间质浸润，IV=微小浸润癌， IV a= 明显间质浸润，IVb= 明显向外生长的肿块(见 TNM 和 FIGO分类)。.微浸润性鳞状细胞癌癌前病变的演变和癌Sample &am

4、p; Assay Technologies8细胞学（CTOLOGY）- PAP（巴氏涂片）巴氏涂片（PAP SMEAR）于1943年Papanikolaou发表文献报道巴氏分级巴氏分级巴氏I级正常涂片中没有不正常细胞。巴氏级炎症炎症引起的细胞异形改变。巴氏级核异质细胞变化严重，可能由炎症或肿瘤引起，但不能肯定，需进一步随诊检查确诊。巴氏级可疑癌高度怀疑是宫颈癌。巴氏级癌确定是宫颈癌。Georgios Papanikolaou (1883-1962) Sample & Assay Technologies9细胞学（CTOLOGY）- PAP（巴氏涂片）巴氏涂片巴氏涂片法的特点：巴氏涂片法

5、的特点：n厚度不均，细胞重叠多，背景不干净n假阴性率高，检测结果可信度低液基细胞液基细胞学的特点：液基细胞学的特点：n薄层涂片，结构清晰，背景干净。n提高了阳性检测率，减少了漏诊。Sample & Assay Technologies10细胞学（CTOLOGY）- LBC（液基细胞学）LBC（液基细胞学）-ThinPrep （HOLOGIC）、SurePath（BD）SurePath cytology collection systemThinPrep cytology collection systemSurePath梯度离心细胞富集技术ThinPrep膜吸附技术Sample &am

6、p; Assay Technologies11细胞学（CTOLOGY）- TBS（The Bethesda System）2001 TBS（上皮细胞异常（上皮细胞异常 ）-鳞状细胞鳞状细胞 * 非典型鳞状细胞（ASC） - 意义不明(ASC-US) - 不除外上皮内高度病变(ASC-H) * 鳞状上皮内低度病变（LSIL）* 鳞状上皮内高度病变（HSIL） * 鳞状细胞癌-腺细胞腺细胞 * 非典型（AGC） * 颈管原位腺癌（AIS） * 腺癌Sample & Assay Technologies12ASC-US：非典型鳞状细胞：非典型鳞状细胞-意义不明确意义不明确Sample &am

7、p; Assay Technologies13鳞状上皮低度病变（鳞状上皮低度病变（LISL）Sample & Assay Technologies14鳞状上皮高度病变（鳞状上皮高度病变（HISL）Sample & Assay Technologies15Marie-Helene Mayrand, M.D.,2007Sample & Assay Technologies16细胞学技术流程Sample & Assay Technologies17尽管细胞学筛查的广泛应用，但腺癌的死亡率却在增加美国子宫颈腺细胞癌的发生增加Age-adjusted rates per

8、100,000 women in the US0123456789101973197719781982198319871988199219931996鳞鳞癌癌腺癌腺癌A=宫颈外口B=宫颈峡部C=宫颈腺体的分布区域Sample & Assay Technologies18digene HC2- Hybrid Capture 2杂交捕获第二代技术HC2 在分子水平上检测在分子水平上检测WHO认定的认定的13种高危型种高危型HPV病毒病毒（当前（当前HPV检测的金标准）检测的金标准）1、DNA变性2、全长RNA鸡尾酒探针杂交3、抗体捕获4、二抗结合5、信号检测HC2 检测原理检测原理Samp

9、le & Assay Technologies19Marie-Helene Mayrand, M.D.,2007Sample & Assay Technologies20宫颈癌筛查方法敏感性比较Sample & Assay Technologies21Sample & Assay Technologies22HC2 HPV检测作为宫颈癌的初筛手段：中国汇总分析检测作为宫颈癌的初筛手段：中国汇总分析高危型高危型HPV DNA检测可作为宫颈癌初检测可作为宫颈癌初筛方法的有效性研究筛方法的有效性研究中国以人群为中国以人群为基础的基础的17个筛查研究综合分析个筛查研究综

