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文档简介

1、最近按丁香园的帖子进行免疫鈿胞化学染色，结果 出来了。总结如下：L上午做的爬片晾到下午开始染色2. PBS浸冼爬片3遍,每遍5分钟oc 满加二抗jr 1$會M)承ifI3PBS没洗3遍X5分钟 14.取出爬片”将PBS甩掉，擦净细胞周阖的PBS届持爬片上少量液体但7不 能干片#擦一張爬片海一張爬片厲加试利C,蜉育20分钟15.PBS谀洗3遍X5分钟16.逹光配制DAB显色液上20,先加裁憎水,再加A液德匀后加B：液,C液屈匀，51/ 入F 117.取出爬片，将PBS甩掉，擦净细胞周囲的PBS,保持爬片上少量液体但不能干片,擦一张爬片厲一張爬片，摘加DAB, 10 钟左右显色。18o水冼切片丿苏

2、木素复染，固淀亿透朗，封片口第十一节细胞免疫熒光1) 在六孔板中换附合适巒废的细胞；2) 提询將PBS放入4。冰箔预冷，用预冷的PBS请洗鈿胞，洗三次以去掉 戎翱的死细胞；t 3) 提it將无木甲醇放衣.-20。C冰箱里预冷,向空中加入预冷的无水屮醉以 穿邃固定细胞*展-20。C冰霜里放置loniin;4)用枪头移去孔中的无水甲醉,用TBST冲冼细胞表面共洗3次，毎次lOmin;5)向夫孔板的每个孔中加入100订的5%山羊血请对细於封闭p喳温.放置Ih二6)封闭结束后,用TBST冲洗细胞表面卩每次lOmin;7)向六孔板的每个孔中加入80nl种释好的一抗抗体，放入4C冰箔过夜孵8) 抗孵育结束后，用TBST冲洗细胞表面，共洗3次毎；k lOmin; C9%9) 向六孔板的毎个孔中加入80T 种科好的二抗抗体.用锡缄包住头孔板瘦光孵育Ih;10) 二抗孵育结束后，用TBST冲洗细胞表面共冼3次，每次lOmin;11) 向空中摘加DAPI种释液(1:1000种释丿 室温放置l-2min;12) 向孔中满加TBST请冼细胞,5min;13

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