禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗接种的操作方法对免疫效果的影响.docx

1、禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗接利S11操作方法对免疫效果的影响李惠兰'，李凤元'，吴洪涛'，李树博2（1.辽宁省重大动物疫病应急中心，辽宁沈阳110161;2.辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁沈阳110164）中图分类号S852.5%文献标识码B文章编号1672-9692（2010）09-0070-03：摘要用禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗（H5亚型）对20日龄非免疫海兰褐蛋鸡雏接种，试:5验1组用25ml灭菌生理盐水稀释500羽/瓶疫苗，采用翅内侧三角区翼膜垂直刺穿的方法接种；试§§验2组用10ml灭菌生理盐水稀释500羽/瓶疫苗，采用离翅根最近的关

2、节部位内侧斜刺的方法接-:种；试验3组用试验2组同浓度稀释的疫苗，以试验1组相同的部位和接种方法接种；试验4组以试验t01组相同浓度的稀释疫苗，以试验2组相同的部位和接种方法接种.结果：试验1组和试验3组接种2；14d后，用HI方法检测禽流感抗体，100%达2，2，;试脸2组和试验4组，接种14d后，抗体检测100%J5小于2。说明禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗接种操作的方法对免疫效果有显著的影响。5J关键词禽疽苗;接种操作；免疫效果I疫苗的免疫效果受多种因素的影响，如疫苗质量、疫苗的保存与运输、疫苗的接种方法、被免疫动物的营养与健康状况、饲养环境因素等都会影响疫苗的免疫效果。禽流感重组鸡痘病毒

3、载体活疫苗的接种方法对免疫效果有显著的影响。本试验就该疫苗接种的操作方法对疫苗免疫效果的影响进行了探索。1试验材料1.1试验动物20日龄非免疫海兰褐蛋鸡雏90只，购自八家子养鸡场。1.2疫苗禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗（H5亚型），批号20050619o1.3诊断液禽流感H5抗原，禽流感H5阳性血清，禽流感H5阴性血清，批号20050120,购自哈尔滨兽医研究所。1.4试验器材疫苗接种针为标准的双锋接种针，试验GB/T18936-2003高致病性禽流感诊断技术HI方法所需器材。2试验方法2.1试验分组将20日龄非免疫海兰褐蛋鸡雏90只随机分为6组，其中，试验组4组，每组20只，分别标记为试验1

4、组、试验2组、试验3组和试验4组；对照组2组，每组5只，分别标记为对照1组和对照2组。2.2疫苗稀释疫苗A稀释液：疫苗稀释按疫苗使用说明书标准操作，用灭菌生理盐水25ml,稀释500羽/瓶的疫苗1瓶，待用。疫苗B稀释液：疫苗稀释浓度大于疫苗使用说明书规定的标准浓度，用火菌生理盐水10ml稀释500羽/瓶的疫苗1瓶，待用。2.3接种方法试验1组：用双锋接种针蘸取疫苗A稀释液，在鸡翅膀内侧三角区翼膜的无羽毛无血管部位垂宜刺穿翼膜1次，进针深度以接种针凹槽透过翼膜对而皮肤为准。试验2组：用与试验1组同型号的双锋接种针，懿取疫苗B稀释液，在鸡翅膀离翅根最近的关节部位内侧，接种针朝鸡体方向成45度角斜刺

5、1次，接种针的凹槽向上，进针深度以接种针的凹槽进入皮肤为准。收稿日期2010-07-16试验3组：用双锋接种针醮取疫苗B稀释液，接种方法与部位同试验1组。试验4组：用双锋接种针醮取疫苗A稀释液，接种方法与部位同试验2组。对照组：用同型号双锋接种针蘸取灭菌生理盐水，对照1组接种方法同试验1组，对照2组接种方法同试验2组。2.4样品采集及采样时间于接种前采集全血分离血清检测母源抗体。接种徐7d和14d分别采集全血，分离血清检测禽流感H5免疫抗体。2.5检测方法GBff18936-2003致病性禽流感诊断技术HI方法。3试验结果禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗不同接种操作方法免疫效果检测结果见表lo表1

6、禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗不同接种操作方法免疫效果检测结果组别免疫后夭数检测只数<1皿2!Log22Log23Log24Ix)g25Log26Log27Ix)g2抗体滴度2'%试验1组免疫前20200.免疫后7d20200免疫后14d20144362100试验2组免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d20200试验3组免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d2023456100试验4组免疫前20200免疫后7d20200免疫后14d20200对照1组免疫前550免疫后7d550免疫后14d550对照2组免疫而550免疫后7d550免疫后14<15504小

