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文档简介
1、保健食品中肉碱的测定Determination of carnite in health food1. 范围本方法规定了片剂、胶囊保健食品中肉碱的测定方法。 本方法适用于以肉碱为主要原料的片剂、胶囊中肉碱的测定。本方法最低检出量为 0.27ug。本方法最佳线性范围:0.050mg/mL 2.0mg/mL。2. 原理试样中的肉碱以 0.5mmol/L的盐酸超声提取,反相色谱 分离,与标准品的保留时间比较定性, 以峰面积外标法定量。 3试剂除特殊说明,所用试剂均为分析纯。实验用水为去离子 水或同等纯度的蒸馏水3. 1 磷酸氢二钾3. 2辛烷磺酸钠3. 3 0.50mmol/L 盐酸3. 4肉碱标准
2、溶液:精密称取干燥至恒重的肉碱标准品(含量98%)0.0200g,用0.50mmol/L盐酸溶解并定容为10.0mL,此溶液浓度为 2.0mg/mL。4. 仪器4. 1 HPLC系统,配有紫外检测器和色谱工作站;4. 2超声波提取器;4. 3溶剂微孔过滤器带 0.45um水相滤膜。5. 分析步骤5. 1试样预处理:准确称取粉碎并混合均匀的式样0.50g(含肉碱约40毫克);液体试样取5.0mL,于 50mL容量瓶中,加入 0.50mmol/L 盐酸约 35mL ,超声提取 10min,用0.50mmol/L盐酸定容,混匀,过滤,弃初滤液数毫升,收集滤液,过0.45um水相滤膜,为试样处理液。供
3、 HPLC分析5. 2试样分析5 . 2 . 1 色谱条件:Shim pakCLC ODS 柱;4.6 X 200mm,10um;5 . 2 . 2 流动相:0.05mol/L(3.4g) 磷酸氢二钾溶液, 0.002mol/L辛烷磺酸钠;10%乙腈;PH2.5。5. 2. 3 流速:0.8mL/min ;5. 2. 4检测器:紫外检测器;检测波长:210nm;5 .3标准曲线:分别取标准溶液0.0,0.25,0.50,1.0,2.0,2.5,5.0mL 标准溶液(3.4) 于 5mL 比色 管中;用0.50mmol/L盐酸稀释并定容为 5.0mL,分别进样 20uL进行色谱分析。用标准浓度 一峰面积绘制标准曲线。5. 4试样测定:取20uL试样处理液(5.1)注入色谱仪中, 以保留时间定性,面积定量。5. 5色谱图5. 6分析结果表述试样中肉碱的含量按式计算5. 6. 1计算X=m式中: X 为试样中肉碱的含量,mg/g;m为试样质量,g;C为试样处理液中肉碱的浓度,mg/mL ;V为试样处理液体积,m
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