-标本采集包装运输与实验室检测

1、CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION中国疾病预防控制中心 2014年12月CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever)是由埃博拉病毒(Ebola virus)引起的一种急性传染病l 人主要通过接触病人或感染动物的体液、分泌物和排泄物等而感染。l 临床表现主要为突起发热、出血和多脏器损害，病死率可高达50%-90%l 本病潜伏期为221天，通常为810天l 2014年，在几内亚、利比里亚和塞拉利昂等西非国家发生历史上

2、最严重的埃博拉出血热暴发疫情CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 为指导医疗机构和疾病预防控制机构工作人员对埃博拉出血热相关标本的采集、包装、运输和检测工作，保证生物安全CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 埃博拉出血热留观、疑似或确诊病例：l标本采集的个人防护生物安全要求l包装的要求l运输的方式l实验室检测方法CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 中华人民共和国传染病防治法l 病原微生物实验室生物安全管理条

3、例l 可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定l 卫生部人间传染的病原微生物名录l 国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则l 中国疾病预防控制中心关于规范埃博拉出血热病例标本接收和检测结果反馈等工作的通知中疾控应急发2014322号CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 应遵守医院感染管理规范和病原微生物实验室生物安全管理条例等相关生物安全规定l 在标准预防的基础上，应采取避免飞沫和接触感染的预防措施CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl采样人员应该接

4、受埃博拉病人采血规程的培训l培训内容lPPE的规范使用l采血要求及注意事项l采血时，需 2名采血人员同时在场CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 工作服l 一次性工作帽l 双层医用手套l 防渗透防护服(连帽，猴服)l 医用防护口罩(N95及以上)+护目镜或防护面屏 或普通外科口罩+正压头盔l 工作鞋+一次性防水靴套 或长筒胶靴l 防渗漏防护服(反穿式)CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl应提前将所有采血物品准备齐全，并配备：n洗手的设施n备用手套n消毒液n锐器盒CHI

5、NESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl一般发病后2周内，可在患者血标本中检测到病毒核酸和抗原，发病后310天的标本核酸和抗原的检出率高l留观病例、疑似病例诊断埃博拉病毒感染应采集发病3天以后的血标本CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl用分离胶无菌真空促凝管采集静脉血，每管3mll留观病例、疑似病例采集4管n2管送指定的具有埃博拉出血热检测资质的实验室进行检测n2管保存于样本采集单位或所在省级疾控中心CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND

6、PREVENTION采集采集后的处理方式后的处理方式l 应用封口膜封闭管口，消毒后由协助者将病人信息填写在采血管上，放入试管架中l 退入潜在污染区，将采血管放入50ml离心管内l 离心管消毒后，放入第二层包装尽快送检l 如不能立即送检，则置于4下保存，填写标本采集登记表保存方式保存方式l 全血采用冷藏运输，血清采用冷冻运输CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION恢复期标本采集l 确诊病例采集恢复期血标本2份，每份2管l 采集时间应间隔不少于48小时，送国家疾控中心病毒病所进行埃博拉病毒相关检测，用于指导病例管理l 恢复期血标本，并不限定

7、必须于出院前采集l 可采集发病2周后或出院(死亡)前标本CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 采取A类包装，符合UN2814要求l 容器或包装材料应达到国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则（Doc9284包装说明PI602）规定的A类包装标准CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION三层包装三层包装l 第一层为自封袋或50ml离心管l 第二层为防水、防漏的安全壳容器l 第三层为运输包装包装要求包装要求l 样本应用吸水纸等包裹，固定在自封袋或离心管内l 在坚固、防水、防漏的

8、第二层安全壳容器中，用吸水纸等填充物将内有标本的自封袋或离心管固定好，装入第三层包装l 第二层和第三次包装之间应放置冰排等制冷材料l 安全壳容器和外包装须与IATA危险物品条例包装制度650相符合CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION包装中的注意事项包装中的注意事项l 用0.5%有效氯消毒50ml离心管表面，并在潜在污染区放入第二层包装l 第二层包装用0.5%有效氯浸泡消毒15min后，擦拭干净带入清洁区，放入外层包装CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION样品清单样品清单l

