曲霉和青霉的形态观察

1、霉菌的形态观察实验目的学闰笄掌握观察霉菌形态的根本方法：了解常见霉菌根聶 毛埶 曲臨 青略 红曲霉、白地霉的根本形态特征G实验材料曲曲Rhizopus sp人毛霉Mucor sp.> 曲.Aspergillus sp, Penicilliiunsp> 红曲IMoiuisciis sp.的平板培养物.白地霉GeotrichHmEundhhmQ摇瓶培养 鼠.“，.焙养热 圭豆琼脂括养基第PDA?.或祭氐培养基包 溶液或试剂訐乳酸石炭酸棉蓝窠色漱其他，无菌吸鼠平血载玻片.盖玻片.解剖針显微镜馨&实验原理擀菌菌丝比拟粗大?菌丝和砲子的直径到达3“Oum药通常是细菌菌体宽度的几倍至

2、几十薪 阖而理用畑 圖做锻亂 蠶曲逢细胞容创I缩娅 范予容JH攝 斟幡 霉菌标本时厂常用乳酸石炭酸溶液作为介质总具有不使细胞变形挛可杀菌防腐,不易枯燥， 能保持较长时间等优点匙假设参加棉蓝，又具有定的染色效果.霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏，影响观察，可釆用载片培养洙此法便于直接 崔显微镜不观察，尤慕适用于根霉的假根秒曲逼的足细胞及分生抱子链等结构的着生和生长 情况的观察。并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形瓠四操作步骤 _般观察法乙1.点种培养：用接种针右取斜面少许抱子袒无菌的察氏赠淞中央穿剌接种i倒置培养皿 穿剌接种匸Me下塔养7“o免 形成巨大菌論养物°2直

3、接制片？在载玻炜中央加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液于洁净，翻开霉菌平板培养物， 用解剖针从菌落的边缘挑取少量带有抱子的菌縫，放入载玻芹的染液中，细心地把菌线 挑散开'加盖玻片注盘不要脊生气泡,.置手显微镜下观蔡,菌婭呈兰色，颜色的深度 随苗龄的增加而减翡&观察根霉臨注意观察其菌丝有无横隔、假根、抱子囊柄丫鞄子囊"囊轴丫囊托丫 .抱子巍鞄子及厚垣泡子負观察毛霉时复注意观察基菌绘无横隔抱壬囊柄，囊轴9抱子囊抱子及后垣蹲子令 观察曲霉时注意观察其菌絃有横隔.足细胞、分生抱子梗、顶囊总小梗形状、:. 层数及着生情况 分生抱子爭观察青鹭时注憲观察其菌慈有横隔.分生电子梗、帚状枝小梗

4、的轮数及对称性人观察红曲霉时社囂观察其菌丝有横隔岁俞生孑包子着生情况，闭奏蔻 子囊抱子乞 ?二?戴玻片湿室培静观察法.也称载片塔养海用无菌操作将壇养基琼脂薄层置于载玻片匕接种后盖上盖藝片培养. 靂菌即在载玻片和讓玻片之间的有限空间内浴盖玻片横向生握培兼L壷时间后，将载玻片 上的躊养物置于显微镜下观察8载片培移法制备的标本片可直接在显微镜卞观察，这种培养 观察方法保持了霉菌的自然生长状态，尤其适用于根畫的假根十匍匐菌终曲签的足细胞的 观察.并且还可在同一标本片上观察霉菌的不同生长阶段的形态e2.2.3.4.III-jr/rrr sifhi载玻片湿室培养观蔡法具体操作；1,准备湿室?在培养皿底部铺

5、一张圆形滤纸片色滤纵片上依次放上形载玻片搁 架、载玻职 盖玻片两泮人盖上皿盖*:外用纸包扎,.高压灭菌OXltHPa 迦分钟剧60烘箱干顒备用电Z 取菌接种:用接种环挑取少最待观察的霉菌抱子.置于湿室的载玻斤上每张载玻 片可接同一菌种的抱子两处:接种命貝要将带菌的接种环在栽玻片上轻轻碰几卞即 碧 ° 了. . 接种量要少，以免培养后菌幽:于稠密而影响观察3. 加曙需基，用无菌细口滴管吸取少许融化并冷却至45它的塔养基，滴加到载玻片 的接种处八焙养基应滴得圆而薄，直轻约为05cm 滴加量一般以1/2小简为宜人4. ：.加盖玻出 在培养基未彻底凝固前,、用无菌银子将皿内的盖玻唐盖在琼脂薄层屆用辗子轻压盖玻片?使盖玻片和载玻片之间的距离相当接近但不能压扁-盖玻片不能紧贴载玻常要彼此留有小缝隙为了通气.二是使各局部结构平行5. 倒保湿剂每皿倒入约3mL 20%的无菌甘油使皿内滤城完全湿润,以保持血内 嵐直：鈕遅鼠：.詢辭懺片湿蠹如瀬仁6'观察厂将培养好的载玻片取出，豊于显微镜下直接观察.五、实验报告去接观察根卷.毛酩 曲霉、青霉和红曲霉菌落形态 b 9 A . . .*4 C.4U1rnIII1111.2制片观察根醵V毛雜.曲靈 青鑑和红曲瘵的施构造 氏 对根霉、曲畴 青霉和红曲霉作载片培养,观察其形态构造«示教人实验报告1$绘出所观察到的各种霉菌的