7、结与讨论4.1试验表明，禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗无论是标准浓度还是高于标准浓度稀释，采用翼膜直刺的接种方法禽流感抗体均高于翅关节内侧皮下斜刺的接种方法。不同的接种操作方法对免疫效果有显著的影响。试验1组、试多3组免疫接种后14d抗体滴度100%在222，而试验2组、试验4组免疫接种后14d抗体滴度100%小于21另据2005年黑山禽流感疫情期间全省13市用禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗对肉鸡进行紧急免疫时监测抗体的结果，免疫接种后14d检测1679只，33%抗体滴度小于67%抗体滴度在之间，从另一侧面证明了免疫接种不同操作方法对免疫效果有显著影响。4.2本试验使用的禽流感重组鸡痘病毒载体活疫

8、苗，疫苗抗原载体是禽痘病毒。载体禽痘病毒在免疫消体内增殖的程度与免疫鸡的禽流感抗体滴度的高低呈正相关性。试验1组、试验3组在翅膀内侧三角区翼膜刺穿1次，此接种部位是双面皮肤，两层皮肤间无肌肉等组织。而试验2组、试验4组在翅关节内侧斜刺1次，这两组的接种部位是一层皮肤，皮下是肌肉、骨或关节韧带等组织。本试验中，4个试验组均用相同刺种针接种1次，试验1组、试验3组被接种的皮肤细胞是试验2组、试验4组被接种的皮肤细胞的2倍。鸡体上禽痘病毒的敏感细胞是皮肤细胞和气管黏膜细胞。禽痘病毒一般经损伤的皮肤和黏膜而感染。禽痘病毒的传播方式是细胞间传播，禽痘病毒在敏感细胞内增殖后，不释放出来，通过细胞间桥直接传

9、播给相邻敏感细胞。试验1组、试验3组的接种方式更符合禽痘病毒的传播方式，疫苗接种采用了疫苗载体病毒自然感染的方式。试验1组、试验3组接种操作的方法，被接种的疫苗敏感细胞是试验2组、试验4组接种方法被接种的疫苗敏感细胞的2倍。4.3试验2组接种的疫苗抗原稀释浓度高于试验1组1.5倍，而试验2组在接种后14d抗体滴度低于2试验1组组接种后14d抗体滴度100%达222。可能原因是试验2组在关节部位用接种针斜刺接种，此部位皮下是肌肉、骨或关节韧带等组织，肌肉、骨或关节韧带等组织细胞不是疫苗载体禽痘病毒的敏感细胞，疫苗载体不能很好增殖，疫苗抗原就不能得到有效表达。4.4试验2组、试验4组禽流感抗体均低

10、于试验1组和试验3组，可能原因是试验2组、试验4组接种时将疫苗接种到皮下其他组织，导致疫苗直接接种到敏感细胞皮肤细胞的量不足：另一方面，如操作中进针深度不够，使疫苗不能有效接种到组织内，疫苗抗原同样不能很好表达。导致试验2组、试验4组的试验鸡实际疫苗接种量不如试验1组、试验3组确实有效。而疫苗的实际接种量直接影响免疫效果。说明只有接种操作方法正确，才能保证接种效果。综上所述，疫苗接种操作方式、方法的正确性，对免疫效果有显著影响，应引起养殖者高度重视。弛羔羊痢疾的诊疗体会2010年3月，法库县大孤家子张某饲养的绒山羊出生24d,出现精神萎顿、低头拱背等症状，病羊与母羊分开，不食,喜卧，排恶臭黄色

11、或带血的稀便，随后昏迷死亡。通过流行病学调查、临床症状和病理剖检变化，确诊为羔羊痢疾。经过采取综合防制措施，病情得到控制。1临床症状发病均为出生后24d的羔羊，超过1周的没有发病。病羊拒食、喜卧、排出黄色稀薄如水的粪便，有的还带有出血和黏液，下痢次数频繁，粪便恶臭，粪色灰白，黄色或暗红，羔羊时时弓背，体重减轻，体况愈来愈差，最后倒地死亡。2剖检变化剖检时可见尸体脱水现象严重，肛门周围被稀粪污染。真胃内有未消化的凝乳块，小肠出血性肠炎。胃、肠黏液充血和出血，肠黏膜坏死及溃疡，溃疡灶大小、多少不一。肠腔内充满血样内容物，肠系膜淋巴结肿胀充血或见有出血，心包积液，心内膜有出血点，肺有充血斑或淤血。23预防在常发地区，应定期注射羔羊痢I疾苗或“羊快疫、猝狙、肠毒血症、羔羊痢I疾四联苗”。平时加强母羊饲养管理，抓膘保§膘，使所产羔羊体格健状，抵抗力增强。做j好消毒，用2%的火碱对圈舍周围消毒，用百$毒杀和碘酚对羊舍消毒。合理哺乳，避免羔I羊饥饱不均，并注意羔羊冬季保暖工作。羔I羊出生后12h内，灌服土霉素0.15-0.2g,1I次/d,连服3d,有一定预防本病的效果。j4治疗用盐酸左旋氧窥