9、填写标本说明两份，写明标本的基本信息、运送者及接收者地址等l 将标本说明密封在塑料袋里，用胶布分别粘贴于最外层包装的内侧和外侧l 标本相关信息需留档以便查验，方便实验室操作人员查对标本数量CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION收取标本收取标本l 由医院所在地的疾病预防控制机构到医院收取标本。标本运输之前，应按相关生物安全规定，与样本接收单位生物安全管理部门联系，办理相关手续l 运送日期确定后，立即将运送时间和运输方式通知接收单位，做好接收准备中国中国疾控中疾控中心检测的标心检测的标本本运输流程运输流程CHINESE CENTER FO

10、R DISEASE CONTROL AND PREVENTIONCHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION生物安全要求生物安全要求l 由专人专车运送，运送人员须有相关资质，且不得少于两人l 申请单位对与运送人员进行埃博拉病毒相关的生物安全培训l 在运送过程中采取相应的防护措施l 运输前仔细检查容器，要符合安全要求l 按照规定进行标本运输前的包装和送达后的开启标本运输标本运输的生物安全要求的生物安全要求CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION省市间标本运输省市间标本运输l 跨省、自治

11、区、直辖市运输疑似病例或留观病例样本时，应当将申请材料提交至运输出发地省级卫生计生行政部门进行初审l 对符合要求的，省级卫生计生行政部门应当在3个工作日内出具初审意见，并将初审意见和申报材料上报卫计委审批l 卫计委应当自收到申报材料后3个工作日内做出是否批准的决定l 符合法定条件的，颁发准运证书省市省市间间BSL-3BSL-3实验室标本运输流程实验室标本运输流程CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONWHOWHO、美国、美国CDCCDC等其他国家及地区关于等其他国家及地区关于标本的采集、包装和标本的采集、包装和运输的文件运输的文件l W

12、HO的Laboratory Guidance for the Diagnosis of Ebola Virus Disease Interim Recommendations2014.9.19l 英国卫生署的PHE Microbiology Services VHF Sample Testing Queries2014.9l 美国CDC的Interim Guidance for Specimen Collection, Transport, Testing, and Submission for Persons Under Investigation for Ebola Virus Disea

13、se in the United States2014.10.20CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 推荐用EDTA塑料采血管采集全血，最低量4mll 保存聚茴香脑硫酸钠(SPS)或柠檬酸采血管中,或促凝采血管也可以l 尿液标本也是可以的，但需要尽快检测l 死亡者或无法采血的儿童采集咽拭子CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl WHO和美国CDC包装形式均与我国一致，运输高致病性病原微生物菌（毒）种或样本的容器或包装材料应当达到国际民航组织危险物品航空安全运输技术细则

14、（Doc9284包装说明PI602）规定的A类包装标准CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl WHO关于运输主要依据Guidance on regulations for the Transport of Infectious Substances2013.1.1，如果本国没有实验室可以做检测可将标本寄到Laboratory Guidance for the Diagnosis of Ebola Virus Disease Interim Recommendations2014.9.19所写的实验室l 美国则按照各州的规定运输标本C

15、HINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONWHO发布的安全采集埃博拉出血热疑似患者血液标本WHO发布的如何安全运输埃博拉出血热疑似患者血液标本的流程 （国内运输）CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION检测方法1. 病毒核酸检测方法 （1）实时荧光定量RT-PCR法 （2）一步法常规RT-PCR方法2. 埃博拉病毒抗原抗体检测方法 （1）埃博拉病毒抗原检测方法（双抗体夹心法ELISA、胶体金快诊） （2）埃博拉病毒IgM抗体检测（抗体捕捉法ELISA） （3）埃博拉病毒IgG抗体检测

16、方法（间接法ELISA）CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 埃博拉病毒的实验室检测相关活动严格按照人间传染的病原微生物名录的要求，在相应的生物安全级别实验室开展n 病毒培养在BSL-4实验室n 动物感染实验在ABSL-4实验室n 未经培养的感染材料的操作在BSL-3实验室n 灭活材料的操作在BSL-2实验室l 按照病原微生物实验室生物安全管理条例等相关规定要求，做好生物安全工作CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 埃博拉病毒检测机构应将所有阳性和部分阴性血清标本送中国疾病预防控制中心病毒病所进行复核检测 实验室检测结果应及时反馈标本送检单位，并尽快上报上级主管部门CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 埃博拉病毒相关感染性标本的灭活，应在BSL-3实验室级生物安全柜内进行 CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION（1 1） T