10、合分析Sample & Assay Technologies23CIN2+平均敏感性平均敏感性96.3%CIN3+平均敏感性平均敏感性97.5%HC2 HPV检测作为宫颈癌的初筛手段：中国汇总分析检测作为宫颈癌的初筛手段：中国汇总分析Sample & Assay Technologies24确定疾病疾病病理预防疾病组织细胞分子2003年1925年1942年1996年2001年2008年2012年一级预防二级预防三级预防宫颈癌阴道镜PAPLBCTBSHC2ASCUS分流（FDA 1999）GardasilHPVCervarixHC230岁以上妇女联合细胞学筛查（FDA 2003）

11、HC225-64岁妇女宫颈癌初筛（EUROGIN）Sample & Assay Technologies25子宫颈癌筛查方案Sample & Assay Technologies26发展中国家子宫颈癌发病数量占全球总数的85%子宫颈癌筛查面临的现状69.2 69.17.745.3发达国家发达国家发展中国家发展中国家乳腺癌宫颈癌IARC, Globacan 2008Sample & Assay Technologies27宫颈癌筛查的挑战宫颈癌筛查的挑战TextTextTextTextTextText水电专有实验室冷藏运输条件专业技术人员医疗条件Sample &

12、Assay Technologies28careHPV的诞生背景比尔&梅琳达盖茨基金出资成立国际宫颈癌防治联盟（ACCP）帕斯（美国适宜卫生科技组织）在ACCP的经验基础上启动START项目PATH与QIAGEN共同协作下完成了careHPV快速检测系统可靠性验证careHPVSTART-UP1999年2003年2008年Sample & Assay Technologies29乔友林 教授 首位获得IARC奖章的中国科学家Sample & Assay Technologies30比尔.盖茨夫妇参观凯杰公司和care HPV检测现场演示Sample & Assa

13、y Technologies31careHPV 产品组成振荡器振荡器 基因杂交信号扩大仪基因杂交信号扩大仪磁性板架磁性板架控制器控制器care宫颈刷宫颈刷 & 宫颈细胞保存液宫颈细胞保存液1ml/管，50管/盒，15-30 保存24个月 careHPV试剂盒：试剂盒：96测试/盒，4-25 可保存可保存12个月个月Sample & Assay Technologies32 简便、准确、高效简便、准确、高效试剂颜色编码操作数字编码简单易学即可用交流电供电，也可用蓄电池供电，2.5小时出检测结果实现即时检测，及时追踪careHPV是一套完整的检测系统，实验在15-40度环境下都可进

14、行,无需专用实验室试剂低温冷冻成干粉可在常温下运输试剂盒自带洗液不需额外准备Sample & Assay Technologies33careHPV 检测原理（HC2 + 磁珠捕获法）Sample & Assay Technologies34careHPV 临床验证数据35，000人份全球开展careHPV 临床验证研究的分布区域Sample & Assay Technologies35careHPV 临床验证数据35，000人份HPVToday 2791.5%95.8%Sample & Assay Technologies36careHPV 最简便、可靠的子宫

15、颈癌筛查方法Sample & Assay Technologies37careHPV vs PapcareHPV细胞学从分子生物学层面进行检测：针对HPV潜伏期、感染期、亚临床期、临床症状期、癌症相关期均可。可预测疾病风险。从形态学层面进行检测：只针对临床症状期、癌症相关期，不可预测风险，只能描述当前情况。临床敏感度达90%，客观的检测方法，不受人为因素的影响，准确可靠，漏诊率低 临床敏感度50%-70%，专家水平也只有85%左右，主观的检测方法，无法避免人为因素的干扰，结果有一定的可疑性漏诊率高一次检测结果阴性可在3-5年再常规筛查。必须每年筛查一次对人员要求低，简单培训即可操作，机

16、器判读，对专业知识要求低对人员要求高，必须经过专业培训，人工判读，必须要有较好的专业知识2.5小时可出结果，实现即时检测及时追踪难以实现当天出结果，报告周期长Sample & Assay Technologies38careHPV vs PCRcareHPVPCR全长探针，全长探针，87.8-95.8% L1片段为引物，缺失而漏诊，片段为引物，缺失而漏诊，83%左右左右无需无需DNA纯化纯化酶促反应，为避免酶被抑制，需要酶促反应，为避免酶被抑制，需要DNA纯化纯化实验室条件要求低实验室条件要求低专门的专门的PCR实验室（通过临检中心认证）实验室（通过临检中心认证）实验操作占地面积小，实验操作占地面积小，140cm宽宽 x 64cm深深 x 64cm高。高。实验占地面积大，三个独立的实验区域最少需